【正文】 。導(dǎo)師淵博的學(xué)識(shí)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度讓我受益終身，在此謹(jǐn)向?qū)熤乱灾孕牡母兄x。 得出異歐前胡素紫外光譜最大吸收峰在219nm 處，用紫外分光光度法 測(cè)得白芷中含有異歐前胡素的含量為 %，說(shuō)明市場(chǎng)中賣(mài)的白芷質(zhì)量良好。 運(yùn)用 熱回流提取的方法對(duì)白芷中 香豆素類(lèi)成分 異歐前胡素進(jìn)行提取 并測(cè)定其含量 ，以提高異歐前胡素的提取率，并保護(hù)環(huán)境，節(jié)省能源。而本實(shí)驗(yàn)中測(cè)得的白芷中異歐前胡素的含量微低， 其可能原因有很多種，如對(duì)照品樣品不純，對(duì)照品實(shí)驗(yàn)中分解，樣品經(jīng)一系列熱提取、放置等使異歐前胡素成分分解，藥材白芷炮制時(shí)有效成分流失，藥材放置過(guò)久成分分解等，故使測(cè)得的異歐前胡素成分偏低。 實(shí)驗(yàn)中得出白芷中異歐前胡素的含量為 %，參照文獻(xiàn)中異歐前胡素含量%不等，因?yàn)樗幉陌总瞥霎a(chǎn)地不同，各個(gè)地方白芷有效成分含量不同 ，如川白芷，杭白芷 。實(shí)驗(yàn)中所購(gòu)異歐前胡素對(duì)照品，為從上海 源葉生物科技有限公司 通過(guò)網(wǎng)絡(luò)得到的，其成分含量純度未經(jīng)親自鑒定，直接使用，故不得了解其品質(zhì)。 實(shí)驗(yàn)中采用對(duì)比的方法分 別選擇了提取異歐前胡素所用的溶劑和提取方法，優(yōu)化了對(duì)異歐前胡素的提取 ，為以后提取白芷中有效成分異歐前胡素做基礎(chǔ)； 而實(shí)驗(yàn)中也有不足 之處 ，對(duì) 提取異歐前胡素的溶劑與提取方法中沒(méi)有進(jìn)行水平對(duì)照比較，實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)偶然誤差，沒(méi)有進(jìn)行水平對(duì)比實(shí)驗(yàn)，其中誤差不得而知，而且對(duì)于溶劑的選擇上，白芷主要成分為香豆素類(lèi)成分，香豆素易溶于有機(jī)溶劑中，實(shí)驗(yàn)中只選擇了 6 種有機(jī)溶劑作為實(shí)驗(yàn)對(duì)比溶劑，其中也許忽略了更高效的提取溶劑，在以后實(shí)驗(yàn)中有待發(fā)掘。 實(shí)驗(yàn)中選擇了紫外分光光度法做成分含量測(cè)定的方法 ，通過(guò)對(duì)照品異歐前胡素得出其最大吸收峰為 219nm，并 運(yùn)用對(duì)比實(shí)驗(yàn)得出對(duì)異歐前胡素提取的最佳方法為滲漉法提取，但因時(shí)間用的過(guò)長(zhǎng)、經(jīng)濟(jì)等多方面因素而選用熱回流提取 1h 作為提取異歐前胡素的最佳方法。 白芷中主要有效成分為香豆素類(lèi)成分，主要溶于有機(jī)溶劑， 而且不能長(zhǎng)時(shí)間加熱。 樣品中有效成分含量 的測(cè)定 結(jié)果 經(jīng)上述一系列實(shí)驗(yàn)，表明該實(shí)驗(yàn) 精密度 、 穩(wěn)定性、重復(fù)性良好，以 此為基礎(chǔ)測(cè)定商店購(gòu)買(mǎi)樣品白芷中異歐前胡素的含量，取供試品溶液 （用熱回流提取 1h 的方法提取樣 品所得） ，在 波長(zhǎng) 219nm 處，以空白溶液矯正基線，測(cè)定供試液的吸光度值為，帶入回歸方程得出異歐前胡素的含量為 106g，得出該白芷中含有異歐前胡素的含量為 %。故 實(shí)驗(yàn)中 采取 平行制備樣品溶液 6 份的試驗(yàn)方法 ，平行測(cè)定其含量 見(jiàn)表 34。 