【正文】 經(jīng)10余h后即可對噬菌斑計數(shù)、思考題一、請設計一實驗來決定在一種特定的細菌中發(fā)生的遺傳轉(zhuǎn)移過程是轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導還是接合？說明每一種的預期結(jié)果246設想有下列條件和材料可以利用：⑴合適的突變株和選擇培養(yǎng)基；⑵DNas（一種降解裸露DNA分子的酶）；⑶2種濾板：一種能夠持留細菌和細菌病毒，但不能持留游離的DNA分子；另一種濾板只能持留細菌；⑷一種可以插入濾板使其分隔成2個空間的玻璃容器思考題二、根據(jù)突變的光復活修復作用、原理，你認為在進行紫外線誘變處理時，應注意什么？為了使被誘變的細胞能均勻地受到紫外線照射，你講如何做？ 。先用底層…在培養(yǎng)皿上澆一層平板，凝固后，把預先融化冰冷卻到45176。噬菌斑：在涂布有敏感宿主細胞的固體培養(yǎng)基表面，若接種上相應噬菌體的稀釋液，其中每一噬菌體粒子由于先侵染和裂解一個細胞，然后以此為中心，再反復侵染和裂解周圍大量的細胞，就在菌苔上形成一個具有一定形狀、大小、邊緣和透明度的噬菌斑，可用于純種分離和計數(shù)。一個循環(huán)后，新合成的DNA又可作為下一個循環(huán)的模板進行復制，重復下三個動作，DNA片段呈指數(shù)增長。3自然轉(zhuǎn)化必要條件（229）：受體細胞處于感受態(tài)、外源DNA人工轉(zhuǎn)化手段（231）：CaCl2 、電穿孔法轉(zhuǎn)導模型（228）3感受態(tài)細胞（283）理化方法誘導細胞，使其處于最適攝取和容納外來DNA的生理狀態(tài)。3局限性轉(zhuǎn)導與普遍性轉(zhuǎn)導的主要區(qū)別（229）①被轉(zhuǎn)導的基因共價地與噬菌體DNA連接，與噬菌體DNA一起進行復制、包裝以及被導入受體細胞中。利用書傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株的回復突變性能來進行實驗，它在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能（或極少）生長，如果回復突變率因某種化學誘變劑的作用而增加，則這種化學藥物具有致癌性。所以很容易分離的到。這類突變類型常用所抗藥物的前三個小寫斜體英文字母加上“r”表示，如strr和strs分別表示對鏈霉素的抗性和敏感性。形影的表型則用HisC和LacZ表示。（215）2營養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學研究中重要的選擇標記和育種的重要手段，在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長，是一種負選擇標記營養(yǎng)缺陷型實驗步驟（219）①將待分離突變株的原始菌株以合適的稀釋度涂布到野生型菌株和突變株均能生長的主平板上，經(jīng)培養(yǎng)后形成單菌落② 經(jīng)過一消毒的“印章”講平板的菌落分別原位轉(zhuǎn)移到與院平板相同營養(yǎng)成分的平板a以及不含缺陷型所需要的營養(yǎng)因子的平板b③ 經(jīng)培養(yǎng)后對照觀察兩平板上形成的菌落，如果在a上生長在b上不長，則為所需分離的突變型④在a上挑取b上不長的相應位置的單菌落，并進一步在完全培養(yǎng)基上劃線分離純化。許多R質(zhì)粒能使宿主細胞對許多金屬離子呈現(xiàn)抗性（砷、銀、鈷、汞等）代謝質(zhì)粒（Metabolic plasmid）（213）代謝質(zhì)粒上攜帶能降解某些基質(zhì)的酶的基因，含有這類質(zhì)粒的細菌（假單胞菌）能將復雜的有機化合物（尤其是有毒化合物）降解成能被其作為碳源和能源利用的簡單形式，也成為降解質(zhì)粒。F質(zhì)粒在大腸桿菌的接合作用中起作用，當Hfr菌株上的F因子通過重組回復成自主狀態(tài)時有時可將其相鄰的染色體基因一起切割下來，成為攜帶某一染色體基因的F因子。檢測方法：超離心或瓊脂糖凝膠電泳。如同對細菌計數(shù)一樣，形成的噬菌斑也可用于對噬菌體的數(shù)目進行估算。1曲的構(gòu)成與功能？