【正文】 同學之間互相討論批改，不交,第六十八頁，共六十八頁。jūn)樣品稀釋后接種在含有鏈霉素的完。ng)總結,7.1 細菌(x236。i)拓展,作業(yè)：P180－182 同學之間互相討論(tǎol249。,第六十五頁，共六十八頁。,第二類：只有一個λdgal+ 噬菌體感染一個細胞，λdgal+ 與 E.coli gal－通過雙交換（重組），產(chǎn)生λdgal－。因為用紫外線處理這種轉導子可以誘導λ溶解。,LFT裂解液感染gal－細菌(x236。,錯誤包裝了寄主DNA片段的噬菌體為什么是缺陷的？ 噬菌體在錯誤包裝時，加進很大一段細菌DNA，必然要減少相應長度的一段噬菌體DNA，才能保持轉導顆粒DNA長度與噬菌體長度相當，所以這種噬菌體本身的基因是不完整的。當在紫外光誘導下，可產(chǎn)生裂解途徑，λ染色體從寄主染色體上切離下來時，由于少數(shù)不規(guī)則的交換，產(chǎn)生轉導噬菌體λ dgal+（d代表噬菌體缺陷，defective）。所以只轉移細菌染色體的特定部分。n)中得到的圖距相連系的數(shù)學表達式： x = (1－d / L)3 x：兩個基因的共轉導頻率 d：染色體上兩基因間的距離（以分鐘計，min） L：轉導DNA的平均長度（以分鐘計，min） (對于P1噬菌體轉導，這個長度 L 約為細菌染色體的 2% ，即2 min),第六十一頁，共六十八頁。chu225。,轉導(zhuǎn dǎo)作圖例子,解：上述三個基因在遺傳圖上的順序(sh249。即二基因距離愈近就愈可能被包裝到同一個轉導子中并共同轉移到同一個受體細胞中，形成一個共轉導子a+b+。,普遍性轉導(zhuǎn dǎo)作圖,例如供體的基因型為a+b+ c+，受體的基因型a－b－c－，在一個三因子轉導雜交實驗(sh237。) 一般性轉導和轉化很相似。進入的DNA片段可以和寄主細胞DNA發(fā)生重組，形成遺傳結構發(fā)生重組的細菌細胞——轉導子（transductant） 轉導的細菌DNA片段長度大約為一個病毒基因組的大小，細菌染色體比病毒的染色體大得多，細菌染色體斷裂后形成非常多的片段，到底在轉導過程中，被包進病毒外殼蛋白的中是那個片斷，完成是隨機的，所以稱作普遍性轉導,第五十三頁，共六十八頁。由于噬菌體外殼蛋白(d224。當復制(f249。,（2）溫和噬菌體的增殖 λ噬菌體感染(gǎnrǎn)周期 有2種途徑： 裂解周期 lytic cycle 溶源周期 lysogenic cycle,第五十一頁，共六十八頁。,（1）烈性噬菌體的增殖 感染宿主細胞后就進入(j236。jūn)的轉導作圖,細菌(x236。n du224。)順序如何？,第四十五頁，共六十八頁。,基因順序和圖距的計算(j236。 兩種可能的排列順序：p－o－q 和 p－q－o。,用共轉化確定(qu232。,共轉化頻率的計算： 例：在一個轉化實驗中，用a+b+品系的供體DNA，轉化基因型 ab 的受體品系，得到(d233。nzh224。 這種雜合的DNA復制以后，形成一個親代類型（受體）的DNA和一個重組類型的DNA并導致轉化細胞的形成與表達。 供體DNA片段被吸入受體細胞。 ② 制備感受態(tài)細胞（competent recipient cell）：能吸取DNA分子而被轉化的細菌細胞叫做感受態(tài)細胞。 環(huán)狀DNA轉化：整體進入整合。)與轉導作圖,7.5.1 細菌的轉化(zhuǎnhu224。如相距2 min以上的就有可能表現(xiàn)不連鎖。兩個值的比：RF: T約等于20，即它們之間關系大約是1 min等于20個圖距單位（cM）。,時間圖距與重組(zh242。 選出的lac－ade＋類型即是重組(zh242。,計算(j236。u)進F－細胞，所以我們選出的 F－ade＋ strr，一定是由同時得到lac＋和ade＋的 下圖顯示了該雜交組合可能的交換情形——,第三十五頁，共六十八頁。o)。,F 因子(yīnzǐ)在細菌染色體上有許多插入位點，而且其插入片段的取向不同而形成不同的Hfr品系。)受體細胞的順序和時間繪制連鎖圖的技術，稱為中斷雜交技術（Interrupted mating technique）。,中斷雜交(z225。 ③ 殺死Hfr 將不同接合時間的細菌樣品稀釋后接種在含有鏈霉素的完 全培養(yǎng)基上，結果對鏈霉素敏感的Hfr菌株被殺死，只有F－ 細菌存活。ngch233。nɡ)； gal:半乳糖(rǔ t225。jiāo)與重組作圖,（1）中斷雜交（Interruptedmating experiment）實驗原理 Wollman和Jacob想了解Hfr品系在雜交時，什么時候把它的基因轉入F－細胞，進行了一些實驗，其中中斷雜交實驗對E.coli的遺傳(y237。iw224。,第二十七頁，共六十八頁。ng)接合管。 ④ F′菌株：帶有部分宿主染色體的游離 F 因子。,根據(jù)F因子存在的狀態(tài)不同而將細菌分為： ① F－ 菌株：缺乏 F 因子。 F因子也可以整合到細菌染色體中，像這種帶有一個整合的F 因子的品系則稱為高頻(ɡāo p237。,F 因子(yīnzǐ)的結構,F因子包含(bāoh225。 是游離于細菌染色體外的 閉合(b236。,兩種細胞之間的物理(w249。)。,澄清上述問題——U型管實驗： 1950年Davis：U型管實驗，有力地支持了細菌菌株雜交的判斷。,第二十頁，共六十八頁。,7.3.1 細菌(x236。接合能傳遞大段的DNA，在細菌的 遺傳重組中是效率最高的。jūn)的培養(yǎng)與突變型篩選,影印培養(yǎng)法,第十八頁，共六十八頁。而抗鏈霉素突變型的S12不再和鏈霉素結合，因此抗性突變細菌可以在鏈霉素存在的情況下，進行正常的翻譯作用和正常的分裂繁殖。 對噬菌體的抗性突變往往是以某種方式改變細菌的膜蛋白，從而某種噬菌體不能吸附或吸附在這種突變細菌上的能力降低(ji224。Lac－表型可能是因為lacZ＋或lacY＋基因發(fā)生突變，分別產(chǎn)生了基因型為lacZ－或lacY－的突變型菌株。,（2）分解代謝功能的突變型（catabolic functional mutants） 野生型大腸桿菌能利用比葡萄糖復雜的不同碳源，因為它能使復雜的糖類轉化成葡萄糖或其他簡單的糖類，也能將復雜分子，如氨基酸或脂肪酸降解為乙酸或三羧酸循環(huán)的中間物。nɡ ɡǎn jūn)的突變型及其篩選,7.2.1 大腸桿菌的突變類型 （1）合成代謝功能的突變型（anabolic functional mutants） 野生型品系在基本培養(yǎng)基上具有合成所有代謝和生長所必需的復雜有機物的功能，這稱為合成代謝功能（anabolic function）。ng),第十二頁，共六十八頁。 2005年報道