微生物實(shí)驗(yàn)室守則(編輯修改稿)
2024-10-25 00:34 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌。配制時(shí)若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過(guò)度加熱，以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時(shí)，加入后應(yīng)充分混勻。應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗(yàn)證的參數(shù)進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過(guò)濾除菌。培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH 的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過(guò)無(wú)菌性試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。此外，對(duì)高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過(guò)熱，過(guò)度滅菌可能會(huì)破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)的質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗(yàn)證。應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25 ℃ 測(cè)定）。若培養(yǎng)基處方中未列出pH 值的范圍，除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的pH 值允許的變化范圍很寬，否則。制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查：容器和蓋子不得破裂，裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡，固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪，在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無(wú)菌檢查。 培養(yǎng)基的貯藏自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號(hào)、配制日期等信息，并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。商品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱、批號(hào)、生產(chǎn)日期、失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說(shuō)明書上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。培養(yǎng)基滅菌后若貯藏在高壓滅菌器中，質(zhì)量可能會(huì)受影響，一般不提倡這種存放法。瓊脂培養(yǎng)基不得在O ℃ 或O ℃ 以下存放，因?yàn)槔鋬隹赡芷茐哪z特性。培養(yǎng)基應(yīng)避光保存，若要長(zhǎng)期保存，應(yīng)置于密閉容器中以防止水分流失。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如置冰箱保存，一般不超過(guò)1周，且應(yīng)密閉包裝，若延長(zhǎng)保存期限，保存期需經(jīng)驗(yàn)證確定。固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許1 次，以避免因過(guò)度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。若使用微波爐，應(yīng)避免培養(yǎng)基過(guò)度受熱及水分的蒸發(fā)，更要注意安全。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于45 ～50 ℃ 的水浴中，不得超過(guò)8 小時(shí)。傾注培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分，避免容器外壁的水滴進(jìn)人培養(yǎng)基中造成污染。使用過(guò)的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）應(yīng)按照國(guó)家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。 質(zhì)量控制試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)試驗(yàn)用培養(yǎng)基建立質(zhì)量控制程序，以確保所用培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)檢測(cè)的需要。實(shí)驗(yàn)室配制或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量依賴于其制備過(guò)程，采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長(zhǎng)或復(fù)蘇，從而影響試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目是pH、適用性檢查試驗(yàn)，定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗(yàn)確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。有效期的長(zhǎng)短將取決于在一定存放條件下（包括容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。除藥典附錄另有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采用已驗(yàn)證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基
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