枯草芽孢桿菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究(參考版)
2025-06-23 06:16本頁面
【正文】 最后再一次感謝所有在畢業(yè)設(shè)計中曾經(jīng)幫助過我的良師益友和同學(xué)，以及在設(shè)計中被我引用或參考的論著的作者。授人以魚不如授人以漁，置身其間，耳濡目染，潛移默化，使我不僅接受了全新的思想觀念，樹立了宏偉的學(xué)術(shù)目標(biāo)，領(lǐng)會了基本的思考方式，從論文題目的選定到論文寫作的指導(dǎo),經(jīng)由您悉心的點撥,再經(jīng)思考后的領(lǐng)悟,常常讓我有“山重水復(fù)疑無路,柳暗花明又一村” 。我不是您最出色的學(xué)生，而您卻是我最尊敬的老師。四年的求學(xué)生涯在師長、親友的大力支持下，走得辛苦卻也收獲滿囊，在論文即將付梓之際，思緒萬千，心情久久不能平靜。對于以后的實驗可以繼續(xù)縮小這變化的跨度，來進一步研究枯草芽孢桿菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化。3 相對與普通培養(yǎng)基得到的活菌量 106CFU/ml，本實驗優(yōu)化得到的活菌量 107CFU/ml 還有有明顯的提高 10 倍，所以本文枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)條件的優(yōu)化對于工業(yè)化大規(guī)模的培養(yǎng)枯草芽孢桿菌還是能夠提供一些依據(jù)。培養(yǎng)的時間從圖 4 可以看出 18h 到20h 之間活菌數(shù)相對穩(wěn)定，如果需要得到是枯草芽孢桿菌的菌體或者產(chǎn)物時，需要控制發(fā)酵時間在 18h 到 20h 之間有利于菌體和產(chǎn)物的積累。在本次實驗過程中，有以下幾點心得體會1 本文在優(yōu)化培養(yǎng)條件時，得到接種量濃度為最主要的因素，相對而言時間為次要的因素。4 結(jié)論和討論 本文針對的是枯草芽孢桿菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究 ，在培養(yǎng)基 BPG 的基礎(chǔ)上優(yōu)化培養(yǎng)條件（PH，時間，溫度，接種量濃度）四個因素，再進行L9（3 4）正交試驗確定枯草芽孢桿菌的最佳培養(yǎng)條件。即在溫度為 35℃，接種量為 5%，PH為 培養(yǎng)時間為 20h。 表六 組合 活菌數(shù)（107CFU/ml） 直觀最優(yōu)組合 A1B2C2D2分析的最優(yōu)組合A2B2C2D3A1 A2 A3 平均值 從表六看出直觀的最優(yōu)組合 A1B2C2D2 與分析得到最優(yōu)組合 A2B2C2D3比較，在直觀的最優(yōu)組合 A1B2C2D2 下活菌數(shù)量為 107CFU/ml，但是分析得到最優(yōu)組合 A2B2C2D3 下得到的活菌數(shù)量為 107CFU/ml。所以為了確定最優(yōu)水平組合，分別按照這兩個水平組合的培養(yǎng)基配方，配制 BPG 液體培養(yǎng)基下培養(yǎng)，測定其 OD420 值，根據(jù)生長量，確定最優(yōu)水平。7H2O 、水 1000ml）以影響枯草芽孢桿菌的生長條件 PH、溫度、時間、接種量為四個影響因素，取各自的三個不同水平進行正交試驗，因素水平表見表 表 正交試驗設(shè)計直觀分析表因素序列號 A溫度BpHC接種量濃度D時間(h)活菌數(shù)（ 107CFU/ml）11（30℃）1（6） 1（3% ） 1(16) 2 1 2（7） 2（5% ） 2(18) 3 1 3（8） 3（7% ） 3(20) 4 2（35℃） 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3（40℃） 1 3 2 8 3 2 1 3 149 3 3 2 1 K1 K2 K3 R 最優(yōu)組合 A2B2C2D3由表數(shù)據(jù)可知，因素主次關(guān)系為 C(接種量濃度) B(PH) A(溫度) D （時間）。故時間的選擇為 18h 適宜。所以有圖 5 分析可知，起初隨著時間的推移，活菌數(shù)目會增加，當(dāng)時間為 18h 時，枯13草芽孢桿菌的數(shù)量達到最多；隨后繼續(xù)增加培養(yǎng)時間，反而枯草芽孢桿菌的數(shù)量呈現(xiàn)下降趨勢。實驗結(jié)果如表五及圖 5。 時間對枯草芽孢桿菌生長量的影響本實驗選取 14h、16h、18h、20h、22h 5 個時間為培養(yǎng)時時間的變化來研究時間對枯草芽孢桿菌的生長量的影響。所以從圖4 直觀分析可知：接種量從 1%到 5%之間增加接種量，活菌數(shù)隨著接種量的增加而增多，當(dāng)接種量 5%活菌數(shù)達到最多；大于 5%時隨著接種量的增加反而活12菌數(shù)減少，反到不利于培養(yǎng)枯草芽孢桿菌。實驗結(jié)果如表四及圖 4。11 接種量對枯草芽孢桿菌生長量的影響本實驗選取 1%、3% 、5% 、7% 、9% 5 個接種量為培養(yǎng)時接種量的變化來研究接種量對枯草芽孢桿菌的生長量的影響。由于不同微生物對 pH 條件的要求各不相同它們只能在一定的 pH范圍內(nèi)生長，對 pH 條件的不同要求在一定程度上反映出微生物對環(huán)境的適應(yīng)能力。10表三不同 pH 對枯草芽孢桿菌的 OD420 值影響 pH 值 OD420值 A1 A2 A3 平均值 圖 3PH 對枯草芽孢桿菌生長量的影響 從圖 3 顯示，當(dāng) PH 變化分別為 8 以及 9 時，得到的活菌數(shù)為：（10 7CFU/ml）分別為 、 以及 。培養(yǎng)基的接種量為 5%、初始溫度 35℃，培養(yǎng) 18 h，的其他因素的變量不變的條件下，測定 OD420 值，根據(jù)最大生長量，選出最適 PH。故此溫度的選擇為 35 ℃適宜。由于溫度對微生物生長的影響是影響在生物體內(nèi)所進行的許多生化反應(yīng)，達到影響微生物的生長。表二 不同溫度對枯草芽孢桿菌的 OD420 值影響 溫度 OD420值25℃ 30℃ 35℃ 40℃ 45℃A1 A2 A3 9平均值 圖 2 溫度對枯草芽孢桿菌生長量的影響 圖 2 顯示，當(dāng)溫度的變化分別為 25℃、30℃ 、35 ℃、40 ℃以及 45℃時，到的活菌數(shù)（10 7CFU/ml）分別為 、 、 以及 。培養(yǎng)基的接種量為 5%、初始 pH ，培養(yǎng)18 h，的其他因素的變量不變的條件下，測定 OD420 值，根據(jù)最大生長量，選出最適溫度。實驗結(jié)果如下。在 OD 值在小于 時 OD 值和活菌數(shù)呈現(xiàn)線性的關(guān)系。時間（h）0 3 6 9 12 15 18 21 24OD 活菌數(shù)(107CF
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