【正文】
ro 0 Pro Thr thi gly his gal pur lac 0 Pro Lac pro thr thi gly his gal 0 Thi Thr pro lac pur gal his gly 有 4個(gè)大腸桿菌的 Hfr菌株按以下順序轉(zhuǎn)移其標(biāo)記基因: 菌株 基因轉(zhuǎn)移順序 1 M Z X W C 2 L A N C W 3 A L B R U 4 Z M U R B 上述所有 Hfr 菌株都衍生于同一 F+菌株,這些基因在原始菌株的環(huán)狀染色體上排列順序如何? M Z X W C N A L B R U 據(jù) F 因子有無(wú)以及存在狀態(tài) 有三種類型: F﹣ 不含有 F 因子 F+ 含有一個(gè)自主狀態(tài)的 F 因子 Hfr (高頻重組菌株) 含有一個(gè)整合到染色體上的 F 因子 接合時(shí) : ⑴ Hfr菌株的基因是按一定的線性順序依次進(jìn)入 F﹣ 菌株的。 交換與重組舉例 Hfr染色體 受體染色體 ade+ lac+ ade﹣ lac﹣ Hfr染色體 受體染色體 ade+ lac+ ade﹣ lac﹣ ade+ lac+ 兩基因間無(wú)重組 ade+ lac﹣ 兩基因間有重組 RF = = ade+ lac﹣ (ade+ lac+)+(ade+ lac﹣ ) ade+ lac﹣ ade+ 重組作圖 二 . 性導(dǎo) F′因子 : 整合到 F 因子環(huán)出時(shí)偶爾不夠準(zhǔn)確,攜帶了 ,這種 F 因子稱為 F′因子。 并發(fā)性導(dǎo)頻率越高,連鎖越緊密 連鎖基因片段通過(guò)重組作圖 F + F﹣ → Hfr F﹣ → 多數(shù)為 F﹣ F + F′ F﹣ → F′ 三 . 轉(zhuǎn)化 1. 轉(zhuǎn)化的發(fā)現(xiàn) 1928年, 肺炎雙球菌 1. 轉(zhuǎn)化的發(fā)現(xiàn) 1928年, 肺炎雙球菌 1944年, DNA 細(xì)菌轉(zhuǎn)化 :一個(gè)細(xì)菌品系由于吸收了從另一細(xì)菌品系分離得來(lái)的 DNA而發(fā)生遺傳性狀的改變的現(xiàn)象。 兩個(gè)基因距離越近,并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)的可能性越大 并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率 X =(1﹣ d/L)3 d—兩基因的距離( Kb) L—最大可包裹 DNA長(zhǎng)度 (Kb) 2. 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(一般性轉(zhuǎn)導(dǎo)) 在大腸桿菌中, thr和 leu兩個(gè)基因在細(xì)菌基因組中相距約為 2%,試問(wèn)這兩個(gè)基因能否用 P1噬菌體進(jìn)行并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)?為什么? 如果能,其頻率如何? P1噬菌體可包裹 %,能包裹此兩個(gè)基因 X = ( 1 - — ) 3 = % 2 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與作圖 利用 合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率 測(cè)定基因的連鎖關(guān)系 : 供體 leu+ thr+ azis → 受體 leu﹣ thr﹣ azir 實(shí)驗(yàn) 選擇基因 未選擇基因 結(jié)論 1 leu+ 50% azir , 2% thr+ leu azi 較近 2 thr+ 3 % leu+ , 0 % azir thr leu 相鄰 3 leu+ thr+ 0% azi r azi 在邊上 azi thr leu 在以 P1噬菌體進(jìn)行的普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中,供體菌株的基因型為 pur+ nad+ pdx- ,受體菌為 pur- nad- pdx+ 。 一些種類的噬菌體在轉(zhuǎn)導(dǎo)中整合并轉(zhuǎn)移細(xì)菌基因至新寄主細(xì)胞。攜帶不同基因兩病毒顆粒同時(shí)感染同一細(xì)菌細(xì)胞的頻率為 105 105。 Hfr2 ←pro +—leu+—gal+—lac+—F F﹣ lac strr F′lac+ strs F﹣ lac strr lac+頻率低 lac+頻率高 F′因子的主要用途 ⑴ 構(gòu)建