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zt微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序質(zhì)(參考版)

2025-07-17 16:26本頁面
  

【正文】 傳染源為病人與帶菌者,主要通過飛沫傳播,也可通過被污染的手、玩具、文具、食具以及食物傳播并造成流行。 7 .白喉?xiàng)U菌 白喉是由白喉?xiàng)U菌引起的急性呼吸道傳染病。公共場所應(yīng)注意經(jīng)常通風(fēng),保持室內(nèi)空氣新鮮,提倡濕式掃地,防止病原菌隨灰塵吸入人肺。加強(qiáng)結(jié)核病人的管理,減少和消滅傳染源。 定期健康查體,做痰菌檢查、 X 線檢查,使之早期發(fā)現(xiàn)及時(shí)治療,實(shí)施有效的化療。為預(yù)防結(jié)核病必須盡早接種卡介苗。實(shí)踐證明 DoTS 是治療結(jié)核病的最佳方法。中文稱為“全程監(jiān)督短程化療”,是當(dāng)今全世界公認(rèn)的治療結(jié)核病最有效的方法。嚴(yán)格按統(tǒng)一化療方案用藥,不得擅自更改方案或中途停藥,否則可產(chǎn)生耐藥性,造成難以治愈的后果。 目前,對(duì)新發(fā)現(xiàn)的肺結(jié)核病人經(jīng)確診后抓緊時(shí)間治療,是完全可以治愈的。結(jié)核桿菌主要存在于病人痰內(nèi),所以排菌病人是主要傳染源,未經(jīng)化療和化療初期其傳染力最強(qiáng)。感染結(jié)核菌后僅少部分人發(fā)病,嬰幼兒、青春期、老年人或營養(yǎng)不良、艾滋病病毒感染者或長期使用免疫抑制劑的人發(fā)病率較高。 肺結(jié)核是一種主要以空氣為傳播途徑的呼吸道傳染病。目前,結(jié)核病仍是傳染病首位殺手,全球有約 20 億( l/3 )的人口感染了結(jié)核菌,有結(jié)核病人 2000萬,每年新發(fā)生 900萬病人,而死亡人數(shù)高達(dá)300萬,為此,世界衛(wèi)生組織于 1993 年 4 月 23 日 宣布“全球結(jié)核病緊急狀態(tài)宣言”,號(hào)召全球緊急動(dòng)員,加強(qiáng)結(jié)核病控制工作,并把每年的3 月 24 日 作為“世界防治結(jié)核病日”,以提醒民眾加深對(duì)結(jié)核病的認(rèn)識(shí)。結(jié)核桿菌細(xì)長略彎曲,有時(shí)有分枝或出現(xiàn)絲狀體,經(jīng)抗酸染色后在顯微鏡下才能看見,故又稱分枝桿菌。在醫(yī)院感染中,特別在重癥監(jiān)護(hù)病房中是最常見的機(jī)會(huì)致病菌,可引起下呼吸道感染、尿道系統(tǒng)感染、敗血癥等。該菌廣泛存在于自然界的水和土壤中,也是人和動(dòng)物腸道及上呼吸道的正常菌群。當(dāng)機(jī)體抵抗力下降,或細(xì)菌毒力強(qiáng)、數(shù)量多時(shí)則侵入血流形成菌血癥或敗血癥。 本病的傳染源主要為帶菌者,病人為次。對(duì)于一般消毒劑也十分敏感, 1% 石炭酸、 75 %乙醇或 1 %新潔爾滅可起殺菌效果。存在于患者鼻咽部、血液、皮膚瘀點(diǎn)及腦脊液中,能從帶菌者鼻咽部查到。人群對(duì)本病普遍易感,以 6 個(gè)月~2 歲兒童發(fā)病率最高。 4 .腦膜炎雙球菌 流行性腦脊髓膜炎簡稱流腦,是由腦膜炎雙球菌引起的一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染病。 肺炎鏈球菌具有相當(dāng)多的型別,在預(yù)防上自 1983 年來已有能針對(duì)常見 23 種不同型別的有效的肺炎鏈球菌疫苗上市。但是自從第一株抗青霉素肺炎球菌分離出之后陸續(xù)在世界許多國家也發(fā)現(xiàn)抗藥性菌株產(chǎn)生,抗藥性比例更是逐年增加。一旦當(dāng)身體虛弱,抵抗力降低或呼吸道受到傷害時(shí),肺炎鏈球菌就有可能乘機(jī)侵犯人體造成感染,如不加以注意及適當(dāng)?shù)闹委熞部赡軙?huì)造成死亡。