農(nóng)產(chǎn)品分析ppt課件(參考版)
2025-05-09 07:24本頁面
【正文】 ? VB2： 激發(fā)波長 440nm，發(fā)射波長為 565nm,狹縫為，靈敏度 3,其他同 VB1。吸取 150g/L氫氧化鈉溶液 97mL加入 10g/L鐵氰化鉀 3mL混合而成。 ? VB1： 流動(dòng)相 A，以磷酸鹽緩沖液 80份（ 磷酸緩沖液， pH＝ ）和乙腈 20份相混而成； ? VB2： 流動(dòng)相 B，以磷酸鹽緩沖液 82份和乙腈 18份混合而成。 ? （ 3）樣品處理是能否獲得滿意結(jié)果的關(guān)鍵。用異丁醇萃取的維生素 B1也是如此。 ? 注釋 ? （ 1）維生素 B2測定用消化后的濾液直接進(jìn)樣，處理后的標(biāo)準(zhǔn)和樣品都有雜質(zhì)峰，但能分離維生素 B2，不影響測定。L1維生素 Bl和維生素 B2混合工作液 0、 、 、 、 、于 50ml棕色容量瓶中，再加入與樣品等量的 ，以下操作同樣品處理，得到維生素 B2標(biāo)準(zhǔn)系列水溶液和維生素 B1標(biāo)準(zhǔn)系列異丁醇溶液。 ? (2)標(biāo)準(zhǔn)溶液制備。 ? 取上述濾液 5ml于 60ml分液漏斗中，沿分液漏斗壁加堿性鐵氰化鉀溶液 3ml (邊搖邊加 )，繼續(xù)振搖 10s，立即加入異丁醇 8ml，并猛烈振搖 45s．靜置分層后棄去水層。樣液經(jīng)每分鐘 3000轉(zhuǎn)速度離心過濾，取約 10ml，濾液備用。 ? 稱取試樣 (維生素 B1和 B2含量不低于 ) 于 50ml棕色容量瓶中，加入 mol 操作步驟 ? (1)樣品處理。 ? 此溶液在 堿性鐵氰化鉀 溶液中 氧化 后用 異丁醇提取 所得 即 維生素 B1測定樣液。高效液相色譜法測定維生素具有簡便、快速，可同時(shí)進(jìn)行多種水溶性維生素測定等優(yōu)點(diǎn)，是近年發(fā)展較快的測定方法。 ? 測定維生素 B2的方法有光黃素?zé)晒夥?、核黃素?zé)晒夥?、高效液相色譜法。 （二） VB2（核黃素）的性質(zhì) ? 維生素 B2在中性水里溶解極少，呈黃綠色的熒光，在強(qiáng)酸性和強(qiáng)堿性溶液中則充分溶解。 ? 世界各國都用熒光法測定。 ? VB1存在于糙米、酵母、谷類、肝、肉類、豆類及其它動(dòng)植物組織中，動(dòng)物組織不如植物含量豐富。 ? (9)加 9:1硫酸溶液時(shí)，為防止溶液中的糖炭化而變黑色，需 邊滴加邊搖 試管。 最后溶液中硫脲的濃度要一致 ，否則影響測定結(jié)果。 ? (6)溶液中其他的酮和酮衍生物和 2， 4二硝基苯肼也形成脎，故 須作空白試驗(yàn) （指沒有 Vc參與下形成脎的量）。 1mol/LHCl,100g于750ml，煮沸 12h，沸水洗滌至無 Fe2+，烘干 。 ? (4)活性炭對(duì)抗壞血酸的氧化作用，是基于其表面吸附的氧進(jìn)行界面反應(yīng)，加入量過低，氧化不充分，測定結(jié)果偏低，加入量過高，對(duì)抗壞血酸有吸附作用，使結(jié)果也偏低。 ? （ 2）硫脲可防止 Vc被氧化，且可幫助脎的形成，最終溶液中硫脲的濃度應(yīng)一致，否則影響色度。 操作步驟 ? 稱樣 → 加等量 2%草酸 → 于高速搗碎機(jī)搗碎 → 取勻漿 20g→用 1%草酸定容 100ml→ 過濾 → 取濾液 10ml→ 加 1%草酸10ml→ 加少量活性炭 → 搖 1分鐘 → 靜置過濾 → 各取濾液 2ml于樣品管和樣品空白管 → 各管 加入 1滴硫脲溶液 → 于樣品管中 加入 2,4二硝基苯肼 → 分別于兩個(gè)管加蓋 → 于37℃ 保溫箱 3小時(shí) → 取出后樣品管放入冰水中 → 樣品空白管取出后冷至室溫 → 在樣品空白管加入 2,4二硝基苯肼 → → 樣品管和空白管都于 冰浴中 → 滴加 9︰ 1H2SO4 2ml于各管中 → 邊滴邊搖 → 防止溫度升高炭化后呈黑色 → 冰浴中取出 → 室溫下 放置 30分鐘后 ，在 540nm測 消光值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的含量。