微生物的遺傳變異和育種(1)(參考版)
2025-01-17 00:13本頁(yè)面
【正文】 逐個(gè)撿出法： CM和 MM平板上對(duì)應(yīng)點(diǎn)種。 菌絲過(guò)濾法：適用于絲狀生長(zhǎng)的真菌和放線菌 。 ③原養(yǎng)型（ prototroph） 營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株，其營(yíng)養(yǎng)要求上與野生型相同，均為 [A+B+]。 ②營(yíng)養(yǎng)缺陷型（ auxotroph） 野生型菌株經(jīng)誘變處理后，喪失了代謝途徑中某種酶的合成能力，只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)，此類突變菌株，稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。 ⑵與營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的三類遺傳型個(gè)體 ①野生型（ wild type） 從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生營(yíng)養(yǎng)缺陷突變之前的原始菌。 ②完全培養(yǎng)基：（ CM， plete medium） 可滿足一切營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株?duì)I養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基，可用 [+]表示。初篩以量為主（選留較多有生產(chǎn)潛力的菌株），復(fù)篩以質(zhì)為主（對(duì)少量潛力大的菌株代謝產(chǎn)物量作精確測(cè)定）。復(fù)合處理有幾類：一類是兩種或多種誘變劑的先后使用；第二類是同一種誘變劑的重復(fù)使用；第三類是兩種或多種誘變劑的同時(shí)使用。例如 ，采用殺菌率為 70～ 75%的相對(duì)劑量。 ⑶處理單孢子（或單細(xì)胞）懸液 ： ①處理均勻； ②避免長(zhǎng)出不純的菌落 ③表型延遲現(xiàn)象：表型的改變落后于遺傳型改變的現(xiàn)象。其基本原理是：鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸缺陷型（ his） 菌株在基本培養(yǎng)基 []的平板上不能生長(zhǎng)，如發(fā)生回復(fù)突變則能生長(zhǎng)。因此，凡對(duì)微生物有效的誘變劑，對(duì)高等生物同樣有效，反之亦然。物理誘變劑如紫外線、 X射線、 γ射線和快中子等；化學(xué)誘變劑種類極多，主要有烷化劑、堿基類似物和吖啶類化合物。與誘變育種、雜交育種和基因 工程技術(shù)相比，定向培育法帶有“守株待兔” （二）誘變育種 誘變育種 ：是指利用物理或化學(xué)誘變誘變劑處理均勻分散的微生物細(xì)胞群，促進(jìn)其突變率顯著提高，然后采用簡(jiǎn)便、快速、和高效的篩選方法，從中挑選出少數(shù)符合育種目的的突變株，以供生產(chǎn)或科研之用。 定向培育優(yōu)良品種 ：定向培育是指用某一特定因素長(zhǎng)期處理某微生物的群體，同時(shí)不斷的對(duì)它們進(jìn)行移種傳代，以達(dá)到積累并選擇相應(yīng)的自發(fā)突變株的目的。富于實(shí)際經(jīng)驗(yàn)和善于細(xì)致觀察的人們就可及時(shí)抓住這類良機(jī)來(lái)選育優(yōu)良的生產(chǎn)菌株。 對(duì)照： 8 106個(gè) /ml 紫外線 100個(gè) /ml 試驗(yàn)： 8 106個(gè) /ml 360～ 490nm可見(jiàn)光 30分鐘 2 106個(gè) /ml ⑵ 暗修復(fù) （ dark repair）， 又稱切除修復(fù)（ excision repair）：這種修復(fù)與光無(wú)關(guān)，必須有四種酶的參與：ａ．核酸內(nèi)切酶 ｂ．核酸外切酶 ｃ． DNA聚合酶 ｄ．連接酶。 修復(fù)機(jī)制： ⑴光復(fù)活作用 （ photoreactivation）： 經(jīng)紫外線照射過(guò)的微生物立即暴露于可見(jiàn)光下時(shí)， 可明顯降低其死亡率的現(xiàn)象。 （六）紫外線 DNA的損傷及其修復(fù) 損傷機(jī)制： 主要作用是使同鏈 DNA的相鄰嘧啶間形成共價(jià)結(jié)合的嘧啶二聚體。 ２、自發(fā)突變的機(jī)制 （ 1）自發(fā)突變：沒(méi)有人工參與下的生物體自然發(fā)生的突變。 （ 3）染色體畸變（ chromosomal aberration） 某些理化因子，如 X射線等的輻射及烷化劑、亞硝酸等，除了能引起點(diǎn)突變外，還會(huì)引起 DNA的 大損傷 (macrolesion)——染色體畸變，它既包括染色體結(jié)構(gòu)上的缺失 (deletion)、 重復(fù)(dup lication)、 插入 (insertion)、 易位 (translocation)和倒位(inversion)， 也包括染色體數(shù) 目的變化。點(diǎn)突變 移碼突變誘變劑有： 吖啶類染料（吖啶橙吖啶黃、原黃素等）和一系列 ICR類的化合物。間接引起置換的誘變劑：此類誘變劑均為堿基類似物，如： 5BU， 2AP、 5AU等。 ②置換的機(jī)制 ：直接引起置換的誘變劑：可直接與核酸反應(yīng)，不論在機(jī)體內(nèi)還是在離體條件下均有作用。由于其中有自發(fā)突變、誘發(fā)突變、誘變劑與選擇條件等多種因素錯(cuò)綜在一起，所以難以探究問(wèn)題的實(shí)質(zhì)。 （四） 基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明 一種觀點(diǎn)認(rèn)為，突變是通 過(guò)適應(yīng)而產(chǎn)生的，各種抗性就是由其環(huán)境所含的抵抗因子誘發(fā)出來(lái)的，即突變的原因和突變的 性狀間是相對(duì)應(yīng)的，并認(rèn)為這就是“定向變異”，也有人稱它為“馴化”或“馴養(yǎng)”。 誘變性 ：通過(guò)誘變劑的作用，可以提高自發(fā)突變的幾率 10~105倍； 穩(wěn)定性 ：突變性狀是穩(wěn)定的、可遺傳的； 可逆性 ：由原始的野生型基因變異為突變型基因的過(guò)程稱為正向突變 (forw ard mutation)， 相反的過(guò)程則稱為回復(fù)突變或回變(back mutation或 reverse mutation)。 某一基因的突變 ， 即不提高也不降低其他任何基因的突變率 。例如，突變率為 1 108，就意味著 108個(gè)細(xì)胞群體分
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