【正文】 。 目錄 依賴于脫腺苷酸化的 mRNA降解 目錄 （二）無義介導的 mRNA降解是重要的真核細胞 mRNA質量監(jiān)控機制 真 核 細 胞 mRNA 的 異 常 剪 接 可 能 會 產(chǎn) 生 無義（ nonsense） 的終止密碼子 ， 由此產(chǎn)生的 mRNA降解稱為無義介導的 mRNA降解 （ nonsensemediated mRNA decay, NMD） ， 是廣泛存在的 mRNA質量監(jiān)控的重要機制 。 當細胞以 mRNA為模板進行蛋白質合成時 ， 翻譯起始因子 eIF4E、 eIF4G和 3? poly(A)結合的 PABP等相互作用而形成封閉的環(huán)狀結構 ， 防止來自脫腺苷酸化酶 （ deadenylase） 和脫帽酶 （ decapping enzyme）的攻擊 ， 以保證 mRNA的穩(wěn)定 。 ? 但細胞內少部分正常 mRNA也可經(jīng)由無義介導的途徑降解 。 這類內含子的剪接與前面介紹的前體 mRNA內含子剪接相同 ， 但是沒有剪接體參與 目錄 I和 II型內含子的剪切 目錄 五、 RNA在細胞內的降解有多種途徑 ? 正常轉錄物和異常轉錄物的降解途徑有一定差異 。 這種轉酯反應與前述的mRNA內含子剪接的轉酯反應類似 ， 不過參與反應的不是分支點 A的 2?OH， 切除的內含子是線狀 ， 而不是 “ 套索 ” 狀。 I型內含子以游離的鳥嘌呤核苷或鳥嘌呤核苷酸作為輔因子完成剪接 。 這種由RNA分子催化自身內含子剪接的反應稱為 自剪接 （ selfsplicing） 。 ? RNA編輯作用說明 ， 基因的編碼序列經(jīng)過轉錄后加工 ， 是可有多用途分化的 ， 因此也稱為 分化加工 (differential RNA processing)。 目錄 6. 前體 mRNA分子可發(fā)生可變剪接 許多前體 mRNA分子經(jīng)過加工只產(chǎn)生一種成熟的 mRNA， 翻譯成相應的一種多肽；有些則可剪切或 （ 和 ） 剪接加工成結構有所不同的 mRNA，這一現(xiàn)象稱為 可變剪接 （ alternative splicing） ，又稱 選擇性剪接 。 ?剪切 指的是剪去某些內含子后 ， 在上游的外顯子 3?端直接進行多聚腺苷酸化 ， 不進行相鄰外顯子之間的連接反應 。 ? 剪接后 ， GU或 AG不一定被剪除 。 1. 內含子在剪接接口處剪除 ? 大多數(shù)內含子都以 GU為 5?端的起始 ， 而其末端則為 AGOH3?。 目錄 雞卵清蛋白成熟 mRNA與 DNA雜交電鏡圖 DNA mRNA 雞卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修飾 hnRNA剪接 成熟的 mRNA 雞卵清蛋白基因及其轉錄、轉錄后修飾 目錄 1. 內含子形成套索 RNA被剪除 ? 剪接首先涉及套索 RNA（ lariat RNA） 的形成 ， 即內含子區(qū)段彎曲 ， 使相鄰的兩個外顯子互相靠近而利于剪接 。 斷裂基因 (splite gene) C A B D 編碼區(qū) A、 B、 C、 D 非編碼區(qū) 目錄 外顯子 (exon)和內含子 (intron) ? 外顯子： 在斷裂基因及其初級轉錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達為成熟 RNA的核酸序列。 核酸序列分析證明 ， mRNA來自 hnRNA， 而 hnRNA和 DNA模板鏈可以完全配對 去除初級轉錄物上的內含子，把外顯子連接為成熟RNA的過程稱為 mRNA剪接（ mRNA splicing） 。 ?前體 mRNA分子的斷裂和加多聚腺苷酸尾是多步驟過程 。 ?poly A的有無與長短 ， 是維持 mRNA作為翻譯模板的活性 ， 以及增加 mRNA本身穩(wěn)定性的因素 。 目錄 ? 帽結構 目錄 ? 帽結構的生成過程 目錄 目錄 ? 帽結構的意義： ?可以使 mRNA免遭核酸酶的攻擊； ?也能與帽結合蛋白質復合體 (capbinding plex of protein)結合 ， 并參與 mRNA和核糖體的結合 ， 啟動蛋白質的生物合成 。 目錄 （一）前體 mRNA在 5?末端加入“帽”結構 ?大多數(shù)真核 mRNA的 5?末端有 7甲基鳥嘌呤的帽結構 。 ?加工主要在細胞核中進行 。 3? mRNA 轉錄終止 —— 和轉錄后修飾密切相關。 目錄 核酸酶 RNApol AATAAA GTGTGTG 轉錄終止的修飾點 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA 已發(fā)現(xiàn) ， 在讀碼框架的下游 ， 常有一組共同序列 AATAAA，再下游還有相當多的 GT序列 。 ?真核生物 mRNA有聚腺苷酸 (poly A)尾巴結構 ，是轉錄后才加進去的 。 ?轉錄延長過程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象 。 目錄 三 、真核生物轉錄延長過程中沒有轉錄與翻譯同步的現(xiàn)象 ?真核生物轉錄延長過程與原核生物大致相似 ，但因有核膜相隔 ， 沒有轉錄與翻譯同步的現(xiàn)象 。 ?拼板理論 (piecing theory) ： 少數(shù)幾個反式作用因子 （ 主要是可誘導因子和上游因子 ） 之間互相作用 ， 再與基本轉錄因子 、 RNA聚合酶搭配而有針對性地結合 、 轉錄相應的基因 。 目錄 ? 除了基本轉錄因子外 ， 真核基因的轉錄起始還有其他轉錄因子的參與 ， 如與啟動子上游元件如 GC盒 、CAAT盒等順式作用元件結合的 上游因子 （ upstream factor） ， 與遠隔調控序列如增強子等結合的反式作用因子 ， 以及在某些特殊生理或病理情況下被誘導產(chǎn)生的 可誘導因子 （ inducible factor） 的參與 。 ? 當合成一段含有 60～ 70個核苷酸的 RNA時， TFIIE和TFIIH釋放， RNA pol II進入轉錄延長期。 ? CTD磷酸化能使開放復合體的構象發(fā)生改變，啟動轉錄。 目錄 目錄 ? TFIIH具有解旋酶（ helicase）活性，能使轉錄起點附近的 DNA雙螺旋解開，使閉合轉錄復合體成為開放轉錄復合體，啟動轉錄。 相對應于 RNA pol I、 RNA pol II、RNA pol III， 這