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酶活力測(cè)定方法ppt課件(參考版)

2024-10-22 05:43本頁(yè)面
  

【正文】 與GI公司生產(chǎn)的rhIL 11對(duì)照品比較有 20個(gè)峰與對(duì)照品一致 ,但第 6 峰的峰高和峰面積均明顯較小 ,且在第 9和第 10 峰之間多一個(gè)峰 ,說(shuō)明該廠rhIL 11蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與GI公司生產(chǎn)的rhIL 11比較存在細(xì)小差別 。 5個(gè)色譜圖完全重疊在一起 ,所產(chǎn)生21個(gè)峰的保留時(shí)間 、 峰高和峰面積的RSD均分別小于 1 .0%,5 .4%和 9. 8%,表明本系統(tǒng)誤差小 ,重復(fù)性好 ,可用于rhIL 11的肽圖分析 。HPLC系統(tǒng)測(cè)試 HPLC系統(tǒng)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)樣后呈 3個(gè)峰 ,12次重復(fù)進(jìn)樣 3個(gè)峰保留時(shí)間的RSD分別為 0. 4%,0 .6%和 0. 8%,峰面積的RSD分別為0 .7%,0 .8%和 0 .8%。 按此方法摸索最佳酶切時(shí)間 ,在第 14針后rhIL 11已被完全酶切 ,酶切時(shí)間在 18~ 22h范圍內(nèi)肽圖圖譜基本一致 ,即確定最佳酶切條件為 37℃ 保溫 20h 。mL 1的樣品 0 4mL對(duì) 1%NH 4HCO 3充分透析 ,然后取透析樣品 250μ L至微量進(jìn)樣瓶 ,加 0 3mg 1。C測(cè) 定 : 每 隔 3 0 s ,讀 取 A , 共 5 m i n— A每分鐘改變
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