常見緩沖溶液配制(參考版)
2025-06-30 14:39本頁面
【正文】 。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見光，于20℃貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸鈉鹽于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小份于20℃貯存。～25ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的無水乙醇中，最后定容至10ml。分裝成小份于20℃貯存。分裝成小份于20℃貯存。常以25ug/ml～50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。羧芐青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） ，最后定容至10ml。分裝成小份于20℃貯存。為了配制平板，需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。YPD培養(yǎng)基 ：蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g 用水補足體積為1L后，高壓滅菌。2YT培養(yǎng)基 ：蛋白胨 16g 酵母提取物 10g 氯化鈉 4ml 如果需要用1N NaOH（～1ml），再補足水至1L。冷卻到60℃，再加100ml滅菌的170mmol/L KH2PO4/ mol/L K2HPO4的溶液（，使終體積為100ml。SOC培養(yǎng)基 成分、方法同SOB培養(yǎng)基的配制，只是在培養(yǎng)基冷卻到室溫后，除了在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂外，再加2ml滅菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足夠水中，再用水補足到100ml，）。分成100ml的小份，高壓滅菌。注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。用鋁箔包裹裝液管，于4℃貯存。1％二甲苯青FF（xylene cyanole FF） 溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。1mol/L 磷酸二氫鈉（ml） 1mol/L 磷酸氫二鈉（ml） 最終pH值 877850815775735685625565510450390330280 123150185225265315375435490550610670720 TE（用于懸浮和貯存DNA）成分及終濃度 配制100ml溶液各成分的用量 10mmol/L Tris－HCl1mmol/L EDTA水 1ml 1mol/L TrisHCl（，25℃） 200ul mol/L EDTA（pH ） Tris緩沖液（TrisHCl buffer） ，再根據(jù)所要求的pH（25℃下）加一定量的濃鹽酸（），用水調(diào)整終體積至1L。H2O）貯液：溶解138g于足量水中，使終體積為1L。磷酸緩沖液（phosphate buffer） 按照下表所給定的體積，混合1 mol/L 的磷酸二氫鈉（單堿）和1mol/L 磷酸氫二鈉（雙堿）貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。甲酰胺（deionized formamide） 直接購買或加Dowex XG8 混合樹脂于裝有甲酰胺的玻璃燒杯中，用磁力攪拌器輕輕攪拌1h，可去除甲酰胺中的離子。在37℃溫浴至少12h，然后在15 psi 條件下高壓滅菌20min，以使殘余的DEPC失活。20SSC成分及終濃度 配制1L溶液各成分的用量 300mmol/L 檸檬酸三鈉（二水） 3mol/L 氯化鈉 水 補足1L 溶解檸檬酸三鈉（二水），加幾滴10N ，用水補足體積至1L。100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） 可以購買到100mmol/L純dNTPs貯液，80℃可貯存至少6個月。過濾除菌及雜質(zhì)，分裝成小份于20℃貯存。100Denhardt試劑（Denhardt39。100％三氯乙酸（TCA）:在裝有500gTCA的試劑瓶中加入100ml水，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。10N氫氧化鈉（NaOH）：（磁力攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。用1mol/L的Tris－，于20℃貯存。10mg/mlRnase（無DNase）（DNase－free RNas
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