表 36 穩(wěn)定性試驗(yàn)吸光度的測(cè)定值 1 2 3 4 5 6 7 8 9 吸光度 將數(shù)據(jù)用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差公式計(jì)算得出 RSD=%，證明試驗(yàn)穩(wěn)定性良好。 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果 穩(wěn)定性試驗(yàn)為考察原料藥或者藥物制劑在溫度，濕度，光線等影響下隨時(shí)間變化規(guī)律的試驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)中取 6 號(hào)樣品溶液，于 219nm處連續(xù)測(cè)定 6 次，以此測(cè)定本實(shí)驗(yàn)的精密度是否良好，結(jié) 果 見(jiàn)表 35。精密高，測(cè)定的結(jié)果也越接近真實(shí)值。 方法學(xué)考察結(jié)果 精密度試驗(yàn)結(jié)果 精密度是指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。 實(shí)驗(yàn)中異歐前胡素對(duì)照品放入 80%乙醇中不易溶解，經(jīng)震 搖 、放置 2 天后，還有些許微晶殘留，后經(jīng)水浴加熱最終全部溶解。 表 31 濃度與吸光度的關(guān)系 圖 31 對(duì)照品溶液濃度與吸光度的線性關(guān)系 濃度 (g/ml) 106 106 106 106 11 106 吸光度 y = + R2 = 00 2 4 6 8 10 12濃度( C )吸光度(A)哈爾濱商業(yè)大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 16 由圖 31 得出回歸方程為： y =+（ R2 = ），表明異歐前胡素 在 10611 106g/ml 之間線性關(guān)系良好。 線性關(guān)系方程的建立 實(shí)驗(yàn)中取異歐前胡素對(duì)照品溶液 1~5ml，定容至 10ml 容量瓶中，以 80%乙醇為空白 溶液 于異歐前胡素最大吸收峰處，即 219nm 處測(cè)定 ，得數(shù)據(jù)見(jiàn)表 31。 對(duì)照品溶液的波長(zhǎng)選擇 結(jié)果 利用紫外分光廣度計(jì)測(cè)定異歐前胡素的最大吸收峰，在 200400nm之間，經(jīng)試驗(yàn)測(cè)得從 200219nm，吸光度數(shù)值成依次遞增 趨勢(shì) ，在 219400nm，吸光度數(shù)值成依次遞減趨勢(shì)，故異歐前 胡素在 219nm 處有最大吸收峰，將 219nm 波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。 表 33 樣品含量測(cè)定 提取方法 稱(chēng)樣量（ g） 測(cè)得 含 量（ mg/g） 放置過(guò)夜 超聲（ 30min） 超聲（ 60min） 熱回流（ 1h） 熱回流（ 2h） 熱回流（ 3h） 在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，白芷樣品回流時(shí)間越長(zhǎng)，測(cè)得異歐前胡素含量呈下降趨勢(shì)，可能哈爾濱商業(yè)大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 15 是異歐前胡素分子中酯鍵水解所致，提示異歐前胡素對(duì)熱不穩(wěn)定，提取時(shí)間 不宜過(guò)長(zhǎng)。故本實(shí)驗(yàn)中選擇 80%乙醇做提取溶劑 。 