工業(yè)生產(chǎn)常用的微生物工業(yè)生產(chǎn)常用的微生物從(參考版)
2025-01-16 22:28本頁面
【正文】 三、 DNA重組技術(shù) (分子生物學(xué) ) ? 目標(biāo) DNA片段的獲得 ? 與載體 DNA分子的連接 ? 重組 DNA分子引入宿主細(xì)胞 ? 重組體的選擇與鑒定 ? 外源基因的表達(dá) 。 3. 原生質(zhì)體的融合與再生：兩原生質(zhì)體在促融因子的存在下，發(fā)生融合，重建細(xì)胞壁，形成新的細(xì)胞。 1. 標(biāo)記菌株的篩選：對(duì)兩親株要進(jìn)行標(biāo)記，以提高篩選率。 一、常規(guī)的雜交育種 :不須用脫壁酶處理，就能使細(xì)胞結(jié)合而發(fā)生遺傳物質(zhì)重新組合。 通過高通量篩選方法，可以發(fā)現(xiàn)效果好、臨床應(yīng)用價(jià)值高的創(chuàng)新藥物，治療疑難病癥。包括各種正常細(xì)胞和病理細(xì)胞。 ? 理性化篩選 ? 高通量 篩選（ high throughput screening):將許多模型固定在各自不同的載體上，用機(jī)器人加樣，培養(yǎng)后用計(jì)算機(jī)記錄結(jié)果，并進(jìn)行分析，使篩選從繁重的勞動(dòng)中解脫出來，實(shí)現(xiàn)大規(guī)模篩選。 抗反饋突變株（抗結(jié)構(gòu)類似物）的篩選 ： 結(jié)構(gòu)類似物具有和 代謝產(chǎn)物 相似的反饋調(diào)節(jié)作用，但又不同于代謝物，不具有正常的生理功能，對(duì)細(xì)胞代謝又阻礙作用。 。 誘 變 劑 的 選 擇 菌懸液的制備 單細(xì)胞懸浮液： 106個(gè) /mL 孢子懸浮液： 108個(gè) /mL 誘變：預(yù)實(shí)驗(yàn)確定適宜的誘變條件 篩選：選擇合適的篩選方法 ? 隨機(jī)篩選方法： 菌種經(jīng)誘變處理后 ,進(jìn)行平板分離 ,隨機(jī)挑選單菌落 ,從中篩選高產(chǎn)菌株。 誘變育種一般采用物理、化學(xué)誘變劑使微生物DNA的堿基 排列發(fā)生變化，以使排列錯(cuò)誤的 DNA模板形成異常的遺轉(zhuǎn)信息，造成某些蛋白結(jié)構(gòu)變異，而使細(xì)胞功能發(fā)生改變。 育種就是要改善菌種的特性，使之能提高產(chǎn)量、改進(jìn)質(zhì)量、降低成本、改進(jìn)工藝、方便管理及綜合利用等。 短期可采用斜面保藏 。 細(xì)菌和放線菌 ：一般細(xì)菌以采用冷凍干燥保藏法為佳 。也可采用石蠟油封保藏法。不同的菌種有不同的保存方法，以便長(zhǎng)期保藏。 保藏時(shí)首先選擇 優(yōu)良純菌種 ，最好是它們的休眠體如孢子（ spore）、芽孢 (gemma)等；其次是要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)有利于休眠的環(huán)境條件，如低溫、干燥、缺氧和缺乏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等，使菌體的代謝活動(dòng)處于最低狀態(tài)，延長(zhǎng)其保存期。 三、菌種保藏（ strain preservation） 基本原理 ：根據(jù)菌種的生理、生化特點(diǎn)，人為地創(chuàng)造條件，使菌種的代謝活動(dòng)處于休眠狀態(tài)。 同時(shí)通過實(shí)驗(yàn)選擇一種有利于高產(chǎn)菌株而不利于低產(chǎn)菌株的培養(yǎng)條件。 如果遇到某些菌株即使進(jìn)行單細(xì)胞分離，仍不能達(dá)到復(fù)壯的效果，則可改變培養(yǎng)條件，達(dá)到復(fù)壯的目的。 如果菌種已經(jīng)發(fā)生退化，產(chǎn)量下降，則要進(jìn) 行分離復(fù)壯。 2 防止菌種衰退的措施 菌種的分離 : 因?yàn)樵诰N發(fā)生衰退的同時(shí)，并不是所有的菌體都衰退，其中未衰退的菌體往往是經(jīng)過環(huán)境條件考驗(yàn)的，具有更強(qiáng)的生產(chǎn)能力。 連續(xù)傳代是菌種退化的直接原因，這是由于菌種經(jīng)常處于旺盛的生長(zhǎng)狀態(tài)。 第二節(jié) 菌種的衰退、復(fù)壯與保藏 一、微生物菌種衰退的原因 1. 原因 一 是菌種保藏不妥 。 (4) 菌種純 ， 不易變異和退化 ， 不產(chǎn)生任何有害的生物活性物質(zhì)和毒素 ， 保證安全生產(chǎn) 。 (2) 易于控制培養(yǎng)條件 ， 酶活性高；發(fā)酵周期較短 。 藻 類 工 廠 二 、 微生物工業(yè)對(duì)菌種的要求 目前 ， 隨著微生物工業(yè)原料的轉(zhuǎn)換和新產(chǎn)品的不斷出現(xiàn) ，勢(shì)必要求開拓更多新品種 。此項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用，還可減輕因工業(yè)生產(chǎn)而大量排放 CO２ 造成的溫室效應(yīng)。此外，還可通過藻類將 CO２ 轉(zhuǎn)變?yōu)槭停囵B(yǎng)單胞藻或其他藻類而獲得的石油，可占細(xì)胞干重得 5%50%,合成的油與重油相同，加工后可轉(zhuǎn)變汽油、煤油、和其他產(chǎn)品。
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