【正文】 鐘英長等在 1990 年和 1993 年獲得了棉籽餅的微生物脫毒方法的專利，他利用自然界中耐 受 棉酚的曲霉菌種發(fā)酵棉。朱德偉等通過從醋酸棉酚 YPG 培養(yǎng)基中進行反復篩選，利 用復合發(fā)酵的方法，得到一株高效降解棉酚的菌株（熱帶假絲酵母 JD9），利用單因素 試驗方法研究其脫毒的工藝，并確定熱帶假絲酵母 JD9 及卡式酵母 JD13 的接種量，試 驗結果發(fā)現(xiàn)，卡式酵母 JD13 的接種量為 %，熱帶假絲酵母 JD9 的接種量為 %， 發(fā)酵時間為 48 h，料水比為 1:，發(fā)酵溫度為 30℃，此時，棉酚的脫毒率可達%[37] 。 聶蓬勃等使用經(jīng)過篩選的脫毒菌株 B2 對進行棉粕的發(fā)酵，試驗結果表明，菌株 B2 對棉 粕脫毒的最優(yōu)發(fā)酵條件如下 :接種量是 2%，發(fā)酵時間是 48 h，料水比為 1:1，溫度是 28℃， 自然 pH 值，這樣游離棉酚可達到最大降解率為 %[35] 。所以利用微生物發(fā)酵棉粕，不僅可以降解其中的有害物質(zhì)游 離棉 酚（ free gossypol ， FG），而且可以提高飼料的蛋白質(zhì)含量及營養(yǎng)價值。近年來選育菌種一般使 用以上研究，成為今后的菌種的開發(fā)和利用的寶貴資源。李小平等利用 UV 對保加利亞乳桿菌進行誘變處理，以其獲得高產(chǎn)乳酸的菌株， 結果表明，當紫外線的照射距離為 cm，照射時間為 60 s ，出發(fā)菌稀釋到 10 6 時，發(fā) 酵 36 h 后，得到的突變菌株的產(chǎn)酸量為 g/L，此時可獲得最大產(chǎn)酸量，培養(yǎng) 12 h時， 產(chǎn)酸量較出發(fā)菌株增加了 %[33]。而化學 4 高產(chǎn)乳酸菌種的選育及其發(fā)酵棉粕營養(yǎng)特性的研究 誘變主要是指通過化學方法改變微生物的某一性狀的方法，主要是通過與其 DNA 起作 用，主要有堿基類似物、烷基化、移碼突變劑等。 自然選擇的方法是指不經(jīng)過人工處理，從分離培養(yǎng)基上選取生長特性較好的單個菌 落，進行復壯培養(yǎng)等。 4 微生物育種方法及微生物發(fā)酵棉粕的研究進展 微生物育種方法的研究進展 在微生物的發(fā)酵過程中，為了得到某一目的代謝產(chǎn)物，改善菌種的某一特性，提高 其產(chǎn)量，獲得新菌種或新的代謝產(chǎn)物等，人們有目的的去改變菌種某一些特性，解決實 際生產(chǎn)需要。 Son 等通過在石斑魚飼料中添加植物乳桿菌，經(jīng)過 4 周的飼喂，結果表明，能夠顯著提高 石斑魚飼料利用率和增重速度 [30] 。朱學芝等研究發(fā)現(xiàn)乳酸 菌的代謝產(chǎn)物能協(xié)助蝦消化一些不易消化代謝的營養(yǎng)物質(zhì)，從而促進蝦對營養(yǎng)物質(zhì)的吸 收，提高飼料的轉化率 [28]。侯新強等研究發(fā)現(xiàn)，在青貯飼料中添加乳酸菌，可以顯著提高牛羊的體重，奶 產(chǎn)量可以提高到 %，也可以降低瘤胃的 pH 值，粗飼料等可以得到更好的消化吸收 [27]。通過給新生犢牛口服假長形雙歧桿菌，研究結果表明其增重提高了 %，飼料轉 化率 提高了 %[25] 。 在反芻動物生產(chǎn)中的應用 在幼齡反芻動物的飼養(yǎng)過程中使用乳酸菌制劑，有助于幼齡反芻動物瘤胃的發(fā)育， 提高日增重，調(diào)節(jié)瘤胃的 pH，有助于反芻動物的腸道微生物的菌群平衡等有力作用 [23]。索成等通過在斷奶仔豬的飼糧中添加抗生素（乙酰 甲喹）和植物乳桿菌，結果表明當在基礎日糧中加入 1 109 cfu/mL 植物乳桿菌 ZJ316 時， 仔豬的日增重較對照組提高了 %（ P），飼料轉化率較對照組提高了 % （ P），料肉比減少了 %（ P ），且死亡率和仔豬腹瀉率均有所下降，肉 的品質(zhì)也有所提高[21]。劉乃芝等通過在肉雞的日糧中添加不同水平的植物乳桿 菌，檢測不同日齡血清中總蛋白含量、 IgG 含量及 NDV 抗體效價，發(fā)現(xiàn)添加不同水平的 3 高產(chǎn)乳酸菌種的選育及其發(fā)酵棉粕營養(yǎng)特性的研究 植物乳桿菌均有助于提高肉雞的免疫水平，且添加量在 ～ 時效果 最好 [20]。研究表明在日糧中添加 %乳酸菌劑組的平均日增重顯著高于 對照組 (P)，試驗組飼料消耗量比對照組分別低 %和 %,所以 ，乳酸菌制劑 可以降低料肉比 [17]。因此，乳酸菌可以抑制病原性細菌的增殖，增加 機體的抵抗力。寧喜斌研究發(fā)現(xiàn)各種乳酸桿菌素和雙歧菌素 ，對葡萄球菌、梭狀芽孢桿菌、沙 門氏菌和志賀氏菌有拮抗作用 [16]。乳酸菌產(chǎn)生的細菌素種類較多，每一種乳酸菌都可 以產(chǎn)生一種或多種乳酸菌素。所以，乳酸菌能提高畜禽的免疫力。 