sds-聚丙烯酰胺凝膠理論(參考版)
2025-05-17 10:50本頁面
【正文】 ） 七 分析計算 繪制標準曲線： 按下式計算相對遷移率： (m R ) 以每個蛋白標準的分子量 對數(shù)對它的相對遷移率作圖得標準曲線，量出未知蛋白的遷移率即可測出其分于量，這樣的標難曲線只對同一塊凝膠上的樣品的分子量測定才具有可靠性。 電泳需 2021伏特小時 ） ? 凝膠層析法 測定蛋白質(zhì)相對分子量 （ 特點方法簡單 ， 樣品用量少 ， 而且有時不需純物質(zhì) ， 一般不引起生物活性物質(zhì)的變化 。 ? 采用 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測蛋白質(zhì)分子量時 ， 往往采取 2種以上測定方法結(jié)合使用 。 ? 已發(fā)現(xiàn)有些蛋白質(zhì)不能用 SDSPAGE測定分子量 。 因此在用SDS處理樣品同時往往用巰基乙醇處理 ， 巰基乙醇是一種強還原劑 ， 它使被還原的二硫鍵不易再氧化 ， 從而使很多不溶性蛋白質(zhì)溶解而與 SDS定量結(jié)合 。因此，要確定某種蛋白質(zhì)的分子量時，最好用兩種方法互相驗證，則更為可靠。如組蛋白 F 1 ，它本身帶有大量正電荷，盡管結(jié)合了正常量的 SDS ，仍不能完全掩蓋其原有電荷的影響。 為了得到更全面的資料，還必須用其它方法測定其 Mr及分子中肽鏈的數(shù)目等，與 SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果相互參照。 3 ). 許多蛋白質(zhì)，是由亞基 ( 如血紅蛋白 ) 或兩條以上肽鏈 ( 如胰凝乳蛋白酶 ) 組成的，它們在 SDS 和疏基乙醇的作用下，解離成亞基或單條肽鏈。 三 . 注意事項 用 SDSPAGE測蛋白質(zhì) Mr時應
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