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干擾素基因研究進(jìn)展及其在抗病育種中的應(yīng)用展望論文(參考版)

2025-06-26 21:05本頁(yè)面
  

【正文】 應(yīng)用較多的是IL2。但是,干擾素必須在病毒感染的早期,也就是體內(nèi)病毒尚未廣泛散布和引起嚴(yán)重病變之前應(yīng)用干擾素才能奏效。干擾素具有很廣的抗病毒譜,可對(duì)同種和異種病毒均有作用,并且對(duì)動(dòng)物沒(méi)有或很少的毒性,抗原性也很弱,因此可以反復(fù)應(yīng)用,并且干擾素還有一系列的免疫調(diào)節(jié)作用。Ⅰ型與抗病毒作用有關(guān),Ⅱ型則在免疫調(diào)節(jié)中起著重要的作用。干擾素有Ⅰ、Ⅱ型干擾素。其中在獸醫(yī)臨床最廣的是干擾素和白細(xì)胞介素。不同的細(xì)胞因子對(duì)決定病毒感染的結(jié)局和疾病的表現(xiàn)起著重要作用。(一) 抗病毒藥物作用的機(jī)制(1)直接抑制或殺死體內(nèi)病毒;(2)抑制病毒的生物合成;(3)阻止病毒穿入細(xì)胞或抑制病毒釋放(4)增強(qiáng)宿主抗病毒能力。而且發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。對(duì)雞球蟲基因工程疫苗及RAPD技術(shù)鑒定其蟲種與蟲株進(jìn)行了富有成果的探索性研究。中國(guó)農(nóng)科院上海寄生蟲研究所等單位在新抗球蟲藥如殺球靈、常山酮、馬杜霉素和ACⅠ號(hào)(氯氰脲嘧啶)等療效試驗(yàn)方面做了大量工作。近年來(lái)引進(jìn)和研制的抗球蟲藥有十余種之多。 雞球蟲病是對(duì)家禽危害最嚴(yán)重的寄生蟲病,對(duì)該病的研究已取得顯著進(jìn)展。該病常易與大腸桿菌合并感染,有并發(fā)感染時(shí)死亡率大為增高。該病可經(jīng)蛋傳播,用林可霉素和壯觀霉素聯(lián)合注射于孵化種蛋氣室內(nèi),可減少蛋的霉形體傳遞。 雞慢性呼吸道病(CRD)由雞敗血霉形體(MG)引起,在我國(guó)各地分布很廣,造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。近年來(lái)促菌生、調(diào)痢生、乳酸菌等微生態(tài)制劑在防治畜禽沙門氏菌病方面取得了較好的效果。在雞白痢血清學(xué)診斷方面,提出了幾種新的方法,如間接血凝試驗(yàn)、單克隆抗體協(xié)同凝集試驗(yàn)及微量凝集試驗(yàn)等。藥物控制以及加強(qiáng)獸醫(yī)衛(wèi)生工作等常規(guī)辦法。一般認(rèn)為雞白痢沙門氏菌主要侵害雛雞,但近年來(lái)發(fā)現(xiàn)各種年齡的雞均可感染發(fā)病,在鵪鶉和珍珠雞中亦見爆發(fā)本病的報(bào)道。為了預(yù)防小雛雞剛出生時(shí)發(fā)生大腸桿菌病,注射頭孢噻呋鈉(速可生、美樂(lè)仙)是可行的。在用藥方面要根據(jù)藥敏試驗(yàn)合理用藥,既降低了用藥成本,又發(fā)揮了藥效,目前藥效較好的藥有先鋒霉素系列(先鋒V號(hào),Ⅵ號(hào),頭孢噻肟、頭孢哌酮、頭孢曲松鈉等),丁胺卡那霉素、慶大霉素、某些喹諾酮類等。此外,還開展了雞大腸桿菌質(zhì)粒DNA指紋圖譜分析,表明質(zhì)粒圖譜法將在本病流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)揮重要作用。但對(duì)于一些養(yǎng)雞場(chǎng)來(lái)說(shuō)最好使用本場(chǎng)分離株制作的疫苗,其免疫保護(hù)率更高。我國(guó)各地區(qū)流行的血清型不一,除常見的O1、O2、O78外,迄今已報(bào)道的雞致病性血清型有50多個(gè),現(xiàn)已知其中有12個(gè)優(yōu)勢(shì)致病性血清型。本病的臨診病型復(fù)雜多樣,其中最常見和危害最大的是急性敗血型、肝周炎、氣囊炎和卵巢炎大腸桿菌病。而在育雛末期至育成期、成年禽生產(chǎn)期間,本病的發(fā)生較為嚴(yán)重,引起較高的發(fā)病率和死亡率。