實(shí)驗(yàn)三枯草芽孢桿菌堿性磷酸酶(參考版)
2025-01-09 02:52本頁面
【正文】 —— 純酶液 （下周測(cè)酶活） 活化菌種 種子液 搖瓶發(fā)酵 5000rpm 15min 收集菌體（每組約 50mL發(fā)酵液） ? 測(cè)定酶活 （以對(duì)照組調(diào)零，測(cè) OD420nm） 試劑（ 以下試劑均需預(yù) 熱 ） 粗酶液組 純酶液組 測(cè)定組 1 對(duì)照組 1 測(cè)定組 2 對(duì)照組 2 酶液（ mL） 2%NaOH溶液（ mL） － － TrisHCl緩沖液 （ mL） 40mM NPP（ mL） 37度水浴 10min 2%NaOH溶液（ mL） － － ? 硫酸銨的飽和度表（室溫下） 飽和度 硫酸銨質(zhì)量（ g/L） 0~50％ 313 50~60％ 66 50~70％ 137 50~75％ 176 50~80％ 214 50~90％ 302 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ? 計(jì)算粗酶液和純酶液的活力 酶活力單位：一定的反應(yīng)條件，溶液在420nm處吸光值每變化 。 ? 分級(jí)鹽析 1. 50％飽和度除雜蛋白： 向其余粗酶液（約 7mL）中慢慢加入研細(xì)的硫酸銨粉末至
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