【正文】 這三種RNA 聚合酶分子量都在 50 萬左右，亞基數(shù)分別為 615。 解旋和重新螺旋化也是 RNA 聚合酶的內(nèi)在特性，在酶的前端解螺旋，在后端以相反方第一章 蛋白質(zhì)的合成 53 向重新螺旋化，活體狀況中，可能還有其它酶活性來幫助調(diào)整 DNA 的拓?fù)鋵W(xué)性質(zhì)。 P360 圖 201RNA 聚合酶的活性中心 核心酶覆蓋 60bp 的 DNA 區(qū)域， 其中解鏈部分 17bp 左右， RNADNA 雜合鏈約 12bp。 不同的原核生物，都具有相同的核心酶，但?亞基有所差別，這決定了原核基因表達(dá)的選擇性。 ?亞基的功能：核心酶在 DNA 上滑動(dòng)，?亞基能增加酶與 DNA 啟動(dòng)子的結(jié)合常數(shù)，增加停留時(shí)間，使聚合酶迅速找到啟動(dòng)子并與之結(jié)合，?亞基本身無催化活性。 PPinnnnR N AMgD N AR N AU T PnC T PnG T PnA T Pn )4321(/ 24321 ????????????????? ????? ?模板、聚合酶第一章 蛋白質(zhì)的合成 52 RNA聚合酶各亞基的大小與功能： 亞基 亞基數(shù) 分子量（ KD） 基因 功能 β ’ 1 160 rpoC 與模板 DNA 結(jié)合 β 1 150 rpoB 與核苷酸結(jié)合，起始和催化部位。 RNA 聚合酶全酶 |（ holoenzyme）分子量 46 萬 Da，由六個(gè)亞基組成，α 2ββ ’ ?ω ，另有兩個(gè) Zn2+。 第一章 蛋白質(zhì)的合成 51 一、 RNA 聚合酶 RNA 合成的基本特征 ①底物： NTP（ ATP、 GTP、 CTP、 UTP） ② RNA 鏈生長(zhǎng)方向： 5’→ 3’ ③不需引物 ④需 DNA 模板 反應(yīng)： RNA 聚合酶（原核） 和其它原核細(xì)胞一樣，只有一種 RNA 聚合酶，合成各種 RNA（ mRNA、 tRNA、rRNA）。 基因的轉(zhuǎn)錄是有選擇性的，細(xì)胞不同生長(zhǎng)發(fā)育階段和細(xì)胞環(huán)境條件的改變，將轉(zhuǎn)錄不同的基因。 第八節(jié) DNA指導(dǎo)的 RNA合成（轉(zhuǎn)錄） RNA 鏈的轉(zhuǎn)錄，起始于 DNA 模板的一個(gè)特定位點(diǎn)，并在另一位點(diǎn)終止，此轉(zhuǎn)錄區(qū)域稱為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。 負(fù)鏈：與正鏈互補(bǔ)的 DNA 鏈。 基因表達(dá)的終產(chǎn)物：① RNA ②蛋白質(zhì) 轉(zhuǎn)錄過程涉及兩個(gè)方面 ① RNA 合成的酶學(xué)過程 ② RNA 合成的起始信號(hào)和終止信號(hào)，即 DNA 分子上的特定序列。 ③轉(zhuǎn)錄時(shí)， RNA 聚合酶只有 5’→ 3’聚合作用，無 5’→ 3’及 3’→ 5’外切活性。 相異：①復(fù)制需要引物，轉(zhuǎn)錄不需引物。 轉(zhuǎn)錄研究的主要問題 ① RNA 聚合酶 ②轉(zhuǎn)錄過程 ③轉(zhuǎn)錄后加工 ④轉(zhuǎn)錄的調(diào)控 ① ~③是基本內(nèi)容，④是目前研究的焦點(diǎn)，轉(zhuǎn)錄調(diào)控是基因調(diào)控的核心。 轉(zhuǎn)錄（ transcription）：以一段 DNA 的遺傳信息 為模板，在 RNA 聚合酶作用下，合成出對(duì)應(yīng)的 RNA 的過程，或在 DNA 指導(dǎo)下合成 RNA。 5’—脫氧腺嘌呤核苷酸鈷胺素是 甲基丙二酸單酰輔酶 A 變位酶的輔酶 九、 硫辛酸 丙酮酸脫羧酶復(fù)合體中的輔酶 （硫辛酰氨轉(zhuǎn)乙酰酶和二氫硫辛酰氨脫氫酶的輔酶） 第一章 蛋白質(zhì)的合成 49 十、 維生素 C 結(jié)構(gòu) 化學(xué)名稱：抗壞血酸 來源 :食物。 四、 維生素 B5 與煙酰胺輔酶 P369 維生素 B5 包括煙酸（尼克酸）、煙酰胺（尼克酰胺） 煙酰胺是合成 NAD、 NADP 的前體 P369 結(jié)構(gòu)式：煙酸、煙酰胺、 NAD、 NADP NAD、 NADP 是各種脫氫酶的輔酶。 