微陣列分析導(dǎo)論ppt課件(參考版)
2025-05-15 03:25本頁面
【正文】 。 CGH法是消減雜交策略各方法中唯一不能直接獲得基因片段的方法，其優(yōu)點是 CGH在一次實驗中即可對整個 基因組 進行檢測，節(jié)省了操作步驟，并能將檢測出的異常 DNA序列在染色體上定位，便于進一步篩選相關(guān)基因。 CGH比較基因組雜交技術(shù) ?是一種將消減雜交、熒光染色體原位雜交（fluorescence in situ hybridization FISH）相結(jié)合，用于檢測待測組織 DNA順序拷貝數(shù)目的變化（缺失、擴增、復(fù)制），并將這些異常在染色體上定位的方法。 ?主要 包括五個步驟 。 ?其發(fā)展歷史可追溯到 20世紀 50年代，期間包括發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶、重組 DNA技術(shù)和 PCR技術(shù)。該技術(shù)使用了微型化（微陣列芯片）來對基因和基因產(chǎn)物做定量的分析。用A藥物處理后，變化異常的基因回復(fù)到正常水平。這個基因可能與疾病的發(fā)生有關(guān)?；虮磉_的信號強度按照彩虹圖模式來顯示，高水平表達用紅色表示，低水平用黑色表示。這些信息包括基因表達譜、基因型、其他生物過程或途徑。若分析時沒有陰性對照做參考而對微陣列分析實驗下結(jié)論是一件很冒險的事。 ? 陰性對照 是指在微陣列上的點，不管實驗對象得到的是什么樣的結(jié)果，這些點都不能產(chǎn)生信號。陽性對照得到了強烈信號后，就能排除對實驗失敗的錯誤解釋，例如可排除問題出在雜交、清洗、掃描或數(shù)據(jù)分析的步驟上。 微陣列的類別 微陣列類別%%%%%組織寡聚核苷酸cDNA蛋白質(zhì)其他不同生物種類%%%%%%%%大腸桿菌大鼠酵母小鼠人線蟲果蠅擬南芥應(yīng)用%%%%%基因型其他基因表達蛋白組織國家1%1%70%8%7%4%3% 2% 2% 2%中國芬蘭美國日本英國德國加拿大法國澳大利亞瑞典實驗設(shè)計 每次微陣列分析實驗應(yīng)該包括 陽性對照、陰性對照和實驗對象 ?陽性對照 是指在微陣列上的點，不管實驗對象得到的是什么樣的結(jié)果，這些點都能產(chǎn)生可按識別的信號。 微陣列定義 特異性吸附 ? 微陣列上的每一個點能與標記好的探針混合物中的一種分子發(fā)生吸附，才能對此基因或基因產(chǎn)物進行精確的檢測 微陣列定義 ?探針混合物中一種標記好的探針分子能和 cDNA微陣列芯片上唯一的一個 cDNA靶標進行雜交，或者與寡聚核昔酸微陣列芯片上的一組相應(yīng)的寡聚核苷酸進行雜交。 ?非平面基片：尼龍膜、硝酸纖維素膜等。m 微陣列定義 平面基片 ?平面基片是像玻璃、塑料、硅
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