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18全國艾滋病檢測技術規(guī)范要點-wenkub.com

2025-02-15 23:14 本頁面
   

【正文】 2023年 3月 7日星期二 7時 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1一個人即使已登上頂峰,也仍要自強不息。勝人者有力,自勝者強。 , March 7, 2023 ? 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 。 :00:5619:00Mar237Mar23 ? 1世間成事,不求其絕對圓滿,留一份不足,可得無限完美。 2023年 3月 7日星期二 7時 0分 56秒 19:00:567 March 2023 ? 1做前,能夠環(huán)視四周;做時,你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 :00:5619:00:56March 7, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā),舊國見青山。 , March 7, 2023 ? 雨中黃葉樹,燈下白頭人。 ④職業(yè)暴露安全藥品由國家免費抗病毒治療藥品庫統(tǒng)一調(diào)配。每年 1月 10日和 7月 10日前,省疾控中心匯總本省職業(yè)暴露情況,填寫“艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表”(附表 8),匯總后報至本省(直轄市、自治區(qū))衛(wèi)生廳(局),抄報中國疾控中心性艾中心。不采取暴露后預防用藥者,也要定期檢測 HIV抗體,檢測時間同前。暴露后 1年內(nèi)要定期監(jiān)測 HIV抗體,即分別在暴露后 4周、 8周、12周、 6個月監(jiān)測。 ③監(jiān)測暴露源:如果暴露源沒有陽性或陰性的血清學化驗結(jié)果應立即檢測,最好做快速試驗,因其結(jié)果可在幾十分鐘內(nèi)得到。 6) 登記、監(jiān)測、報告與保密 1 建立職業(yè)暴露登記和監(jiān)測制度 ①職業(yè)暴露登記制度:職業(yè)暴露事故的事故發(fā)生單位應建立“艾滋病職業(yè)暴露人員個案登記表”(附表 7),對職業(yè)暴露情況進行登記、保存和上報。 ③在患者可耐受的前提下,給予 4周的 PEP。由于服用 4周 AZT才有一定保護作用,如果無很大的副作用,預防性治療用藥時間應持續(xù) 4周。 ( 2 )強化用藥程序:基本用藥程序加一種蛋白酶抑制劑,茚地那韋( 8 00mg , tid ,飯前 1h 及飯后 2h 服用),均使用常規(guī)治療劑量。 ? ⑤可介紹已發(fā)生職業(yè)暴露的人員到艾滋病防治機構(gòu)進一步咨詢和處理。 ? ②肥皂和清水沖洗傷口或沾污的皮膚。 ? ( 2)艾滋病的職業(yè)暴露后預防: ? 艾滋病的職業(yè)暴露:是指醫(yī)務工作者、實驗室工作人員及有關監(jiān)管人員在從事 HIV/AIDS診斷、治療、護理、預防、檢驗、管理工作過程中,暴露于含有 HIV的血液、體液和實驗室培養(yǎng)液,即暴露于含有 HIV的液體等引起的危害。具體操作可按說明書執(zhí)行。 ? 5.艾滋病實驗室的安全防護和職業(yè)暴露預防 ? ( 1)由于甲醛有致癌作用,不宜用于生物安全柜和實驗室的常規(guī)空氣消毒。如判斷 HIV感染者的臨床合并癥(當 CD4+ T淋巴細胞細胞< 200/?l時,很容易發(fā)生卡氏肺孢子蟲肺炎;當 CD4+ T淋巴細胞 50時,易發(fā)生 CMV感染=。 AIDS是由 HIV引起的一組綜合征 , HIV主要侵犯人 CD4+ T淋巴細胞 , 導致其數(shù)量上的減少和功能缺陷 ,使機體免疫平衡被打破造成免疫功能低下 , 最終導致各種機會感染和腫瘤 。 