目前世界上己經(jīng)確定的有 90 種不同型別;在正常狀況下於人體咽喉及呼吸道都可以發(fā)現(xiàn)。 3 .肺炎鏈球菌 肺炎鏈球菌常是造成許多侵入性感染的重要致病菌之一,尤其會(huì)引起兒童及 65 歲以上老人呼吸道疾病,如肺炎、中耳炎、鼻竇炎等。發(fā)病季節(jié)以冬春季較高,易感者多為兒童,尤以 2~8 歲為多。在少數(shù)情況下細(xì)菌可侵入血循環(huán)形成敗血癥及遷延性化膿病灶,嚴(yán)重時(shí)產(chǎn)生發(fā)熱等全身癥狀及皮疹。疾病早期易從患者及帶菌者鼻咽分泌物中分離到,分泌物通過飛沫侵入易感者的呼吸道。 2 .溶血性鏈球菌 鏈球菌為革蘭陽性球菌,對(duì)人類致病者 90% 屬于 A 組,又稱為化膿性鏈球菌。 MRSA 引起的肺炎和肺膿腫常繼發(fā)于流感、麻疹等。葡萄球菌在院內(nèi)感染中一直占重要地位。 1 .葡萄球菌 葡萄球菌為革蘭陽性球菌,空氣、水、食品、塵埃、日常使用物品、周圍環(huán)境均存在,也是人體正常菌叢的組成部分。 Dimmick (1969) 提供了比較系統(tǒng)的資料,表明磨補(bǔ)牙時(shí)產(chǎn)生了大量細(xì)菌氣溶膠,而且粒子徑均較小,這種情況國內(nèi)也己開始重視。 表 5 某大學(xué)醫(yī)院手術(shù)過程中空氣細(xì)菌濃度變化(cfu/m3 ) 采樣地點(diǎn) 準(zhǔn)備前 準(zhǔn)備 手術(shù)開始 術(shù)中 手術(shù)結(jié)束 術(shù)后30min手術(shù)間 650 1876 1984 1306 1626 1192風(fēng)機(jī)口 376 1196 1204 1008 1040 718洗手間 512 1960 1372 1076 1172 756走廊 526 1612 1424 1116 856 776有研究人員測定了北京某醫(yī)院各科室一天中的不同時(shí)間的空氣細(xì)菌濃度,發(fā)現(xiàn)有很大區(qū)別(表 6 )。調(diào)查了某大學(xué)附屬醫(yī)院手術(shù)過程中空氣細(xì)菌濃度的變化(表 5 ),從中可見工作人員的活動(dòng)是手術(shù)室空氣細(xì)菌的重要來源。認(rèn)為醫(yī)院內(nèi)軍團(tuán)桿菌病是由于病人吸入其氣溶膠引起的??諝庵锌偩颗c金黃色葡萄球菌含量基本平行,金黃色葡萄球菌最高濃度為 155cfu/ m3 , 冬季較多。綠膿桿菌在33 個(gè)采樣點(diǎn)中有 9 個(gè)點(diǎn)為陽性,其最高濃度為 。王亞平( 1987 )報(bào)道了燒傷病房空氣細(xì)菌的種類(表3 )及量的變化規(guī)律,可見燒傷病房空氣細(xì)菌濃度以探視后最高,平均值可達(dá) 2032cfu/m3 ,凌晨最低為 864. 8cfu/ m3 。 2 、抑制抗體形成及干擾素作用 損傷性診療器械及體外異物: 如血管、尿道的長期插管、各種導(dǎo)管、穿刺器械、纖維內(nèi)窺鏡、透析裝置、心血管修補(bǔ)器材以及手術(shù)、異物植入等,破壞人體正常屏障,提供微生物直接進(jìn)入體內(nèi)途徑或成為病灶。表 2 診療措施對(duì)病人防御機(jī)能的影響抗生素: 1 、改變皮膚、粘膜、上呼吸道、腸道的正常菌群 2 、耐藥菌株的選育與生長 3 、菌群失調(diào)癥 照射及抗癌療法: 1 、抑制骨髓及網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能 2 、降低粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及抗體產(chǎn)生 3 、損傷其他生長細(xì)胞,如腸粘膜,產(chǎn)生潰瘍和出血,以致成為病菌侵入門戶。 4 .侵入性診斷和治療措施(表 2 )的應(yīng)用 隨著科學(xué)的發(fā)展,新的醫(yī)療器械大量出現(xiàn),其中有些是侵入性的,需經(jīng)過病人皮膚、粘膜、血管和腔道進(jìn)行檢查和治療,如內(nèi)窺鏡檢查、血液透析、血管插管、留置導(dǎo)尿、氣管切開等不同程度損傷了機(jī)體的防御屏障,由此帶來醫(yī)院內(nèi)感染的危險(xiǎn)因素。