第四章微生物的生長繁殖及其控制(參考版)
2024-10-21 11:50本頁面
【正文】 培養(yǎng)基中加入氧化還原指示劑刃天青可對(duì)氧化還原電位進(jìn)行間接測定 氧化還原電位與氧分壓和 pH有關(guān) ,也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響 根據(jù)培養(yǎng)基的應(yīng)用目的選擇原料及其來源 該培養(yǎng)基的應(yīng)用目的，即： 是培養(yǎng)菌體還是積累代謝產(chǎn)物？ 是實(shí)驗(yàn)室種子培養(yǎng)還是大規(guī)模發(fā)酵？ 代謝產(chǎn)物是初級(jí)代謝產(chǎn)物還是次級(jí)代謝產(chǎn)物？ ☆ 用于 培養(yǎng)菌體種子 的培養(yǎng)基營養(yǎng)應(yīng)豐富，氮源含量宜高（碳氮比低）； ☆用于大量生產(chǎn) 代謝產(chǎn)物 的培養(yǎng)基其氮源一般應(yīng)比種子培養(yǎng)基稍低，（但若發(fā)酵產(chǎn)物是含氮化合物時(shí)，有時(shí)還應(yīng)提高培養(yǎng)基的氮源含量）；若代謝產(chǎn)物是 次級(jí)代謝產(chǎn)物 時(shí)要考慮是否加入特殊元素或特定的代謝產(chǎn)物； ☆當(dāng)所設(shè)計(jì)的是 大規(guī)模發(fā)酵 用的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)重視培養(yǎng)基中各成份的來源和價(jià)格，應(yīng)選擇來源廣泛、價(jià)格低廉 的原料，提倡以粗代精，以廢代好。 對(duì)微生物影響最大的是：分子氧和分子氫的濃度 培養(yǎng)基中常用的還原劑：巰基乙酸 、 抗壞血酸 、 硫化氫 、半胱氨酸 、 谷胱甘肽 、 二硫蘇糖醇等 。 微生物不同，其生長的最適 αw 不同。 純水 αw 為 ,溶液中溶質(zhì)越多 , αw 越小。能在高鹽環(huán)境（ ~）生長的微生物常被稱為 嗜鹽微生物（ Halophiles） 。 外源調(diào)節(jié)：按實(shí)際需要不斷向發(fā)酵液流加酸或堿液 ☆ 磷酸緩沖液： pH值從 ~ K2HPO4+HCl KH2PO4+KCl KH2PO4+KOH K2HPO4+H2O ☆ 加入 CaCO3： CO32 – HCO3 – H2CO3 CO2+H2O +H+ –H– +H+ –H– ☆ 培養(yǎng)基中所含氨基酸、肽、蛋白質(zhì)等物質(zhì)也可起到緩沖作用。 ● 碳氮比（ C/N）直接影響微生物生長與繁殖及代謝物的形成與積累，故常作為考察培養(yǎng)基組成時(shí)的一個(gè)重要指標(biāo)； ● 速效性氮（或碳）源與遲效性氮（或碳）源的比例 ● 各種金屬離子間的比例 碳源中的碳原子的 mol數(shù) 氮源中所含的氮原子的 mol數(shù) C/N比值 = 例：谷氨酸生產(chǎn)中 C/N ＝ 4/1時(shí) ， 菌體大量繁殖 ， 谷氨酸積累少； C/N＝ 3/1 時(shí) ， 菌體生長受抑制 ， 而谷氨酸大量增加 。 按微生物的主要 類群 來說 ， 它們所需要的培養(yǎng)基成分也不同： 細(xì)菌： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 LB (LuriaBertani) 放線菌： 高氏一號(hào)培養(yǎng)基 真菌： 查氏合成培養(yǎng)基 PDA (PotatoDextroseAgar) 酵母菌； 麥芽汁 當(dāng)對(duì)試驗(yàn)菌營養(yǎng)需求特點(diǎn)不清楚的時(shí)候，可以采用‘ 生長譜 ’法進(jìn)行測定。如 自養(yǎng)型 微生物的培養(yǎng)基完全可以（或應(yīng)該）由簡單的無機(jī)物質(zhì)組成。 用途： 促使微生物生長；積累代謝產(chǎn)物；分離微生物菌種；鑒定微生物種類；微生物細(xì)胞計(jì)數(shù)；菌種保藏；制備微生物制品 培養(yǎng)基幾乎是一切對(duì)微生物進(jìn)行研究和利用工作的基礎(chǔ) 任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長所需要六大營養(yǎng)要素： 碳源、氮源、無機(jī)鹽、能源、生長因子、水 任何培養(yǎng)基一旦配成，必須立即進(jìn)行滅菌處理； ◆ 常規(guī)高壓蒸汽滅菌： ,℃15 30分鐘； ,℃15 30分鐘某些成分進(jìn)行分別滅菌； ◆ 過濾除菌； 即根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。 特點(diǎn)： 任何培養(yǎng)基都應(yīng)具備微生物所需要的五大營養(yǎng)要素，且應(yīng)
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