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20xx年醫(yī)學(xué)專題—第7章-細(xì)菌的遺傳分析(完整版)

2024-11-16 00:29上一頁面

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【正文】 20分鐘一代,容易得到生化突變型。jūn)的細(xì)胞 7.1.2 細(xì)菌的基因組,第三頁,共六十八頁。jūn)的細(xì)胞和基因組(掌握) 7.2 大腸桿菌的突變型及其篩選(了解) 7.3 細(xì)菌的接合與中斷雜交染色體作圖(掌握) 7.4 F’因子與性導(dǎo)(自學(xué)了解) 7.5 細(xì)菌的轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)導(dǎo)作圖(掌握) 7.6 細(xì)菌同源重組的機(jī)制(自學(xué)了解),第七章 細(xì)菌的遺傳(y237。o),討論: 細(xì)菌的遺傳物質(zhì)的傳遞規(guī)律 細(xì)菌染色體作圖 細(xì)菌同源重組的分子機(jī)制,第二頁,共六十八頁。,細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、擬核、核糖體、 細(xì)胞質(zhì)及內(nèi)含物; 細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu):如莢膜和鞭毛 遺傳物質(zhì)環(huán)狀核酸分子,也可稱染色體。,細(xì)菌染色體的復(fù)制與細(xì)胞二分(232。,第八頁,共六十八頁。已分離出HU、H1等DNA結(jié)合蛋白,類似于真核染色體的結(jié)構(gòu)蛋白,可能與結(jié)構(gòu)域的形成有關(guān)。)組裝的形式存在,第十頁,共六十八頁。 比較K12 MG1655菌株和K12 W3110菌株,發(fā)現(xiàn)兩者基因組大小并不是一致(yīzh236。 這需要大量基因(jīyīn)的表達(dá),其中任何一個(gè)必需的基因(jīyīn)發(fā)生了突變都不能進(jìn)行一個(gè)特定的生化反應(yīng),從而阻礙整個(gè)合成代謝功能的實(shí)現(xiàn),這種突變型稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型。這種菌株顯然亦是條件致死突變型。,第十六頁,共六十八頁。 (2)轉(zhuǎn)化(transformation):是指游離的細(xì)菌DNA片段 被吸收到不同的細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)(受體)。,1. A、B兩個(gè)菌株之間發(fā)生雜交導(dǎo)致某種形式的遺傳重組? 2. 原養(yǎng)型菌落的出現(xiàn)不一定(yīd236。 U型管兩臂中分別為營(yíng)養(yǎng)缺陷型品系A(chǔ)和B,使它們繁殖到飽和狀態(tài),同時(shí)在U型管的一端交替地吸和壓,使兩臂中的培養(yǎng)液充分混合,但細(xì)菌的兩個(gè)品系的細(xì)胞卻不會(huì)接觸。 h233。n)重組( high frequency recombination,Hfr) ,因?yàn)镠fr細(xì)胞與F- 細(xì)胞接合后可以將供體染色體的一部分或全部傳遞給F- 受體,當(dāng)供體和受體的等位基因帶有不同標(biāo)記時(shí),在它們之間就可以發(fā)生重組,重組頻率可達(dá)到102以上,故稱Hfr品系。,由此也決定了它們之間的接合性能和遺傳重組的頻率: ① F+ F+ ,不能接合,因?yàn)橄嗷ヅ懦狻?細(xì)菌(x236。chu225。ng)接合管。jiāo)結(jié)果:,第三十一頁,共六十八頁。用這些不同Hfr菌株進(jìn)行中斷雜交實(shí)驗(yàn),則它們的轉(zhuǎn)移起點(diǎn)、基因轉(zhuǎn)移順序以及轉(zhuǎn)移方向都不相同,E. coli K12的部分遺傳圖 注意圖距單位:min,第三十三頁,共六十八頁。,F- lac+ ade-,F- lac- ade-,F- lac- ade+,F- lac+ ade+,lac和ade之間未交換(jiāohu224。nɡ zǔ)子,因?yàn)槲挥诤竺娴?ade+都已進(jìn)入,表明lac+也已進(jìn)入,而lac-ade+表型 就是供體受體lac、ade兩個(gè)基因間發(fā)生交換的結(jié)果。所以大致上是,1個(gè)時(shí)間單位(1分鐘)相當(dāng)于20%重組值。)與作圖 7.5.2 細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)與作圖,第三十九頁,共六十八頁。在某一細(xì)菌群體中,只有極少數(shù)細(xì)胞是感受態(tài)的,它們具有感受因子(competence factor),可能是細(xì)胞表面的一種蛋白質(zhì)或是一種轉(zhuǎn)化酶(translocase),它參與DNA的吸收。,第四十一頁,共六十八頁。 d224。 若順序是p-o-q,這樣p和o必將共轉(zhuǎn)化,因?yàn)樗鼈儽萷和q靠得更緊密。