微生物工程實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(參考版)
2024-11-07 01:00本頁(yè)面
【正文】 工作分配：陳怡璋 菌株復(fù)活 菌株擴(kuò)大培養(yǎng) 郭智 趙詔v 宋培換 菌株發(fā)酵參數(shù)工藝優(yōu)化 陳文竹 纖維素酶活性鑒定 整理：陳文竹。酶活力計(jì)算：從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出葡萄糖umol數(shù)。每支樣品管中加1 mL酶溶液，置于50℃水浴鍋中預(yù)熱2 min，然后在3支試管中分別加人4 mL已預(yù)熱至50℃的底物溶液，準(zhǔn)確計(jì)時(shí)5 min取出，每管立即分別加入1 mL 2mol／L氫氧化溶液和2 mL DNS顯色液，搖勻后在對(duì)照管中再加入1 mL酶液。CMC酶活力的測(cè)定：(羧甲基纖維素鈉鹽(CMCNa)酶活性測(cè)定方法) 纖維素酶對(duì)CMC—Na有降解能力，生成葡萄糖等還原糖，再用DNS法顯色，用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液作標(biāo)準(zhǔn)液，22 PC分光光度計(jì)在520 nm處測(cè)其吸光度，以每分鐘生成相當(dāng)于1umol的葡萄糖為一個(gè)酶活性單位。 取適當(dāng)稀釋的酶液，分別以濾紙或1％的CMC溶液為底物，于50℃恒溫水解反應(yīng)1 h；然后加人顯色劑DNS，沸水浴中煮沸5 min；再加入蒸餾水，于530 nm測(cè)定吸光度OD值。 管號(hào)含糖量（ug）BG濃度%Glc標(biāo)準(zhǔn)液（ml）水（ml）3，5二硝基水楊酸試劑（ml）OD540nm1234567891011：DNS法FPA濾紙酶活力: DNS法即3，5一二硝基水楊酸比色法的英文簡(jiǎn)稱。然后在沸水浴中加熱5分鐘，然后立即用自來(lái)水冷卻，搖勻，于540nm測(cè)光密度，結(jié)果如下表所示：原理：
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