中國(guó)應(yīng)在預(yù)防禽流感方面多做一些工作 大腸桿菌病由一定血清型致病性大腸埃希氏桿菌引起的、近年來(lái)已上升為危害養(yǎng)禽業(yè)最主要、防治最棘手的疾病之一。流感的變異雖然很快,但當(dāng)前還沒(méi)有出現(xiàn)H7亞型的臨床病例。近年來(lái)國(guó)內(nèi)對(duì)禽流感的亞型H9N2株和亞型H5N1株的疫苗研究已經(jīng)達(dá)到了比較成熟的程度,疫苗的保護(hù)效率也較高。我國(guó)對(duì)禽流感的疫情調(diào)查、診斷、監(jiān)測(cè)、病毒分離和鑒定、疫苗研制及免疫、病毒分子生物學(xué)等進(jìn)行了卓有成效的研究。1996年陳福勇等從某雞場(chǎng)分離到H9N2毒株,1998年唐秀英等報(bào)道,186份病料中分離到6株禽流感病毒,分別是:從發(fā)病雞群分離到H14N5毒株,2株H4N6、3株H9N2;從鵝體分離到H5N1毒株,經(jīng)鑒定,達(dá)到對(duì)雞的高致病力標(biāo)準(zhǔn)。其后,農(nóng)業(yè)部指定哈爾濱獸醫(yī)研究所對(duì)禽流感進(jìn)行診斷、研究,并已建立起動(dòng)物流感中心。以上的分離株均為不致病的低毒力病毒株,未引起禽流感的流行。IBVS蛋白形態(tài)多樣性導(dǎo)致IBV的多種血清型,利用中和試驗(yàn)、HI試驗(yàn)、免疫酶法、單克隆抗體法、寡核苷酸指紋圖譜、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性圖譜和核酸序列分析都證實(shí)了病毒存在多種血清型和極大的變異性。針對(duì)IBV的致病型和血清型的多樣性,進(jìn)行毒株篩選,研制多價(jià)IB疫苗可望更好地解決其防制問(wèn)題。1997年江蘇、青島等地報(bào)道一種腺胃型傳染性支氣管炎,分離的病毒與IBVM41和IBVG株單抗有明顯的交叉反應(yīng),用分離毒株試制成滅活苗免疫雞群獲得較好的保護(hù)效果。常規(guī)疫苗(H5H120)對(duì)腎病變型的流行幾乎無(wú)效,Ma5可同時(shí)預(yù)防呼吸型傳支也或預(yù)防腎型傳支,最近六七年來(lái)28/86株對(duì)腎型傳染性支氣管炎的免疫效果較好,在發(fā)生該病時(shí)可以緊急免疫28/86疫苗,能大大減少發(fā)病率和死亡率。由于不同血清型之間交叉保護(hù)性弱,從而給IB的免疫預(yù)防帶來(lái)不少困難。在臨床和病理上通常可分為呼吸型和腎病變型兩類,IBV的血清型至少有30種之多。還有從國(guó)外引進(jìn)的某種MD疫苗質(zhì)量出現(xiàn)問(wèn)題,導(dǎo)致誰(shuí)家使用該公司的疫苗誰(shuí)家的雞發(fā)病,教訓(xùn)非常深刻,值得我們獸醫(yī)界反省?,F(xiàn)在基本普及了細(xì)胞菌(液氮苗),單純的使用凍干HVT疫苗保護(hù)率較低,選用疫苗時(shí)要盡量選質(zhì)量好的CVI988液氮苗或含有CVI988及HVT的二價(jià)苗。還以桿狀病毒為載體,在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)了MDV的pp38基因和B抗原基因,這種用重組DNA技術(shù)產(chǎn)生的pp38和B抗原基因,將有助于進(jìn)一步研究該基因產(chǎn)物在MDV所致腫瘤發(fā)生及抗MDV免疫保護(hù)中的生物學(xué)功能。近年來(lái)在MDV的分子生物學(xué)研究方面取得了良好的進(jìn)展。我國(guó)1975年開始聯(lián)合攻關(guān),于1978年復(fù)制成功國(guó)際上廣泛應(yīng)用的HVT疫苗,1981年研制成同源弱毒疫苗“814”、CVI988和細(xì)胞游離毒的HVTFc126及二價(jià)苗等。在防制該病的流行中,各地相對(duì)都比較重視實(shí)施綜合防制措施,在搞好環(huán)境衛(wèi)生、凈化疫源、合理使用疫苗等措施上建立了一套較為有效的防制辦法。在使用疫苗時(shí)要弱毒苗和中等毒力疫苗交替使用,或先使用弱毒苗然后再使用中等毒力疫苗對(duì)預(yù)防強(qiáng)毒法氏囊病毒的感染非常好。還研制成中和性單克隆抗體和核酸探針等,為該病毒抗原或抗體的檢測(cè)提供了先進(jìn)的測(cè)試手段。