【正文】 頻率很高，但兩者染色體之間重組頻率很低，大約是每百萬個細胞中發(fā)生一次重組，因此F＋ 品系稱為 低頻重組（ low frequency recombination，Lfr） 。)到宿主染色體上。 ⑤ F′ F－ ，可接合，并將受體F－ 轉(zhuǎn)變?yōu)镕′ ，并對所攜帶的宿主基因是高頻重組。,7.3.2 中斷雜交(z225。 形成(x237。,Hfr 菌株 thr+ leu+ azir tonr lac+ gal+ strs F 菌株 thr－ leu－ azis tons lac－ gal－ strr,第三十頁，共六十八頁。n)雜交作圖,第三十二頁，共六十八頁。,以下雜交：Hfr lac＋ ade＋ strs F— lac－ ade－ strr ↓ 重組子 ade＋ strr 在含有鏈霉素的基本培養(yǎng)基上，Hfr細菌被殺死，因其為strs 未雜交的F－ lac－ade－strr 也死亡，因為是腺嘌呤缺陷型 所以選出來的重組子都是 ade＋ strr 因為ade＋ 是在lac＋之后(zhīh242。 它們表明ade基因已轉(zhuǎn)入細胞。jiāo)以時間（T）為單位的基因間距離基本上是一致的。,7.5 細菌的轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。目的是增加受體細胞膜對供體DNA的可透性。n)重組，形成雜合的DNA分子（heteroduplex DNA）。,第四十二頁，共六十八頁。這兩個基因也是彼此連鎖的。ili232。,7.5.1 細菌(x236。整個過程包括： 吸附?? 侵入???? 生物合成?? 裝配 裂解釋放,第五十頁，共六十八頁。,普遍性轉(zhuǎn)導(zhuǎn dǎo),轉(zhuǎn)導病毒（Transducing phages），其產(chǎn)生的頻率非常低（10－5～10－7）。l237。由于兩個基因（a+b+或b+c+）共同進入一個轉(zhuǎn)導顆粒的機率和它們之間的距離成反比。,轉(zhuǎn)導(zhuǎn dǎo)作圖例子,supC+和trpA+二基因共轉(zhuǎn)導形成第1和第2兩種轉(zhuǎn)導型， 因此，supC－trpA的共轉(zhuǎn)導頻率是（36+114 ）/ 603 =0.25 同理：supC－pyrF 的共轉(zhuǎn)導頻率是：36/603＝0.06 三基因在遺傳(y237。nyǒu)一個特定的位置。,λ噬菌體局限性轉(zhuǎn)導(zhuǎn dǎo)機制,第六十三頁，共六十八頁。這種類型的轉(zhuǎn)導子（λdgal+/gal－ ）是不穩(wěn)定的。ng)的轉(zhuǎn)導子是穩(wěn)定的，因為細菌染色體上只有一種類型的gal+ 基因，沒有噬菌體基因的整合。ir243。這種類型的轉(zhuǎn)導子（λdgal+/gal－ ）是不穩(wěn)定的。選擇在腺甘酸（ade）缺乏的培養(yǎng)基上生長的類型。n)批改，不交,第六十七頁，共六十八頁。這樣(zh232。jūn)產(chǎn)生兩種類型的轉(zhuǎn)導子： 第一類: 野生型λ在正常的attλ位點整合，接著λdgal+ 噬菌體在普通的λ序列通過交換整合，產(chǎn)生一個雙重溶源（double lysogen）。轉(zhuǎn)導噬菌體約喪失25％的噬菌體基因，卻獲得了整合位置附近的細菌基因gal+ 等。,由溫和噬菌體進行的轉(zhuǎn)導叫做局限性轉(zhuǎn)導。nx249。y224。,第五十四頁，共六十八頁。zh236。nr249。n),受體菌 染色體DNA,3基因片段轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。 