噻唑環(huán) C2 上氫解離，使 C2 變成負(fù)碳離子，可以和α 酮酸的羧基碳結(jié)合，形成中間復(fù)合物脫 CHOH。 缺乏癥：腳氣病、多發(fā)性神經(jīng)炎。 一、 維生 B1 與焦磷酸硫胺素（ TPP） P367 化學(xué)名稱：硫胺素， 活性形式：焦磷酸硫胺素（ TPP） 第一章 蛋白質(zhì)的合成 44 結(jié)構(gòu) P367 結(jié)構(gòu)式： 硫胺素 活性形式： TPP 硫胺素 + ATP Mg2+ TPP + AMP 硫胺素激酶 來源： 瘦肉、酵母、谷類的胚芽、皮層。 凝血過程中，許多凝血因子的生成與維生 K 有關(guān)。 四、 維生素 K（ K K K3） P364 結(jié)構(gòu) 來源 食物和腸道微生物合成；綠色蔬菜、動(dòng)物肝臟、牛奶、大豆， 大腸桿菌、乳酸菌 功能 促進(jìn)凝血。 結(jié)構(gòu) P363 結(jié)構(gòu)式： α 生育酚 來源 第一章 蛋白質(zhì)的合成 43 動(dòng)、植物油、麥胚油、玉米油、花生油、棉子油、蛋黃、牛奶、水果等。 維生素 D3 （膽鈣化固醇）→ 25羥基膽鈣固醇（肝臟）→ 1， 25 一二羥基膽鈣固醇（腎臟）→小腸（促進(jìn) Ca2+ 的吸收、運(yùn)輸 ）及骨骼（促進(jìn) Ca2+的沉積 ）中，參與調(diào)節(jié)鈣磷代謝。 缺乏癥：佝僂癥等。 植物體內(nèi)不含維生素 D（但有維生素 D 原） 來源 第一章 蛋白質(zhì)的合成 42 魚肝油、蛋黃、牛奶、肝、腎、皮膚組織等富含維生素 D。 當(dāng)全反視黃醛變成 11順式視黃醛時(shí)，部分全反視黃醛被分解為無用物質(zhì)，故必需隨時(shí)補(bǔ)充維生素 A，每日補(bǔ)充量 1 mg。 活性形式： 11順式視黃醛 P361 視循環(huán) 視紫紅質(zhì)為弱光感受物，當(dāng)弱光射到視網(wǎng)膜上時(shí)，視紫紅質(zhì)分解，并刺激視神經(jīng)而發(fā)生光覺。 β 胡蘿卜素 轉(zhuǎn)化成二個(gè)維生素 A（一切有色蔬菜） α 胡蘿卜素 γ 胡蘿卜素 轉(zhuǎn)化成一個(gè)維生素 A 第一章 蛋白質(zhì)的合成 41 黃玉米色 素 功能 與視覺有關(guān)。 水溶性： B B B B1 C 等，輔酶。 類固醇激素 （ 1）腎上腺皮質(zhì)激素（７種） （ 2）性激素 雄性激素：睪丸酮 雌性激素：雌二醇、黃體酮 第一章 蛋白質(zhì)的合成 40 第七節(jié) 蠟脂 第五章 維生素與輔酶 3 學(xué)時(shí) 定義： 維持生物正常生命過程必需的一類小分子有機(jī)化合物，它在生物體內(nèi)含量極 少，大多數(shù)由食物供給，人體自身不能合成它們。 三、 固醇衍生物 膽汁酸 圖 多數(shù)脊椎動(dòng)物的膽酸，能以肽鍵與 Gly 或牛磺酸結(jié)合。 膽汁酸（在肝中合成）參與腸道脂類吸收 腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素、雄激素 7 一脫氫膽固醇 紫外線 維生素 D3 植物固醇 不能被動(dòng) 物吸收和利用。 b. 膽固醇是生物膜的重要成分，羥基極性端分布于膜的親水界面，母核及側(cè)鏈深入膜雙層，控制膜的流動(dòng)性，阻止磷脂在相變溫度以下時(shí)轉(zhuǎn)變成結(jié)晶狀態(tài)，保證膜在低溫時(shí)的流動(dòng)性及正常功能。腎 上腺、卵巢等合成固醇激素的腺體含量也較多，可達(dá) 1— 5%。 結(jié)構(gòu) C3 羥基 C10 和 C13 各一個(gè)甲基 C5 與 C6 間一個(gè)雙鍵 C17 異辛烷 第一章 蛋白質(zhì)的合成 38 白色、斜方晶體。 圖 膽固醇（二氫膽固醇、 T— 脫氫膽酸、膽固醇酯） 以游離或酯的形態(tài)存在于一切動(dòng)物組織中，植物中沒有。 