,基因(jīyīn)順序和圖距的計(jì)算:,注意:計(jì)算trp2和his2之間的重組值時(shí),685個(gè)trp2- his2-是與供體 trp2+ his2+這2個(gè)基因之間未發(fā)生交換的細(xì)胞(x236。jūn)的轉(zhuǎn)導(dǎo): 轉(zhuǎn)導(dǎo)就是以病毒作為載體把遺傳信息從一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞傳到另一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞。,普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo),在噬菌體的裂解周期接近完成時(shí),病毒DNA被包進(jìn)蛋白質(zhì)外殼。nb225。兩個(gè)基因同在一起轉(zhuǎn)導(dǎo)就是共轉(zhuǎn)導(dǎo)(cotranduction)。,第五十六頁,共六十八頁。n)圖上順序和相對(duì)距離是:,共轉(zhuǎn)導(dǎo)率越高說明兩基因(jīyīn)靠得越近,反之,越遠(yuǎn),第六十頁,共六十八頁。 例:λ噬菌體。 在產(chǎn)生λdgal+ 的宿主細(xì)胞中,λdgal+ 能復(fù)制,因?yàn)樗?suǒyǒu)的λ基因仍然存在:一些在噬菌體染色體上,另一些在宿主染色體上。野生型λ有一套完整的基因組可用于病毒的復(fù)制,所以它控制自己和λdgal+ 的切離和復(fù)制,這里野生型病毒作為一個(gè)helper phage。,本章(běn zhānɡ)要求,掌握 相關(guān)的中英文遺傳學(xué)名詞和術(shù)語 細(xì)菌遺傳物質(zhì)的傳遞規(guī)律 細(xì)菌染色體作圖的方法 了解 細(xì)菌基因組的特點(diǎn) 細(xì)菌同源重組的分子(fēnzǐ)機(jī)制,第六十六頁,共六十八頁。jūn)的細(xì)胞和基因組(掌握)。,。③ 殺死Hfr 將不同接合時(shí)間的細(xì)菌(x236。w224。這種新的溶菌液叫做高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)(high frequency transduction, HFT)溶菌液。,第六十四頁,共六十八頁。該att λ附著點(diǎn)一邊是gal+,另一邊是bio+基因。y224。,轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo)作圖例子,用E.coli trpA+supC+pyrF+供體細(xì)胞和trpA-sup C-pyrF-作為受體由P1噬菌體媒介轉(zhuǎn)導(dǎo)(zhuǎn dǎo)進(jìn)行三因子轉(zhuǎn)導(dǎo)雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果:,問:它們(tā men)的基因順序?共轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率?,第五十八頁,共六十八頁。 A . 兩因子轉(zhuǎn)導(dǎo)(twofactor tranduction) 計(jì)算方法與共轉(zhuǎn)化計(jì)算方法類似 B. 三因子轉(zhuǎn)導(dǎo)(threefactor tranduction),第五十五頁,共六十八頁。它感染細(xì)菌細(xì)胞,并將其內(nèi)含物-細(xì)菌的DNA片斷注入其中。 他們發(fā)現(xiàn)當(dāng)一個(gè)非溶源性的細(xì)菌細(xì)胞(供體)被 P1裂解時(shí),細(xì)菌的染色體DNA斷裂成一些片段,接著在細(xì)菌細(xì)胞中合成了噬菌體的外殼蛋白。,第四十九頁,共六十八頁。,供體DNA片段(pi224。 結(jié)果表明沒有p和o的共轉(zhuǎn)化,說明基因順序肯定是p-q-o,第四十四頁,共六十八頁。)) 問 b位點(diǎn)與a位點(diǎn)共轉(zhuǎn)化的頻率是多少?,第四十三頁,共六十八頁。 相距很遠(yuǎn)的二個(gè)基因很難同時(shí)存在于一個(gè)DNA片段中,若兩個(gè)基因的二個(gè)片段同時(shí)進(jìn)入受體,一般不能同時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)化的,按照(224。,轉(zhuǎn)化過程可以分為幾個(gè)步驟: 雙鏈DNA分子和細(xì)胞表面感受位點(diǎn)可逆性的結(jié)合。jūn)的轉(zhuǎn)化作圖,細(xì)菌的轉(zhuǎn)化: DNA直接轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞的過程。這種接合重組作圖在短距離內(nèi)是有效的。 所以,它們的重組率,也可代表基因間的距離,RF,第三十七頁,共六十八頁。n)之一,產(chǎn)生重組子, 但不能生長(zhǎng),因?yàn)槭窍?
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