調(diào)查表明醫(yī)務(wù)人員手上和鼻咽部的金黃色葡萄球菌帶菌率相當(dāng)高。 2 .醫(yī)院病人多為易感人群 醫(yī)院病人抵抗力普遍下降,在醫(yī)院中由于手術(shù)治療和藥物及免疫抑制劑的應(yīng)用,進(jìn)一步降低了病人的抵抗力,致使一些正常菌叢和條件致病菌也會(huì)對(duì)病人引起嚴(yán)重感染。 醫(yī)院的空氣、地面、用具、門、窗把手、水槽、水龍頭、醫(yī)療器械等皆可被病原微生物污染,甚至成為醫(yī)院內(nèi)感染微生物的儲(chǔ)菌所。 表 1 空氣中各屬細(xì)菌比例菌 屬 比 例(%) 菌 屬 比 例(%)微球菌 ( Micrococcus ) 41 八疊球菌 ( Sarcina ) 4氣球菌 ( Aerococcus ) 8 芽孢乳桿菌 ( Sporolactobacillus ) 1葡萄球菌 ( Staphylococcus ) 11 梭狀芽孢桿菌 ( Clostridium ) 1消化球菌 ( peptococcus ) 3 芽孢八疊球菌 ( sporosarcina ) 1消化鏈球菌 ( Peptostreptococcus ) 3 沙雷氏菌 ( Serratia ) 3奈瑟氏菌 ( Neisseria ) 3 假單胞菌 ( Pseudomonas ) 2鏈球菌 ( Streptococcus ) 3 白色念珠菌 ( Leuconostoc ) 1副球菌 ( Paracoccus ) 5 乳酸桿菌 ( Lactobacillus ) 1片球菌 ( Pediococcus ) 2 黃單胞菌 ( Xanthomonas ) 1芽孢桿菌 ( bacillus ) 8 二、醫(yī)院環(huán)境特征1 .醫(yī)院是病人集中的場所 醫(yī)院中流行的菌株較多為耐藥菌株或多重耐藥菌株,因此造成治療上的困難醫(yī)院中病原體來源廣泛,種類復(fù)雜,外環(huán)境污染也較嚴(yán)重,容易發(fā)生感染。 空氣中微生物絕大多數(shù)是非致病的腐生菌,常見的有微球菌屬、芽孢桿菌屬、棒狀桿菌屬、八疊球菌屬、芽枝毒屬、交鏈孢霉屬、青霉屬、曲霉屬等??諝馕⑸锶旱慕M成及濃度很不穩(wěn)定,隨時(shí)間、空間、氣象條件、人口疏密、季節(jié)的變化而呈現(xiàn)不同的分布。 空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵,這類微生物大多數(shù)是腐生性的;還來 源于人和動(dòng)物,它們大多數(shù)是通過呼吸道排出的,其中也包含有病原微生物,懸浮在大氣中。 3 .空氣 空氣本身缺乏微生物生活所必需的營養(yǎng)物,日光對(duì)微生物也具有很強(qiáng)的殺菌作用。鞘細(xì)菌及有柄附生細(xì)菌也常見于水體中。 2 .水 水具有微生物生命活動(dòng)適宜的溫度、 pH 、氧氣等,因此,水中生長著眾多的微生物類群,它們主要來源土壤、空氣、動(dòng)植物尸體、人和動(dòng)物的排瀉物、工業(yè)及生活污水。 土壤細(xì)菌占土壤微生物總數(shù)的 70%~90% ,放線菌、真菌次之。土壤中還含有氣體,主要是 C0 2 , 0 2 和 N 2 。土壤中的水分是一種濃度很稀的鹽類溶液,其中含有各種有機(jī)和無機(jī)氮素、微量元素、維生素等,是微生物的營養(yǎng)庫。 一、微生物來源 微生物由于結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快等特點(diǎn),因此,它們?cè)诘厍蛏系姆植歼h(yuǎn)比動(dòng)植物要廣泛得多。易感者只要與傳染源有短時(shí)間的接觸即有可能發(fā)病。 空氣不是微生物產(chǎn)生和生長的自然環(huán)境,它缺乏微生物生長所需要的足夠的水分和可利用的養(yǎng)料,但由于人們的生產(chǎn)和生活活動(dòng),一些病原微生物如結(jié)核桿菌、白喉?xiàng)U菌、金黃色葡萄球菌、流感病毒、麻疹病毒等,成為空氣傳播疾病的病原。