Strompfova 等給仔 豬日糧中添加屎腸球菌后研究表明，屎腸球菌可以顯著提高血清總蛋白、鈣、血紅蛋白、 紅細胞濃度及顆粒細胞吞噬指數(shù) (P)，提高了動物機體的免疫能力 [14]。杭柏林等研究表明，在基礎日糧中添加植物乳桿菌和糞鏈球菌均能促進 AA 肉雞胸腺、脾臟和法氏囊的發(fā)育，增強白細胞的吞噬功能，增加胸腺和脾臟中的 T 細 胞數(shù)以及提高機體產(chǎn)生 ND 疫苗 HI 抗體的水平 [12]。 此外，乳酸菌還能刺激腹膜巨噬細胞、促進細胞分裂、產(chǎn)生干擾素、產(chǎn)生抗體及促進細 胞免疫等作用，從而能夠增強機體的非特異性和特異性免疫反應，提高動物機體的抗病 能力。在飼料消化代謝中，可以降解一些抗營養(yǎng)因子，提高飼料的適口性， 增加家畜的采食量，提高了飼料的利用率和消化率。如：產(chǎn)生有機酸的酶系、 分解亞硝胺的酶系、分解脂肪的酶系、合成多醣的酶系、合成各種維生素的酶系等 [10] 。 促進動物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收 研究發(fā)現(xiàn)乳酸菌能分解飼料中的蛋白質(zhì)、糖類、脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)，能顯著提高食物 消化率和生物效價，促進消化吸收 [9]。研究表明，來源于宿主本身的菌種制劑比外源菌種制 劑對機體健康更有益 [8]。馬治宇研究發(fā)現(xiàn)優(yōu)勢菌群通常是維持動物腸道內(nèi)微生 物生態(tài)平衡的核心因素，如果腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌群含量下降或者失衡，將導致腸道微生態(tài) 體系的紊亂和失衡 [6] 。 2 乳酸菌的生理功能 維持動物腸道菌群平衡 乳酸菌作為人和動物重要優(yōu)勢菌群之一，在維持動物腸道的菌群平衡方面起到重要 作用。因為在超低溫冷凍 ( 196℃ 液氮 )中保存可以使活細胞物質(zhì)代謝和生長幾乎完全停止 [3]。所以在乳酸菌保藏過程中，要不斷的進行傳代移種。不同 的乳酸菌，對最適溫度要求不同，高溫型的最適溫度為 37℃，中溫型的最適溫度為 25～ 30℃，一般采用恒溫厭氧培養(yǎng)即采用 95％氮氣和 5％二氧化碳的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)為宜 [2]。山麗杰、田洪濤和 賈英民等 [1]研究發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)乳酸桿菌通常使用的培養(yǎng)基是脫脂乳、乳清基礎培養(yǎng)基和 MRS 培養(yǎng)基。根據(jù)發(fā)酵類型不同，可以分為同型發(fā)酵 (發(fā)酵產(chǎn)物中僅有乳酸 )和異型發(fā)酵（發(fā)酵產(chǎn) 物除乳酸外，還有乙酸、乙醇和香味成分等）。從形態(tài)上可分為球菌和桿菌；呈球形的菌有鏈球菌、片球菌及明串 珠菌屬；呈桿狀的菌有乳桿菌 (Lactobacillus) 、乳球菌 (Lactococcus)和雙歧桿菌 (Bifidobacterium)等至少 23 個屬。本研究為棉粕發(fā)酵飼料的科學評定和合理利用提供理論依據(jù)。 (3) 在飼糧中添加嗜酸乳桿菌發(fā)酵棉粕飼喂 AA 肉雞，研究其對 AA 肉仔雞生長性 能、血液理化指標和免疫指標的影響。 (2) 試驗的發(fā)酵底物為棉粕和玉米混合物，對高產(chǎn)乳酸的嗜酸乳桿菌發(fā)酵條件參數(shù)、 底物組成比例和接種量進行優(yōu)化。目前主要用于研究的微生 物菌種有酵母 菌、熱帶假絲酵母及霉菌等（吳小月等， 1989；施安輝等， 1993），但是 關于嗜酸乳桿菌發(fā)酵棉粕源蛋白質(zhì)飼料的營養(yǎng)特性需進一步研究，尤其是發(fā)酵底物中有 機酸、 B 族維生素等代謝產(chǎn)物的變化。乳酸桿菌對動物機體具有重要的營養(yǎng)作用，能夠分解飼料中的 糖類、 脂肪和蛋白質(zhì)，可合成維生素，產(chǎn)生宿主可利用的有機酸、必需氨基酸等代謝產(chǎn)物，從 而增強動物的營養(yǎng)代謝，改善生產(chǎn)性能。 2 立題依據(jù) 微生物發(fā)酵飼料的關鍵之處在于菌種的選擇，目前廣泛用于發(fā)酵飼料的菌種有乳酸 菌、霉菌、酵母菌、芽孢桿菌等，而乳酸桿菌是人和動物腸道的正常定居者，在腸道內(nèi) 生長發(fā)育，分解糖類生成乳酸而形成酸性環(huán)境，從而抑制腸道內(nèi)有害細菌的增殖，并防 止產(chǎn)毒和致病。因此，選育出一株高產(chǎn)乳酸的嗜 酸乳桿菌對畜牧業(yè)的發(fā)展起著至關重要的作用，本研究采用微生物篩選技術，選育出一 株具有高產(chǎn)酸性能的嗜酸乳桿菌（ ），通過發(fā)酵工藝參數(shù)的優(yōu)化等試驗，就 嗜酸乳桿菌發(fā)酵棉粕的營養(yǎng)特性進行了研究。