《微陣列分析導(dǎo)論》ppt課件(文件)
【正文】 術(shù) ?DNA雜交技術(shù) 核酸分子固相雜交方法 ?菌落原位雜交（ Colony in situ hybridization） ? Southern印跡雜交（ Southern blot） ? Northern印跡雜交（ Northern blot） ?斑點(diǎn)雜交（ Dot blot） ?組織原位雜交（ Tissue in situ hybridization） ?反向雜交，基因芯片的前身 探 針 ?探針標(biāo)記 – 放射性同位素標(biāo)記， 125I、 32P、 33P和 35S ?非放射性標(biāo)記 – 熒光法，化學(xué)發(fā)光法，電化學(xué)發(fā)光法，生物發(fā)光，顯色法 ?探針種類（ Probe type） – 基因組探針 – cDNA探針 – 寡聚核苷酸探針（ Oligo） 探針的來源 ? DNA探針根據(jù)其來源有 3種： ?一種來自基因組中有關(guān)的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe）； ?另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了 mRNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱為 cDNA 探針（ cDNA probe）。 吸附在玻璃基片上的靶標(biāo) DNA分子。一般以小于 1mm為界。m 微陣列定義 平面基片 ?平面基片是像玻璃、塑料、硅片一樣平行不能彎曲的基質(zhì)載體。 微陣列定義 特異性吸附 ? 微陣列上的每一個(gè)點(diǎn)能與標(biāo)記好的探針混合物中的一種分子發(fā)生吸附，才能對(duì)此基因或基因產(chǎn)物進(jìn)行精確的檢測(cè) 微陣列定義 ?探針混合物中一種標(biāo)記好的探針分子能和 cDNA微陣列芯片上唯一的一個(gè) cDNA靶標(biāo)進(jìn)行雜交，或者與寡聚核昔酸微陣列芯片上的一組相應(yīng)的寡聚核苷酸進(jìn)行雜交。陽性對(duì)照得到了強(qiáng)烈信號(hào)后，就能排除對(duì)實(shí)驗(yàn)失敗的錯(cuò)誤解釋，例如可排除問題出在雜交、清洗、掃描或數(shù)據(jù)分析的步驟上。若分析時(shí)沒有陰性對(duì)照做參考而對(duì)微陣列分析實(shí)驗(yàn)下結(jié)論是一件很冒險(xiǎn)的事?；虮磉_(dá)的信號(hào)強(qiáng)度按照彩虹圖模式來顯示，高水平表達(dá)用紅色表示，低水平用黑色表示。用A藥物處理后，變化異常的基因回復(fù)到正常水平。 ?其發(fā)展歷史可追溯到 20世紀(jì) 50年代，期間包括發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶、重組 DNA技術(shù)和 PCR技術(shù)。 CGH比較基因組雜交技術(shù) ?是一種將消減雜交、熒光染色體原位雜交（fluorescence in situ hybridization FISH）相結(jié)合，用于檢測(cè)待測(cè)組織 DNA順序拷貝數(shù)目的變化（缺失、擴(kuò)增、復(fù)制），并將這些異常在染色體上定位的方法。 。 CGH法是消減雜交策略各方法中唯一不能直接獲得基因片段的方法，其優(yōu)點(diǎn)是 CGH在一
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