雙向電泳原理與流程(參考版)
2025-05-03 22:46本頁面
【正文】 IgG removal kit Ettan IPGphor? Immobiline? DryStrip Ettan? DALT twelve Ettan DALTsix DALT gel ImageMaster? DeCyder? 2D 蛋白標記 樣品制備 分離 染色 圖譜分析 挖點 酶解 點靶 體液 植物 微生物 組織 細胞 Ettan Spot Picker Ettan Digester Ettan Spotter Ettan Spot Handling Workstation Deep Purple? Total Protein Stain PlusOne? Silver Staining Kit, protein CyDye? DIGE Fluors 65 / GE Title or job number / 5/24/2022 Thank you! Any Questions…. 。 ? 全面支持 DIGE技術(shù)，源自 DeCyder 2D軟件。 數(shù)據(jù)庫，進行網(wǎng)上檢索。 ? 可直接鏈接到 ExPASy174。根據(jù)點的相關(guān)因素、形狀、位置、周圍情況， 膠間匹配效率高。界面窗口可隨意設(shè)計，界面極其友好。 ? 高效能參數(shù)自動找點，全自動蛋白定量計算方法，不受背景影響。 ?掃描平臺大， A3掃描面積 ， 一次可掃描 2塊 24cm凝膠。 C)和程序化電源 (10000V) ?可同時進行 12根膠條的等電聚焦 ?聚焦效果以“ Vh”數(shù)控制，可提高重復(fù)性 40 / GE Title or job number / 5/24/2022 IPG 膠條的平衡 ——兩步平衡 ? SDS 電泳前 , 平衡母液 : 2% SDS, 50mM TrisHCl pH , 6M urea, 30% glycerol + 蛋白與 SDS結(jié)合 甘油和尿素降低電內(nèi)滲作用 ? 第一步 DTT平衡 ： (1 x 15min) 1% DTT ? 第二步 碘乙酰胺平衡 ：去除多余的 DTT ， 防止拖尾 (1 x 15min) % iodoacetamide 41 / GE Title or job number / 5/24/2022 第二向垂直電泳系統(tǒng) 瓊脂糖覆蓋密封 放置 IPG strip 低熔點瓊脂糖 42 / GE Title or job number / 5/24/2022 Push the IPG Strip Down onto the Gel Surface 43 / GE Title or job number / 5/24/2022 Seal the Cassette and Fix the IPG Strip with Agarose 44 / GE Title or job number / 5/24/2022 Inserting the Cassette 45 / GE Title or job number / 5/24/2022 SDSPAGE 參數(shù) 46 / GE Title or job number / 5/24/2022 SE600ruby 47 / GE Title or job number / 5/24/2022 Ettan DALTsix 48 / GE Title or job number / 5/24/2022 Ettan DALTtwelve system 49 / GE Title or job number / 5/24/2022 第二向系統(tǒng) strip gel number running length (cm) size (cm) of gels time (hr) Ettan Dalt12 18, 24 25 x 20 12 Ettan Dalt6 18, 24 25 x 20 6 SE 600 2 x 7, 13 14 x 16 (24) 4 4 MiniVE 7 8 x 7, 8 x10 2 Multiphor II 7, 11 24 x 11* 1 18 24 x 18 1 PhastSystem (4)** 4 x 4 2 * 2 or 3 strips sidebyside ** cut or homemade strip 50 / GE Title or job number / 5/24/2022 2D/MS 經(jīng)典工作流程 差異分析 圖像獲取 圖譜分析 蛋白標記 圖譜分析 挖點 酶解 點靶 蛋白鑒定 體液 植物 微生物 組織 細胞 分離 細胞裂解 勻漿 預(yù)分級 除雜質(zhì) 濃縮 定量 樣品制備 雙向電泳 第一向 第二向 銀染 考染 熒光 染色 51 / GE Title or job number / 5/24/2022 Protein Detection Methods Se nsitiv ity li m it Quantitation Li v in g c e ll s Li nea r D y nam ic Ra nge Co o ma ssi e Blu e stai n in g 1 0 0 ng +++ no 3 Ne g a tive stai n in g 1 5 ng + no 3 Si lve r stai n in g 2 0 0 pg + no 7 Flu o re sce n t stai n in g 4 0 0 pg ++++ no 104 Flu o re sce n t la b e ll i
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