hplc和ce衍生試劑ppt課件(參考版)
2025-01-17 03:42本頁(yè)面
【正文】 3 s injection。M 檢測(cè)限 : nM 圖 14是固定 FITCBSA和 BSA抗體的濃度，加入不同量的 BSA的示意圖。 analyate concentrations: 1 ?M。 50 mbar, 10 s. Reprinted from ref.[ 107]. NNC H 3 OC H 3 OC H 3OC O C l3， 4二氫 6， 7二甲氧基 —4甲基 3喹惡啉 2羰酰氯（ DMMQCCl） NC H 3 OC O C lS O 2 C H 36甲氧基 2甲基磺酰 喹啉 4羰酰氯 （ MSQCCl） C H 2 OC H 2 C O C lC H 2 C O C lOC H 2活性鹵類 ? 可與一、二級(jí)胺反應(yīng) NNORXNNORX? NBDCl作為熒光生成試劑用于衍生脂肪胺及氨基酸在弱堿性溶液中進(jìn)行 ? NBDCl是一個(gè)選擇性相當(dāng)好的衍生試劑，雖然它也與醇（ OH）、硫酚（ SH）和苯胺反應(yīng) 衍生物的熒光強(qiáng)度比脂肪胺低很多 ? 衍生物顯示出激發(fā)波長(zhǎng)最大在 480nm，適合 Ar離子激發(fā)波長(zhǎng) ? NBDF與氨基乙酸的反應(yīng)速度比 NBDCl快 500倍在 、 60oC及避光 5min內(nèi)就與氨基酸完成反應(yīng) . 手性柱上氨基酸對(duì)映體的分離 . ? NBDCl與二級(jí)氨基酸反應(yīng)的活性更好 . NBD胺結(jié)合物在水中的熒光量子產(chǎn)率很低 ， 小于 ；而在甲醇溶液中大大增加 . ? DBDF在 50oC， 反應(yīng) 2h， DBDF與氨基化合物同樣生成衍生物 ， 用于反相色譜分離氨基酸和脂肪胺類 ， 激發(fā)波長(zhǎng) 466469nm， 檢測(cè)發(fā)射波長(zhǎng) 594600nm， 檢出限亞 pmol級(jí) ? ABDF的胺衍生物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)紫移 ， 分別為 450nm和 590nm；熒光強(qiáng)度低 . ? 2， 4二硝基氟苯是在紫外光區(qū)有吸收峰的含活性鹵原子的 HPLC分離氨基酸的柱前衍生試劑 ,400nm ? 在溫和條件（ pH89，室溫）與一、二級(jí)氨基酸均能反應(yīng)，衍生物穩(wěn)定 ? 紫外檢測(cè)，靈敏度較低，多應(yīng)用于測(cè)定蛋白質(zhì)的 N末端氨基酸殘基 N羥基琥珀酰亞胺活性酯類 ? 氨基甲酸酯類（ AQC）和羧酸酯（ SIIA） NOONOO2RNH2H O++COONC H 2H OCONC H 2 NHROHCOONC H2NOOH OSIIA+ +NN H COO NOO2H OCO2NN H CONN H22RNHNOOH ONOOH O+NH RAQCNOOC O O HO OOC H 2COO+(C H ) 25 2 NC NOC H 2 C H 3NOONOO 熒光素 O乙酸酯（ FLOAcSE ) 9氰基 N， N， N， 三乙基 N（ 5琥珀酰亞胺氧羰基戊基）焦寧氯化物（ Pyronin SE）近紅外的活性酯熒光衍生試劑， λem=695nm，衍生氨基酸， CE分離，激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)限達(dá)[ 琥珀酰亞胺 4， 4二氟 5， 7二甲基 4硼 3a， 4a二氮 sindacene3丙酸酯（ BODIPYC3SE） NOON NBF FC H 3C H 3C H 2O C C H 2ONOON H COO琥珀酰亞胺 9芴甲氧基甲酸酯（ FMOCSE） NOONC H 2 C O ONOON OOC H2COOC H 2 CONOOFig. 13. Electropherograms obtained for separation
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