氨基酸和多肽ppt課件(參考版)
2025-05-10 13:31本頁面
【正文】 肽的理化性質(zhì) 肽的等電點：肽所帶凈電荷為“零”時，溶液的 pH值 例：已知末端 αCOOH的 ，末端 αNH3+ 的 ， εNH+3的 , 計算 AlaAlaLysAla的等電點。 N端 NH+3的 pK略小于氨基酸中的 pK值，pK2↓。 由于肽中 N端自由氨基和 C端自由羧基之間的距離比氨基酸中的大，因此它們之間的靜電引力較弱。 多肽鏈 ? 肽鏈中的氨基酸不是原來完整的分子，多肽鏈中的氨基酸單位稱為氨基酸殘基 肽鍵 鏈狀結構 肽鍵具有部分雙鍵性質(zhì)，和相鄰的兩個?碳原子位于一個平面，不能自由旋轉，以穩(wěn)定的反式構型存在 ? 組成肽鍵的 4個原子和 2個相鄰的 C?原子形成肽平面 ? CN具有部分雙鍵的性質(zhì) (40%) C?N鍵長 , C?N 鍵長 CN鍵長 , ? 肽平面可以處于順式構型或反式構型，其中反式構型比順式構型穩(wěn)定，兩者能量相差 8 kJmol1, XPro的肽鍵可以是反式，也可以是順式構 肽平面 當兩個氨基酸通過肽鍵相互連接形成二肽，在一端仍然有游離的氨基和另一端有游離的羧基，每一端連接更多的氨基酸。 外觀： 顆粒狀 陽離子交換樹脂：活性基團是酸性的 ， 如磺酸基 SO3H （強酸型），羧基 COOH（弱酸型） 陰離子交換樹脂：活性基團是堿性的 ， 如季胺基 N+(CH3)3OH 采用改變 pH值或者增加鹽濃度的方式進行洗脫各種氨基酸 高效液相層析 (high performance liguid chromatography, HPLC) HPLC的特點 : （ 2）反相層析 (reverse phase chromatography) （ 1）離子交換層析 （ 3）凝膠過濾 理論塔板高，分辨率好，可使氨基酸分析的靈敏度達到 1012mol水平 用強酸性陽離子交換樹脂分離下列每對氨基酸，當用 ，下述每對氨基酸中先從柱上洗脫下來的是那種氨基酸？ （ 1）天冬氨酸和賴氨酸，（ 2）精氨酸和甲硫氨酸， （ 3）谷氨酸和纈氨酸， （ 4）甘氨酸和亮氨酸， 習 題 1. Asp凈電荷為負， Lys靜電荷為正， Lys與樹脂磺酸基相反離子吸附作用大，故 Asp ? Lys 2. Arg凈電荷為正， Met靜電荷接近零，故 Met ? Arg 3. Glu凈電荷為負， Val凈電荷接近零，故 Glu ?Val 4. Gly和 Leu凈電荷都接近零，但 Leu的非極性側鏈與樹脂骨架之間的非極性相互作用大，故 Gly ? Leu 答 案 氨基酸的制備 制備氨基酸有 4種途徑： 從蛋白質(zhì)水解液中分離提取 應用發(fā)酵法生產(chǎn) 應用酶的催化反應生成氨基酸 有機合成法 適宜于中 小規(guī)模的生產(chǎn) 可大規(guī)模 生產(chǎn) 氨基酸的制備和應用狀況 蛋白質(zhì)的水解 ? 酸水解 6M HCl 或 4M H2SO4, 105~110?C回流 20h左右可完全水解，其優(yōu)點是 不引起消旋化，得到 L氨基酸 。 這種分離主要與各種離子 所帶電荷 有關，在電荷相同時，與極性、 非極性 有關。+ H X（ R’＝烴基） ① 與 4一二硝基氟苯的反應 FO 2 NN O 2242， 4一二硝基氟苯 H 2 NHC C O O HR+FO 2 NN O 2在 弱 堿 中DNFB HNHC C O O HR+ FO 2 NN O 2DNP氨基酸（黃色） 該反應首先被英國的 Sanger用來鑒定多肽 、蛋白質(zhì)的 N末端氨基酸 ② 與苯異硫氰酸酯的反應 N C S 該反應首先被 Edman用于鑒定多肽 、 蛋白質(zhì)的 N末端氨基酸，是多肽和蛋白質(zhì)末端分析的重要方法 ?氨基參與的反應 (4) 與甲醛反應 甲醛滴定法：不僅用于測定氨基酸含量，也常用來測定蛋白質(zhì)水解程度 ?羧基參與的反應 (1) 成 鹽和成酯作用 H 2 N C C O O HRH+ N a O H+ C 2 H 5 O H干 燥H2N C C O O N a + H2 ORHH 2 N C C O O C2 H 5 + H 2 ORHH C l 以某合格牛奶蛋白質(zhì)含量為 %計算，含氮量略為 %；以某合格奶粉蛋白質(zhì)含量為 18%計算，含氮量略為 %——而三聚氰胺含氮量為 %，是牛奶的 151倍，是奶粉的 23倍！ ?氨基參與的反應 (3) ?；磻? 酰氯： 芐氧酰氯（ CbzCl） : 對甲苯磺酰氯 (TosCl) : 叔丁氧酰氯 (BocCl): C H 2 O COC lS C lOOH 3CO C C lOCC H 3H 3 CC H 3酸酐： 鄰苯二甲酸酐： COCOO 在多肽和蛋白質(zhì)人工合成中用作氨基的保護反應 +C H 2 O COC l H 2 N C HC O O N aR在 弱 堿 中（ 后 酸 化 ）CbzCl C H 2 O CON C HC O O HRH+ N a+ + C lCbz氨基酸 氨基酸與 芐氧甲酰氯 (Cbz)的反應 氨基酸與 5一二甲氨基萘 1磺酰氯（ dansyl chloride,DNS）的反應 H2NHC C O O HRNH3C C H3S OOC l+NH3C C H3S OOH NHC C O O HR+ H C lD N S C lD N S 氨 基 酸用途： 用于多肽鏈 N端氨基酸的標記和微量氨基酸的定量測定 ?氨基參與的反應 (3) 烴基化反應 R C H C O O HN H 2+ R 39。每 100g牛奶中添加 ，就能提高%蛋白質(zhì)。 草菅人命
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