su224。d236。o)概率定律，兩個片段同時轉(zhuǎn)化的概率是它們的單獨轉(zhuǎn)化的概率的乘積，這種概率是很低的。 侵入受體細胞的供體雙鏈DNA轉(zhuǎn)變成單鏈形式，其中一條鏈被降解。 片段DNA轉(zhuǎn)化：單鏈進入整合。同時這種接合重組不產(chǎn)生交互重組類型，所以用這種方法得出的圖距和減數(shù)分裂生物中所確定的圖距不同。nɡ zǔ)率圖距的關(guān)系,用時間單位法測得這兩個基因間的距離是1分鐘，用重組法測得的重組值是20％。 su224。 這時可用傳統(tǒng)的重組作用法（recombination mapping） 例如： 根據(jù)中斷雜交試驗（時間單位法），已知lac 和 ade 這兩個基因是緊密連鎖的，在某些品系的雜交中 ade基因是后于lac 進入F－細胞的。營養(yǎng)缺陷型突變基因在雜交試驗中有選擇重組型排除親代型的作用，所以稱為被選擇的標記基因。 ④ 檢查F－ 細菌所含供體基因 將獲得不同接合時間的F－ 細菌樣品都 分別接種在含疊氮化鈉，含噬菌體T1，含乳糖而無葡萄糖，含半乳糖 而無葡萄糖的培養(yǎng)基上，統(tǒng)計各供體基因出現(xiàn)的頻率。nɡ),第二十九頁，共六十八頁。i)基因形成部分二倍體,部分(b249。 ③ F＋ F－ ，可接合并將受體F－ 轉(zhuǎn)化為F＋ ，但為低頻重組。 ② F＋ 菌株：具有游離的 F 因子。n)3個區(qū) 原點 origin：轉(zhuǎn)移的起點 致育基因：編碼生成菌毛的蛋白，形成接合管 配對區(qū)：與染色體多處區(qū)域配對，可使 F 因子整合至染色體上,第二十五頁，共六十八頁。lǐ)接觸是接合重組的必要條件,第二十三頁，共六十八頁。 他用一個U型管，在底部用一塊過濾器隔開，把管分隔為相等的兩臂。jūn)的接合,注意(zh249。,7.3 細菌的接合與中斷(zhōngdu224。ngdī)。這些降解功能稱為分解代謝功能（catabolic function）。,E. coli 的全基因組,僅顯示部分基因 注意圖距單位：min,第十三頁，共六十八頁。iku224。,第九頁，共六十八頁。 大腸桿菌基因組長 4639229 bp，在松弛狀況(zhu224。)的環(huán)狀閉合DNA雙鏈，沒有組蛋白和其他蛋白質(zhì)結(jié)合，也不形成核小體結(jié)構(gòu)。 原養(yǎng)型prototroph →營養(yǎng)缺陷型auxotroph 細菌與細菌之間可有遺傳物質(zhì)的交換,第六頁，共六十八頁。,7.1.1 細菌(x236。chu225。ili224。i)不同而異 桿菌一般長1～5?，寬0.5～1?； 球菌以直徑大小表示，一般為0.5～1 ?； 螺旋菌一般長為1～50 ?，直徑為0.5～1 ?,第五頁，共六十八頁。bāo)伸長而采取二分分裂（binary fission）的方式分開。細菌的染色體長度為250～35 000μm不等。 對擬核成分分析表明，DNA占80％，其余為RNA和蛋白質(zhì)。 若用RNA酶處理，擬核中DNA的折疊結(jié)構(gòu)即不能保持，說明RNA和支架蛋白是保持擬核結(jié)構(gòu)的重要因素,細菌染色體以高度(gāod249。 2005年報道了第二個菌株E. coli K12 W3110基因組的完整序列。nɡ ɡǎn jūn)的突變型及其篩選,7.2.1 大腸桿菌的突變類型 （1）合成代謝功能的突變型（anabolic functional mutants） 野生型品系在基本培養(yǎng)基上具有合成所有代謝和生長所必需的復雜有機物的功能，這稱為合成代謝功能（anabolic funct