表 32 紫外光譜測(cè)定含量 提取溶劑 稱(chēng)樣量（ g） 測(cè)得含量 （ mg/g） 石油醚 乙醚 醋酸乙酯 丙酮 80%乙醇 甲醇 白芷的藥理活性成分為香豆素類(lèi)化合物，在酸性和中 性 條件下不溶于水，易溶于石油醚、乙醚等有機(jī)溶劑；在堿性條件下與堿作用而溶于水。 樣品中有效成分含量 的測(cè)定 取 供試品溶液 ，在 異歐前胡素 最大吸收波長(zhǎng) 處，以 80%乙醇做空白溶液 ， 用紫外分光光度儀 測(cè)定 供試品溶液 的吸光度值，代入 線性 回歸方程，計(jì)算 供試品溶液 中 異 歐前胡素的含量。 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取樣約 ，精密稱(chēng)定，按“ ” 方法制備樣品溶液 ，于 最大吸收波長(zhǎng) 處測(cè)定吸光度，每隔 30min 測(cè)定一次，連續(xù)測(cè)定 9 次， 測(cè)定 吸光度 值 。以濃度（ C）為橫坐標(biāo)，吸光度（ A）為縱坐標(biāo)作圖。 線性關(guān)系 考察 精密吸取 異 歐前胡素對(duì)照品溶液各 5ml，分別用乙醇定容至 10ml。 哈爾濱商業(yè)大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 13 供試品 溶液 的制備 取樣約 ，精密稱(chēng)定，置索氏提取器中，用 “ ” 和 “ ” 中優(yōu)選的方法制備，定容至 100ml，即得樣品溶液。將 提取液濾過(guò)并定容至 100ml，并進(jìn)行樣品含量測(cè)定 。 提取方法的選擇 取白芷樣品粉末 6 份，每份約 ，精密稱(chēng)定。 提取溶劑的選擇 取白芷樣品粉碎，取粉末 6 份，每份約 ，精密 稱(chēng)定 ，分別用石油醚、乙醚、醋酸乙酯、丙酮、 80%乙醇、甲醇作提取溶劑，封閉超聲 30min，靜置，濾過(guò)并定容至 10ml 容量瓶中。 異歐前胡素對(duì)照品 ：來(lái)自上海源葉生物科技有限公司 ，批號(hào)： YY20200503。 由于異歐前胡素可能為白芷中陣痛有效成分，故本實(shí)驗(yàn)主要研究異歐前胡素，對(duì)其提取方法與含量測(cè)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，為以后白芷中異歐前胡素的研究打下基礎(chǔ)。 從當(dāng)前 的研究結(jié)果來(lái)看白芷的產(chǎn)地加工方法 （ 硫磺煙熏法 ） 對(duì)香豆素類(lèi) 成分以及揮發(fā)油的損失很大 ， 也不能適應(yīng)中藥現(xiàn)代化的要求 ， 有必要加以改進(jìn) ， 但目前還缺乏行之有效的產(chǎn)地加工方法 ， 因此尋找一種新 的方便實(shí)用的加工方法實(shí)為當(dāng)務(wù)之急。 哈爾濱商業(yè)大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 11 研究的目的意義 目前白芷陣痛的有效成分尚無(wú)人進(jìn)行深入研究，有關(guān)白芷的質(zhì)量研究也主要是以歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素為指標(biāo)成分進(jìn)行的。 對(duì)白芷的研究中川白芷的有效成分含量比杭白芷和祁白芷有效成分含量高 [20]。戴躍進(jìn)等對(duì)川白芷的采收加工進(jìn)行了研究 ，發(fā)現(xiàn)川 白芷 用硫磺熏后 ，香豆素 類(lèi)及揮發(fā)油的含量均不及加工前的 50%[17]。