二酮古樂糖酸與 2， 4二硝基苯肼耦聯(lián)生成紅色的脎。 ? (14)在處理各種樣品時(shí)，如遇有泡沫產(chǎn)生，可加入數(shù)滴 辛醇 消除。 ? (13)滴定時(shí)，可同時(shí)吸二個(gè)樣品。 ? (12)維生素 C的含量隨樣品個(gè)體或部位的不同差別很大，因此測定維生素 C時(shí)取樣的代表性尤為重要。 ? (10) 標(biāo)定靛酚滴定液時(shí)與滴定樣品液時(shí)，滴定終點(diǎn)的掌握應(yīng)嚴(yán)格一致，否則將引起誤差。 ? (8) 樣品切碎、縮分及稱量等過程會(huì)使樣品切口接觸空氣而促進(jìn)維生素 C氧化，應(yīng)盡量動(dòng)作迅速 , 維生素 C提取液對(duì)光敏感，操作室內(nèi)應(yīng)設(shè)置窗簾，以防加速維生素 C氧化。但其還原染料的速度較慢，故 滴定終點(diǎn)以淺紅色在 15s不褪色為準(zhǔn) 。 ? 保存在 棕色瓶和冰箱 中。 ? (5)2， 6二氯靛酚固體試劑有時(shí)含有分解產(chǎn)物，染料溶液長久貯存時(shí)也會(huì)生成分解主物，從而使滴定終點(diǎn)不敏銳， 因此應(yīng)在使用前檢查 。 ? (4)KIO3與還原 Vc的主要反應(yīng)如下： ? 從上述反應(yīng)式可知 1mol(1/6 KIO3)與 1mol (1/2C6H8O6)完全反應(yīng)，故 1/2 C6H8O6的摩爾質(zhì)量為 88g ? (3) 樣品采取后，應(yīng)浸泡在已知量的 2％草酸溶液中，以防止抗壞血酸氧化損失。碘酸液以貯備液保存（較高濃度， ）。 根據(jù) Vc在酸性溶液中相對(duì)較穩(wěn)定這一特性，歷來采用的提取劑都是各種各樣的酸性溶液 ,現(xiàn)在一般采用的主要是 2%偏磷酸 、 2%草酸溶液 ，其次是 8%醋酸 、 10%三氯乙酸 及 偏磷酸 醋酸混合液 。草酸廉價(jià)易得 ,有與磷酸相近的穩(wěn)定性。 ? 注釋 （ 1） 偏磷酸是 Vc的最佳穩(wěn)定劑 ，且具有沉淀蛋白質(zhì)的作用 。 ? 根據(jù)這個(gè)特性．用堿性藍(lán)色染料的標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定植物樣品酸性浸出液中 Vc到剛變 淺紅色 為終點(diǎn)，由染料的用量即可計(jì)算 Vc的含量。 ? 方法原理 抗壞血酸 (Vc)結(jié)構(gòu)中有 烯二醇 結(jié)構(gòu)存在，因此具有 還原性 ，能將 藍(lán)色染料 2， 6二氯靛酚還原為無色的化合物 ， Vc則被氧化為脫氫 Vc，反應(yīng)式如下： ? 2， 6二氯靛酚具有 酸堿指示 及 氧化還原 指示的兩種特性。進(jìn)一步水解則生成 2,3一二酮古樂糖酸，失去生理作用。 ? 碘滴定法不適于花青素含量高的果蔬樣品 Vc測定。 ? 鉬藍(lán)比色法則不然 ,該法不易受樣品提取液顏色的影響。 ? 2， 4二硝基苯肼比色法和熒光法測得的是抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量，操作麻煩，耗時(shí)較長。 ? ，該法簡便，也較靈敏，但特異性差，樣品中的其它還原性物質(zhì) (如 Fe2+、 Sn2+、 Cu2+等 )會(huì)干擾測定，使測定值偏高。 ? Vc測定主要有： 測定還原型 Vc和氧化型 Vc的總含量（ 如熒光法， 2,4－二硝基苯肼法 、高效液相色譜法等 ) 還原型 Vc測定法 (2,6－二氯靛酚滴定法 ，電位滴定法，碘滴定法， 鉬藍(lán)比色法，碘酸鉀萃取分光光度法等 )兩類 , 其中 ,有些方法既可測定 Vc全量 ,也可測定還原型Vc,如酶法。 ?
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