第六節(jié) 萜類和固醇類化合物 可以統(tǒng)稱為類異戊二烯類 (isoprenoid)，由乙酰 CoA 經(jīng)由異戊二烯焦磷酸生成的，而不是由異戊二烯合成的 第一章 蛋白質(zhì)的合成 37 一、 萜類 一些真核蛋白質(zhì)合成后經(jīng)過異戊二烯化，常見的異戊二烯基團(tuán)就是 farnesyl 和geranylgeranyl group 二、 固醇類 結(jié)構(gòu)： 含有環(huán)戊烷多氫菲母核的一類醇、酸及其衍生物。巨噬細(xì)胞卻不同， LDL 受體的合成并不降低，粥樣硬化斑中的巨噬細(xì)胞含有高水平的 LDL 受體，而且對(duì)氧化破壞的 LDL 仍有親和力。在正常情況下，進(jìn)入細(xì)胞中的 LDL 釋放出的膽固醇和其它脂類可用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和 代謝上的需要。肝細(xì)胞是唯一具有 HDL 受體的細(xì)胞。 Plaque 中的膽固醇大部分是來自粥樣細(xì)胞吞噬的 LDL。最后，粥樣硬化斑鈣化 (calcify)突入動(dòng)脈腔，阻止血液流動(dòng)，大腦、心、肺等器官就會(huì) 缺氧和營養(yǎng)。 ? 脂蛋白與動(dòng)脈粥樣硬化： (atherosclerosis) 動(dòng)脈粥樣硬化是一個(gè)慢性病，在此過程中，粥樣物質(zhì)逐漸沉積在動(dòng)脈的內(nèi)壁上，這些沉積物稱為 Plaque(蝕斑 )，在 plaque 形成過程中，平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和各種細(xì)胞殘?jiān)饾u第一章 蛋白質(zhì)的合成 36 聚集。當(dāng)血漿中的卵磷脂：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶 (Lecithin cholesterol acyltransferase, LCAT)將卵 磷脂上的脂肪酸殘基轉(zhuǎn)移到膽固醇上生成膽固醇脂時(shí)，HDL 將這些膽固醇脂動(dòng)輸?shù)礁巍? （ 3） 低密度脂蛋白 (LDL， )，把膽固醇運(yùn)輸?shù)浇M織，經(jīng)過一系列復(fù)雜的過程， LDL 與 LDL 受體結(jié)合并被細(xì)胞吞食。 圖 P233 血漿脂蛋白根據(jù)密度來分類： （ 1） 乳糜微粒，密度非常低，運(yùn)輸甘油三酯和膽固醇脂，從小腸到組織肌肉和 adipose組織。） 第一章 蛋白質(zhì)的合成 35 雖然脂蛋白可以指任何與脂基 (如脂肪酸、異戊二烯 )共價(jià)相連的蛋白、但它常常用來指哺乳動(dòng)物血漿 (尤其是人 )中的脂 蛋白質(zhì)復(fù)合物。當(dāng)細(xì)胞積累 GM2 時(shí)就溶脹最終死亡， TaySachs 綜合癥 (失明，肌肉萎縮，抽搐，精神錯(cuò)亂 )，通常在出生數(shù)月后表現(xiàn)出來。 ? 鞘脂貯積病 (sphingolipld storage disease, sphingolipidose) 溶酶體貯積病是由于降解某種特定代謝物 的酶發(fā)生遺傳性缺陷造成的。腫癌 Cell 的神經(jīng)節(jié)苷脂糖鏈比正常 Cell 的短?，F(xiàn)在臨床上正研究用酶促降解 B— 抗原或 A抗原的末端殘基 Gal 或 GalNAc，從而增加 O— 抗原的血液來源。 糖脂的生物學(xué)功能 糖脂的功能還不十分清楚，有些動(dòng)物細(xì)胞膜上的糖脂分子能與細(xì)菌毒素以及細(xì)菌細(xì)胞結(jié)合，起受體的作用。 中樞神經(jīng)系統(tǒng)某些神經(jīng)元膜的特征性脂，可能與通過神經(jīng)元的神經(jīng)沖動(dòng)傳遞有關(guān)。 第一章 蛋白質(zhì)的合成 33 腦苷脂（中性糖鞘脂類） 圖 主要在 神經(jīng)、腦組織中， X 為 Glc 稱 Glc 腦苷脂， X 為 Gal 稱 Gal 腦苷脂。 寡糖鏈 (帶有一個(gè)或多個(gè)唾液酸殘基 )與神經(jīng)酰胺形成的鞘糖脂稱為神經(jīng)節(jié)苷脂，最初是從神經(jīng)組織中分離到的，在其它組織中也有分布。半乳糖腦苷脂 (galatocerebroside)幾乎全部存在于腦