（P171，周德慶）固體基質(zhì)：提供營養(yǎng)源、有利疏松通氣、賦予曲的外形菌體（菌絲、孢子或細胞）：可用作種子代謝產(chǎn)物：外酶類：可用作粗酶制劑 其他：如檸檬酸、赤霉素和抗生素等次級代謝（129）是指微生物在一定生長時期，以次級代謝產(chǎn)物為前體，合成一些的與微生物生命活動無明確功能的物質(zhì)過程的產(chǎn)物初級代謝（129）微生物從外界吸收各種營養(yǎng)物質(zhì)，通過分解代謝和合成代謝，生成維持生命活動的物質(zhì)和能量的過程初級代謝與次級代謝的關(guān)系（129）初級代謝的關(guān)鍵性中間產(chǎn)物往往是次級代謝的前體；次級代謝一般在菌體對數(shù)生長后期或穩(wěn)定期間進行，但會受到條件的影響；某些催化次級代謝的酶的專一性不高；次級代謝產(chǎn)物的合成，因菌株的不同而異，但與分類地位無關(guān)；質(zhì)粒與次級代謝的關(guān)系密切，控制著多種抗生素的合成2研究病毒學的意義 病毒學的研究極大地豐富了微生物學乃至現(xiàn)代生物學的理論與技術(shù)，同時，病毒學的研究有效地控制和消滅人及有益生物的病毒危害，利用病毒對有害生物，特別是害蟲進行生物防治，保人類健康和人類經(jīng)濟活動及人類賴以生存的環(huán)境，發(fā)展以基因工程為中心的生物高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)2病毒的特點（163） 病毒，無細胞結(jié)構(gòu)，由DNA或RNA和蛋白質(zhì)外殼、莢膜組成，無限增值，無生命跡象，建構(gòu)簡單。缺點是無法濾除液體中的病毒和噬菌體。④大規(guī)模發(fā)酵中，可采用連續(xù)加壓蒸汽滅菌法。②含鈣、鐵離子的培養(yǎng)基應與磷酸鹽成分分別滅菌，就不易形成磷酸鹽的沉淀。微生物生長的測定方法（152）：1計數(shù)法： 直接計數(shù)（不能區(qū)分死的和活的、不適合運動型）：平板計數(shù) 間接計數(shù)：測OD（光密度）2 重量法3 生理指標法：包括呼吸強度、耗氧量、酶活性、生物熱1在微生物學的培養(yǎng)、發(fā)酵等方面的研究過程中，你能想到哪些方面可以用到膜過濾技術(shù)？ 牛奶脫脂、果汁濃縮、黃酒純化、白酒陳化、啤酒除菌、味精提純 、蔗糠脫色、氨基酸濃縮、醬油除菌，醫(yī)療針劑水、輸液水、洗瓶水、外科手術(shù)洗潔水的制備?？勾x物（見14）抗生素。⑶穩(wěn)定期 特點：；；；；；。 ；。一條典型的生長曲線至少可以分為 遲緩期：原因：調(diào)整代謝 特點：分裂遲緩、代謝活躍對數(shù)期：原因：以最大的速率生長和分裂 特點：數(shù)量速增穩(wěn)定期：原因：條件限制 特點：代謝大量積累，生長速率為零衰亡期：原因：代謝活性降低，衰老細胞自溶 特點：死亡細菌速增Ps: ３、工業(yè)中常用的霉菌（1）工業(yè)上常用的放線菌 鏈霉菌屬 Streptomyces 生產(chǎn)抗生素、維生素、酶及酶抑制劑 諾卡氏菌屬 Nocardia:生產(chǎn)抗生素，石油脫蠟、烴類發(fā)酵， 處理含氰廢水 小單孢菌屬 Micromonospora :慶大霉素 孢囊鏈霉菌屬 Streptosporanium :多霉素（2） 發(fā)酵工業(yè)常見常用的霉菌 根霉屬 Rhizopus 毛霉屬 Mucor 黑曲霉 Aspergillus niger 米曲霉 Asp. oryzae 產(chǎn)黃青霉 Penicillium chysogenum 紅曲霉屬 Monascus 木霉屬 Trichoderma（3）工業(yè)上常見常用的酵母 Saccharomyces cerevisiae 釀酒酵母 Hansenula anomala 異常漢遜氏酵母 Candida tropicalis 熱帶假絲酵母Candida utilis 產(chǎn)朊假絲酵母 Candida lipolytica 解脂假絲酵母Geotrichum candidum 白地霉 Pachysolen tannophilus 管囊酵母 Pichia stlpitis 樹干畢赤酵母 Candida shechatae