張玉芳等研究了不同硫熏時(shí)間對(duì)白芷中香豆素類(lèi)成分的影 響 ，結(jié)果發(fā)現(xiàn) 白芷 被熏透的前 9 小時(shí) ， 隨著硫熏時(shí)間的延長(zhǎng) ， 香豆素類(lèi)含量急劇下降 ， 熏透后則下降不明顯 ： 熏透后 白芷 香豆素類(lèi)成分下降了 70%以上 [15]。 乙醇濃度的考察 提取 效 率隨乙醇濃度的增加而增加，但當(dāng)乙醇濃度達(dá) 60%后，提取率變化不大。文獻(xiàn)表明，白芷用水進(jìn)行提取時(shí)，經(jīng)測(cè)定其提取物中幾乎不含異歐前胡素 [13]。在上述條件下，歐前胡素的轉(zhuǎn)移率分別為 %、 %、 %，以滲漉法提取率最高 [1112]。 其他方法 劉紅梅等采用微波輔助萃取白芷香豆素類(lèi)成分，結(jié)果表明微波功率、微波輻射時(shí)間、溶劑用量、溶劑濃度、浸泡時(shí)間、藥材粉碎度等參數(shù)對(duì)白芷有效成分的提取具有哈爾濱商業(yè)大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 10 交互作用，優(yōu)選出的最佳萃取工藝為：微波功率 450W，輻射時(shí)間 10min，浸泡時(shí)間30min，固液比為 l:4，乙醇濃 度為 95%，粉碎度為 40 目 [910]。主要是通 過(guò)把 電 能轉(zhuǎn) 換能 容器 產(chǎn)生的快速機(jī)械振動(dòng)波來(lái)減少目標(biāo)萃取物與樣品基體之間的作用力從而實(shí)現(xiàn)固 液萃取分離。但 因 提取液受熱 的 時(shí)間 頗長(zhǎng)，因此對(duì)受熱易分解的成分需小心適用 。而滲漉法除了具有操作簡(jiǎn)便、提取率高的優(yōu)點(diǎn)以外 ， 更重要的是 ， 它可以避免香豆素成分受熱損失 [8]。 從超臨界萃取物的樣品 鑒定中可得 異歐前胡素相對(duì)于總 香豆素的百分含量 的 %，效率非常之高 [7]。 白芷 中有效成分 提取及含量測(cè)定研究進(jìn)展 白芷 有效成分 提取方法研究進(jìn)展 CO2超臨界萃取法 超臨界流體色譜法是近年來(lái)出現(xiàn)的一種 新方法 ， 在分析領(lǐng)域得到 廣泛 應(yīng)用 ，在國(guó)外 該法 得到了很快的發(fā)展 ， 但我國(guó) 卻 仍處于 最初的探索階段 。 還有 解痙作用。對(duì) Hela 細(xì)胞的增 殖有抑制作用。 ④ 白當(dāng)歸素 英文名： byakangelicol 分子式： C17O18O7 藥理作用： 本品對(duì) 癌細(xì)胞 Hela 有細(xì)胞毒活性 ，用于抗腫瘤。不溶于水， 而 易溶于極性小的有機(jī)溶劑 。 用途： 解痙作用；抗癌作 用。為治療銀屑病 的有效成分。 能 增加兔子宮的收縮力和蚯蚓肌的緊張性。 能降低離體蛙心的收縮力。 研究學(xué)者 采用 90%乙醇 采用 滲漉提取 的方法 ， 所得提取物經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚 乙酸乙酯系統(tǒng)和氯仿 乙醇系統(tǒng) )進(jìn)行 梯度洗脫 ， 制備薄層 方法分離 并 純化 ，運(yùn) 用 HPLP、 MS 等 確定鑒定結(jié)構(gòu)。本 實(shí)驗(yàn) 在研究白芷有效成分的基礎(chǔ)上 ， 對(duì) 白芷 中的主要香豆素類(lèi)成分異歐前胡素提取哈爾濱商業(yè)大學(xué)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 8 方法的優(yōu)化 并進(jìn)行 含量測(cè)定 ， 這 為以后研究 白芷 陣痛、抗炎、解痙的有效成分 以及 對(duì)本地白芷的質(zhì)量監(jiān)控 有一定意義。雖 然 有 研究 者 認(rèn) 為 白 芷 鎮(zhèn) 痛 的 有 效 成 分