lcms質(zhì)譜ppt課件(參考版)
2025-05-01 22:27本頁面
【正文】 Seminar 討論題目 ? LCMS聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展 ? LCMS聯(lián)用技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用研究 進(jìn)展 ? 毛細(xì)管電泳 質(zhì)譜 聯(lián)用技術(shù)的研究進(jìn)展 ? 液相色譜 —核磁共振檢測聯(lián)用系統(tǒng) (LC—NMR) ? 液相色譜 —傅里葉變換紅外檢測器聯(lián)用系統(tǒng)(LC—FTIR) ? 。為此目的，應(yīng)選用帶 EI離子化的技術(shù)，例如粒子束接口。 ? 如果欲達(dá)到最高的靈敏度，則 APCI（加熱霧化器）常常是最好的選擇（可能只在極少的情況下它可被電噴霧趕上或者超越）。關(guān)于 LCMS接口的應(yīng)用，不能給出一個(gè)通用的建議。 ? 與熱噴霧接口相比， APCI也相當(dāng)耐用且操作簡便 ，因?yàn)樗商幚砹髁窟_(dá) 2mL/min的水溶液流出物。據(jù)說這些系統(tǒng)可使用 非揮發(fā)性緩沖劑 ，因?yàn)椴粠щ姾傻模ǚ牵]發(fā)性材料可被逆流的干噪氣帶走。借助附加的輔助氣流氣溶膠被帶過加熱管，然后進(jìn)入 API源，在那里被電暈放電引發(fā)，發(fā)生 APCI過程。 ? 然而， APCI并未能獲得 3?4個(gè)數(shù)量級靈敏度的增加，這是由于在較高壓力下，離子通過質(zhì)譜分析器的 傳送效率明顯降低 。 ? 與中壓 CI相比， APCI過程中一個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)是 可獲得理論上的靈敏度 。 ? 負(fù)離子則通過質(zhì)子抽出、陰離子附著或電子捕獲反應(yīng)生成。 能夠處理具有高含水量的流動(dòng)相 ， 并且可用梯度洗脫系統(tǒng)進(jìn)行工作 。 ? 最初 ， 流速只能擴(kuò)展到約 50 ?L/min。 因此有可能用簡單的、可傳送離子達(dá) 2022質(zhì)荷比的四極質(zhì)譜儀，以測量分子質(zhì)量達(dá) 100000u以上的蛋白質(zhì)。 簡單的解釋為： 氣溶膠被充電到一定程度后，微滴實(shí)際上可被庫侖排斥力炸碎成更小的微滴，此小微滴最后蒸發(fā)而產(chǎn)生高度帶電荷的分子。 ? 借助于氣簾的膨脹，離子被帶過一個(gè)毛細(xì)管進(jìn)入第一級抽氣泵的真空中，再進(jìn)一步通過各級抽氣泵和透鏡系統(tǒng)，最后進(jìn)入質(zhì)量分析器。 ? 受電場驅(qū)動(dòng)，微滴通過氮?dú)飧稍霘夂煛? a. Electrospray Interface 電噴霧接口 ? High electric potential applied to eluent from transfer capillary – Atmospheric pressure – Droplet formation – Ionization in the solution phase ? Orthogonal sampling of ions – Reduces contamination of the sampling orifice – ZSpray devices Electrospray Interface ? Higher flows now possible –Pneumatic + thermal nebulizers ? Applicable to volatile and nonvolatile analytes – Need to be ionizable ? Can create multiplycharged ions ? Allows for analysis of large molecules Electrospray LC/MS System From: McMaster and McMaster Electrospray Interface Electrospray Needle Design 電噴霧針構(gòu)造 Example of an electrospray needle design (coaxial flow) The nebulizer gas disrupts the liquid surface so that small droplets are formed and then dispersed by the gas Theory of API Electrospray API電噴霧理論 Agilent 1100 LC/MSD Electrospray Courtesy of Agilent Technologies Electrospray Interface ? Best vaporization with higher % anic and lower flow rates ? Cluster ion formation possible – Solvent clusters – Analyte/salt clusters ? Salts and sample impurities can affect the response – TFA causes signal suppression – TFA anion masks the analyte ion 電噴霧接口（ ESI） ? 可在相當(dāng)?shù)偷牧髁肯鹿ぷ鳎涞湫土髁繛?1 ? 10 ?L/min 電噴霧接口通過使用強(qiáng)電場去溶劑和使待測物離子化，常?？僧a(chǎn)生大分子的多電荷離子 ? 離子化過程：包括將液流霧化成高度帶電微滴的氣溶膠以及在此帶電微滴去溶后待測分子的離子化 ? 來自色譜柱的樣品經(jīng)分流后引入 常壓 去溶劑室，或經(jīng)過一注入器件（不銹鋼皮下注射針頭）直接引入常壓去溶劑室。 在所有常壓離子化（ API）技術(shù)中，離子化均發(fā)生在常壓區(qū) 常壓離子化（ API）技術(shù) ? 這是為 LC和 MS聯(lián)用而發(fā)展起來的最初技術(shù)之一，但在常壓離子化（ API）技術(shù)發(fā)展成很可能是最通用的一組接口和樣品引入技術(shù)之前，它整整花了 20多年的時(shí)間。 ? 然而，似乎較新的 常壓離子化法 正在逐漸取代TSP，這是因?yàn)榍罢咻^耐用且往往具有較高的靈敏度。 Thermospray Ionization 熱噴霧電離 ? Positive Ion Mode ? M + SH+ ? MH+ + S PA(M) PA(S) ? M + SH+ ? MHS+ PA(M) ? PA(S) ? Negative Ion Mode ? M + [SH]? ? [MH]? + S gpa(M) gpa(S) ? M + A? ? MA? polar molecules gpa = gas phase acidity Typical Proton Affinities 質(zhì)子親和力 From: Niessen 熱噴霧接口（ TSP） ? 再過去幾年里， TSP接口已獲得了極大的成功。 Thermospray Modes of Operation 熱噴霧運(yùn)行模式 ? SolventMediated CI – Typical mobile phase: MeOH or MeCN
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