微生物、塵瞞、花粉等過敏原進(jìn)入人體后,可引發(fā)哮喘等變態(tài)反應(yīng)性疾病。來自微生物、植物的生物污染及控制尚未引起充分的關(guān)注。 空氣污染可分為幾個(gè)方面,一是物理性污染(如噪聲、電磁波等),一是化學(xué)物質(zhì)或放射性物質(zhì)造成的污染,化學(xué)污染以“倫敦?zé)熿F”、“洛杉磯煙霧”和“切爾諾貝利核電站事件”為代表,曾造成一些重大的死亡事故而較早引起人們的重視。最后列舉不同國家的室內(nèi)或醫(yī)院空氣細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)及空氣的凈化與消毒方法。所有存在菌種應(yīng)具備清單。各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間接種,一般在接種三次后作一次全面的鑒定,注意菌種有無污染及變異,如發(fā)現(xiàn)變異時(shí),應(yīng)及時(shí)更換。保管人員變動(dòng)時(shí),必須嚴(yán)格交接手續(xù)。實(shí)驗(yàn)完畢后,用含氯制劑1000mg/L消毒桌面、地面。每天早上8:00—8:30用紫外線消毒或在凌晨46點(diǎn)用多功能機(jī)消毒2小時(shí),每月檢查一次紫外燈的無菌效果。編寫: 審核: 批準(zhǔn):批準(zhǔn)日期:2004年4月20日 無菌間規(guī)章制度 文件編號(hào):LAB-OP-XJ007第1頁,共1頁版本:1生效日期:20040420 每一個(gè)工作人員必須樹立無菌觀念,嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作。當(dāng)工作環(huán)境被細(xì)菌污染,必須立即消毒處理,報(bào)告主管人員,采取必要措施。每天發(fā)出的微生物報(bào)告應(yīng)認(rèn)真復(fù)審,分析報(bào)告、評(píng)價(jià)報(bào)告。細(xì)菌專業(yè)人員不斷更新知識(shí),了解細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)新進(jìn)展。從事細(xì)菌專業(yè)技術(shù)人員,應(yīng)了解醫(yī)院監(jiān)測知識(shí),掌握其檢測方法,定期統(tǒng)計(jì)分析醫(yī)院感染細(xì)菌分布,耐藥變遷,并將其結(jié)果反饋臨床。編寫: 審核: 批準(zhǔn):批準(zhǔn)日期:2004年4月20日 細(xì)菌室操作技術(shù)規(guī)范 文件編號(hào):LAB-OP-XJ006第1頁,共1頁版本:1生效日期:20040420 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)操作按全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程。,防止逃逸或造成人與實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物的交叉感染。在進(jìn)行特殊傳染病檢驗(yàn)后,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒,遇有場地,工作服或體表污染時(shí)應(yīng)及時(shí)處理,防止擴(kuò)散,并視污染情況向上級(jí)報(bào)告。檢驗(yàn)人員結(jié)束操作后應(yīng)及時(shí)洗手,毛巾專用,每天消毒。各種廢棄標(biāo)本應(yīng)分類處理(焚燒,入污水池,消毒或滅菌)。無菌物品如棉簽,棉球,紗布等及其容器應(yīng)在有效期內(nèi)使用,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行無害化處理,不得隨意丟棄。微量采血應(yīng)做到一人一針一管一片。使用合格的一次性檢驗(yàn)用品,用后進(jìn)行無害化處理??