表 3 BD公司應用單平臺一步法建立的正常參考值范圍表 項 目 單 位 參考正常值范圍 CD3+/ CD45+ % 56%?85% CD3+絕對數(shù) 個 /μ l 1027?2086 CD3++ CD8+/ CD45+ % 15%?34% CD3++ CD8+絕對數(shù) 個 /μ l 323?836 CD3++ CD4+/ CD45+ % 30%?54% CD3++ CD4+絕對數(shù) 個 /μ l 706?1125 CD4+/ CD8+比值 1?2* ? ( 6) 檢測 CD4+、 CD8+ T淋巴細胞的意義 ? T淋巴細胞是機體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的一群細胞 。 ? 4) 為檢測免疫亞群而取血的同時 , 用該血樣作自動測定全血細胞 ( CBC) 計數(shù)白細胞 ( WBC) 及分類測定 ,報告淋巴細胞亞群絕對數(shù)值 。 同樣地 , CD8+ T細胞是 Tsuppressor/cytotoxic細胞 , 為 CD3+ 和 CD8+ 雙陽性的細胞 。 ( 3)方法 ? ( 5) 結(jié)果報告 ? 1) 按照實驗結(jié)果填寫 CD4+ 和 CD8+ T淋巴細胞檢測報告單 , 檢測人員簽字 。 ④ 如果樣品的采集時間已超出 48h, 不可檢測 。 如有以下現(xiàn)象發(fā)生 , 采取正確的方法處理: ① 如果樣品較熱或較冷 , 但沒有明顯的溶血或結(jié)冰 ,可以處理樣品 , 但要在工作表的報告上注明溫度條件 。 ?②不可檢測溶血或結(jié)冰的樣品。 ?④應選擇特定的方案,并且安排合適的時間收集和運輸樣品。這種方法有助樣品的保存。 ?對所有樣品編號,并寫明日期和收集時間。 ①當收集兒童樣品時,采用兒童用注射器、小試管。 ) 。 ? ② 流式細胞儀檢測區(qū):流式細胞儀 ? 3) 功能分區(qū) ? 實驗室原則上應分為樣品處理區(qū)和流式細胞儀檢測區(qū) ,各區(qū)的功能是: ? ① 樣品處理區(qū)應達到生物安全 Ⅱ 級 ( BSL2)實驗室要求 , 用于樣品處理 、 流式檢測樣品制備 。> 100,000c/ml為 %。30, 000c/ml時則為 80%。 病毒載量與 6年發(fā)病率的關系為:500c/ml時 %。 這不單是經(jīng)濟上的原因 , 更重要的是由于抗病毒藥物的副作用和療效原因 。 ? 3) 病程監(jiān)控 ? 根據(jù) HIV感染發(fā)生后病毒載量具有一定的變化規(guī)律 , 并且這種變化與疾病的進程有著密切的相關性 。 這個高峰在免疫系統(tǒng)產(chǎn)生反應后 , 尤其是在細胞免疫出現(xiàn)后開始下降 。 ? 另外 , 許多 AIDS病人 /HIV感染者在接受抗病毒治療后其病毒載量可降至非常低的水平 , 還有少數(shù) HIV感染者在感染后長期處于病毒水平非常低的狀態(tài) , 進行 RNA測定時往往測不出來 。 4 小時之內(nèi)分離血漿,運輸前在 20 ℃或 70 ℃冷凍。 能夠使用組織或體液樣品,例如陰道分泌物。 已獲 FDA 批準。 ? ( 3) 方法和試劑 ? 1) 方法 ? 常用的 HIV RNA定量測定方法有 : ? 逆轉(zhuǎn)錄 PCR試驗 ( RTPCR) 。 ? ③ 擴增區(qū):核酸擴增設備 、 冰箱 、 離心機 、 加樣器 、 廢棄物容器 。 ? ( 3) 設施和設備 ? 1) 根據(jù)檢測項目配備相應的設施和設備 。 ? ② 每個實驗人員 、 實驗組分別使用各自的試劑及耗材 。 ? ④ 擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定 、 結(jié)果分析 、登記及報告 。 前兩區(qū)為擴增前區(qū) ,后兩區(qū)為擴增后區(qū) 。 陽性 不確定 樣品 EL I SA 1 陽性 兩種均陽性 確認試驗 陰性 二種 S / CO 均≥ 6 一種或二種 S / C O 1 ~ 5 . 9 陽性 陰性或可疑 高特異性篩查試劑 提供陽性咨詢 出具“ H I V 抗體陽性”報告 提供咨詢 隨訪 陰性 提供陰性咨詢 出具“ H I V 抗體陰性”報告 EL I SA 1+ EL I SA 2 一陰一陽 兩種均陰性 圖 4 替代策略 Ⅱ (高危人群 VCT檢測策略)檢測流程 ? 