那么，如何才能在盡量減少抗生素類藥物使用的同時，維護動物健康呢？近 年來最引人注目的是以微生態(tài)學為基礎的微生物技術，研究較多是乳酸菌，因為乳酸菌 屬于腸道的正常菌群，用其發(fā)酵飼料后，發(fā)酵飼料中含有相當數(shù)量的活菌。 抗生素在消滅致病菌的同時，也消滅了對動物 機體有益的細菌，破壞腸道微生物的微生 態(tài)平衡，導致動物（特別是幼年畜禽）對病原微生物的易感性。 chicken serum。 solid fermentation。 serum immunoglobulins（ IgG、IgA、 IgM） content is significantly improved (P ). Conclusions: Experiment 1: Selected and breed a strain Lactobacillus acidophilus S5 with better acid production. Experiment 2: Ascertained the optimal biological fermentation forage parameters for acid production of fermentation metabolite, temperature is 37℃ , fermentation time cycle is 48h, initial moisture of the substrate is 30% and pH 6。 (2) in 0~21dayold, albumin and total protein significantly increased % and % (P ), Ca and P improved % and %, but the difference is not significant (P), triglyceride significantly increased % (P), total cholesterol significantly decreased % ( P)。 Ⅲ group pentanoic acid and citric acid significantly improved % and % ( P), VB1, VB3 and VB5 content highly significantly reduced %, % and % (P ), leucine and phenylalanine significantly decreased % and % (P )。 關鍵詞：嗜酸乳桿菌；固體發(fā)酵；發(fā)酵棉粕；雞血清；代謝產(chǎn)物 論文類型： B（應用研究） Abstract Objective: Lactobacillus acidophilus was selected as starting strain in this study, screening out Lactobacillus acidophilus with properties of highyield acid, through the optimization of fermentation IV condition parameters, bottom material position, inoculation amount of the selected breeding strains with cottonseed meal and corn as solid fermentation substrate to explore the metabolic ponents and nutritional value of fermentation products of the breeding Lactobacillus acidophilus strains, and the effects on growth performance, blood physical and chemical indicators and immune indexes of broiler chicken, therefore providing theoretical support for the prehensive assessment and rational utilization of fermentation cottonseed meal of Lactobacillus acidophilus. Method: This research is posed by four parts. Experiment 1: Choose a good strain with higher acid produce and better growth through