偨Y(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)。每三個(gè)月用ATCC2785ATCC2592ATCC25922菌株對(duì)全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行鑒定和藥敏質(zhì)量控制。每天觀察培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱、冰箱的溫度,并做好記錄。每周進(jìn)行藥敏試驗(yàn)質(zhì)量控制。每批自配或購置的培養(yǎng)基、生化鑒定等試劑必須用標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC2785ATCC2592ATCC25922質(zhì)控。加強(qiáng)質(zhì)量控制和專業(yè)理論知識(shí)的學(xué)習(xí),規(guī)范操作,正確分析處理結(jié)果??膳鋫鋺?yīng)急藥品。一次性手套必須先消毒后丟棄??稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑?。10. 工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)前,應(yīng)在專用的更衣室(或緩沖間)穿著背開式工作服或其它防護(hù)服。結(jié)核桿菌的培養(yǎng)及標(biāo)本涂片務(wù)必在生物安全柜里操作。工作人員在處理傳染性物質(zhì)或動(dòng)物之后,以及在離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)要洗手。在各種操作進(jìn)程中均應(yīng)盡量避免或減少氣溶膠產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)室里應(yīng)保持整潔,不存放與工作無關(guān)的雜物。,應(yīng)立即用肥皂洗手并沖洗干凈,再外用消毒藥水,如誤入口內(nèi),應(yīng)立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,必要時(shí)根據(jù)實(shí)際情況服用有關(guān)藥物。,不要立即用水沖洗,應(yīng)先用紙巾、布等敷料加上消毒液(如5%石炭酸、3%來蘇兒等)消毒30分鐘以上,然后再清洗。、最好采用一次性工具,不能采用一次性工具者,每次取材前均應(yīng)徹底消毒。,所有用于試驗(yàn)的反應(yīng)板、吸頭等用消毒液浸泡(至少24小時(shí)以上)后清洗或丟棄。,必要資料和書籍帶入后,應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺(tái)。,經(jīng)常清潔,注意防塵和防潮。、酒精燈等是否關(guān)閉,觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況,用浸有消毒液的抹布將操作臺(tái)擦拭干凈,并將試劑、用具等放回原處,清理臺(tái)面,未污染的廢棄物扔進(jìn)污物桶,有菌廢棄物應(yīng)送高壓滅菌后處理。,應(yīng)沉著處理,切勿慌張,立即關(guān)閉電閘,積極滅火。,應(yīng)立即用過氧乙酸消毒或浸于3%來蘇兒溶液中510分,再用肥皂洗手并沖洗干凈;如誤入口內(nèi),應(yīng)立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,根據(jù)實(shí)際情況服用有關(guān)藥物。未發(fā)出報(bào)告前,請(qǐng)勿丟棄標(biāo)本。,必要資料和書籍帶入后,應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺(tái)。,不準(zhǔn)吸煙、吃東西及用手觸摸面部
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