對(duì)病毒遺傳變異的分析以及利用核酶剪切病毒的RNA等使對(duì)該病毒的研究提高到分子生物學(xué)的水平。廣大禽病工作者,對(duì)該病進(jìn)行了大量試驗(yàn)研究,在病原方面各地分離鑒定了多株野毒,還進(jìn)行了血清亞型的研究,證實(shí)了亞型的存在和危害,并初步證明我國(guó)有超強(qiáng)毒株存在。在1989年,該病突然在全國(guó)呈爆發(fā)流行,發(fā)病率高,死亡率高,在一個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)內(nèi)每批雞都發(fā)病,很難控制,但使用疫苗后,免疫效果非常好。由于該病引起雛雞的免疫抑制,從而使病雞對(duì)多種病原微生物更易感,容易繼發(fā)新城疫、傳染性支氣管炎、大腸桿菌病、葡萄球菌病、慢性呼吸道病等,而且對(duì)多種疫苗接種的免疫應(yīng)答能力降低,因此該病已成為目前危害養(yǎng)雞業(yè)的三大主要疫?。∟D、IBD、MD)之一。 IFN作用的信號(hào)傳遞過(guò)程,盡管已總結(jié)出了被廣為接受的模型,但這一模型中最基本的設(shè)想?yún)s受到最近研究發(fā)現(xiàn)的挑戰(zhàn),Siegel和Takaoka等近來(lái)對(duì)Fas和腫瘤壞死因子的研究顯示,IFN受體在配體結(jié)合之前便以二聚體形式等待IFN的到來(lái)(IBD)本病在世界各地因造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失,所以受到各國(guó)高度重視。 (3)IFN對(duì)免疫系統(tǒng)的作用,已知IFN幾乎影響免疫反應(yīng)的全過(guò)程,在IFN的大家庭里,IFNγ起主要的免疫調(diào)節(jié)作用,它是由一組特定的免疫細(xì)胞(T細(xì)胞和原生殺傷細(xì)胞)在免疫響應(yīng)和發(fā)炎刺激下產(chǎn)生并對(duì)免疫效應(yīng)細(xì)胞產(chǎn)生作用的細(xì)胞素,IFNα/β作對(duì)免疫的調(diào)節(jié)作用較嚴(yán)謹(jǐn),它們主要為細(xì)胞抗御病毒感染提供多條機(jī)制來(lái)加強(qiáng)免疫反應(yīng)。干擾素的其他生理作用(1)抑制細(xì)胞生長(zhǎng),IFN能抑制細(xì)胞生長(zhǎng),這種活性參與其對(duì)癌癥和感染的抑制作用,IFN對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞表現(xiàn)出的抗增生作用對(duì)不同的細(xì)胞系差異很大,目前還未能鑒定出由IFN誘導(dǎo)產(chǎn)生的,直接參與抗增殖活性的基因產(chǎn)物,但I(xiàn)FNa能針對(duì)細(xì)胞周期的控制體中的特異因子發(fā)生作用,包括cmyc,Prb,D3和cdc25A蛋白,來(lái)抑制細(xì)胞的增殖。 Mx蛋白可由IFN誘導(dǎo)產(chǎn)生,~,屬于GTPase大家系中的豐富性成員,Mx蛋白質(zhì)在病毒轉(zhuǎn)錄及其他途徑,干擾病毒的復(fù)制、抑制流感病毒和其他負(fù)鏈RNA病毒的生長(zhǎng),鼠源的核內(nèi)Mxl蛋白抑制流感病毒、Thogoto及Dhori病毒,人的細(xì)胞質(zhì)蛋白MxA抑制流感病毒,Thogoto,人副流感病毒等,但不抑制Dhori病毒。C端為催化活性結(jié)構(gòu)域,但這一活性在dsRNA結(jié)合前是封閉的,當(dāng)N端基點(diǎn)上結(jié)合dsRNA后,可能通過(guò)蛋白質(zhì)構(gòu)型的改變,使C端的酶活性表現(xiàn)出來(lái),活化的PKR能對(duì)蛋白質(zhì)合成的起始因子elF2的a亞基磷酸化,導(dǎo)致elF2GDP和循環(huán)因子elF2B形成無(wú)活性的復(fù)合體,使蛋白質(zhì)合成迅速停止。 IFN誘導(dǎo)的抗病毒機(jī)制主要有3條途徑,既PKR(依賴dsRNA的蛋白激酶途徑)、25A合成酶途徑和Mx蛋白質(zhì)途徑,這3條途徑的具體作用過(guò)程已經(jīng)
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