3) 替代策略 Ⅲ ( 高流行地區(qū)一般人群及其它地區(qū)各類人群 VCT檢測策略 , 圖 5) ? 檢測程序及結(jié)果報告: ? ① 先用一種高敏感性篩查試劑檢測 , 出現(xiàn)陰性反應報告 HIV抗體陰性;出現(xiàn)陽性則用第二種篩查試劑 ( 高特異性 ) 復檢 。 使用該策略判斷結(jié)果 , 陽性報告須由確認中心實驗室和確認實驗室或以上實驗室認可的篩查實驗室出具 。 出現(xiàn)陽性反應則用兩種不同原理或不同廠家的試劑復測 ( 其中包括進口第三代 ELISA試劑 ) 。 ? ④ 污染的臺面和器具: 40%甲醛水溶液 , 也可以用過氧化氫或過氧乙酸 。 ? HIV常用的化學消毒方法: ? HIV最常用的化學消毒劑是 %次氯酸鈉 、 70%乙醇和 2%戊二醛 , 保持 10?30 min。 ( 3)廢棄物處置和消毒 ? 1) 廢棄物處置: ? ① 廢棄物處置應符合 《 實驗室生物安全通用要求 》( GB 194892023) 。 ? ② 應設有專門儲存陽性血清 、 質(zhì)控品的低溫冰柜和 /或血清庫毒種庫 , 并應上鎖 , 專人管理 。 ? ③ 保密制度納入年度考核 , 發(fā)現(xiàn)問題及時處理并根據(jù)情況修訂保密制度 。 實驗室工作人員從事工作前必須進行 HIV抗體和乙肝 、 丙肝等肝炎病毒標記物的檢測;注射乙肝疫苗;每半年 1年進行 1次 HIV抗體檢測 , 并保留血清樣品 。 在安排工作區(qū)域時 , 要根據(jù)人員的工作種類和所涉及的生物材料 , 對實驗室環(huán)境做好安全檢查 。 所有工作人員必須經(jīng)過 HIV檢測技術和省級以上艾滋病實驗室安全培訓 , 包括上崗培訓和復訓 , 并接受實驗室管理人員的監(jiān)督 。 建立意外事故的登記和報告制度 。 ? ( 2) 實驗室管理要求 ? 1) 建立安全制度 ? ① 實驗室的儀器設備 、 建筑和設施的安全性應符合 《 實驗室生物安全通用要求 》 GB 194892023和本 《 規(guī)范 》 要求 。 嬰幼兒體內(nèi)從母親得到的 HIV抗體持續(xù)存在時間最長不超過 18個月 。 ? HIV1 P24抗原陽性僅作為 HIV感染窗口期的輔助診斷依據(jù) , 不能據(jù)此確診 。 ? ( 2) HIV P24抗原檢測方法 ? P24抗原的檢測通常是采用 ELISA夾心法 , 已知抗體包被固相反應板孔底 , 加入待測血清 , 若血清中含有 P24抗原則與包被抗體形成抗原 抗體復合物 , 再加入酶 ( HRP) 標記的 HIV1抗體與抗原結(jié)合 , 加底物顯色 , 在酶標儀上讀結(jié)果 。 ? ( 1) 適用范圍: ? HIV1抗體不確定或窗口期的輔助診斷 。 ? 2) 必要時可做 HIV1 P24抗原或 HIV核酸測定 , 但檢測結(jié)果只能作為輔助診斷依據(jù) , 確認報告要依據(jù)血清學隨訪結(jié)果 。 ? 符合 HIV抗體不確定判斷標準 , 報告 “ HIV抗體不確定 ( 177。 ? 符合 HIV1抗體陽性判斷標準 , 報告 “ HIV1抗體陽性 ( +) ” , 并按規(guī)定做好檢測后咨詢 、 保密和疫情報告工作 。 如兩種試劑復測均呈陰性反應 , 則報告 HIV抗體陰性;如均呈陽性反應 , 或一陰一陽 , 需送艾滋病確認實驗室進行確認 。 ? PC1NC均值 ≥ , PC2NC均值 ≥ ? ③ Cut off值 = 陰性對照均值 + ? 小于 Cut off為陰性 , 大于或等于 Cut off為陽性 ? 4) 報告: ? 對 HIV抗體篩查試驗 , 呈陰性反應者可出具 “ HIV抗體陰性 ” 報告 ( 可用附表 1) ; ? 對初篩試驗呈陽性反應者不能出陽性報告 , 可出具 “ HIV抗體待復查 ” 報告 ( 附表 1) 。 ? 備好試劑盒 、 待檢樣品和外部對照質(zhì)控血清后 , 按試劑盒說明書以及質(zhì)控和安全防護要求進行篩查檢測 。 主要適用于靜脈
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