生命科學(xué)與農(nóng)業(yè)-wenkub.com
2024-12-27 15:03 本頁面
【正文】 PCR檢驗外源基因的整和 ? 在轉(zhuǎn)基因個體的檢測中 ,通過設(shè)計外源基因兩端的特異引物 ,采用 PCR基因可以使外源基因得到大量擴增 ,然后通過瓊脂糖凝膠電泳檢測特意擴增帶的有無 ,從而判斷外源基因是否整合到受體植物的基因組 。 目前最常用的報告基因 223。 ? 它應(yīng)用不依賴于外界選擇壓力的存在 ， 這一點也是它與選擇基因的區(qū)別之處 。轉(zhuǎn)化篩選細(xì)胞的方法主要有兩種： 選擇基因的特點 ? 一是根據(jù)選擇基因的特點在篩選選擇培養(yǎng)基中加入能抑制非轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長的有毒物質(zhì) . ? 如抗生素 、 除草劑等 ， 選擇基因通常為一種解毒基因 ， 可以解除培養(yǎng)基中有害物質(zhì)對細(xì)胞生長的抑制作用 ， 這樣只有轉(zhuǎn)化細(xì)胞才能生長繁殖； ? 另一種方式是 ， 受體細(xì)胞為營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞 ， 在選擇性培養(yǎng)基中不能生殖 ， 而選擇培養(yǎng)基可以補償這種缺陷 ， 使轉(zhuǎn)化細(xì)胞在選擇性培養(yǎng)基上正常生長 。 農(nóng)桿菌介導(dǎo) :存在宿主范圍的局限性 。 Ti質(zhì)粒 ? Ti質(zhì)粒是植物基因工程的一種天然載體 ， 但野生型 Ti質(zhì)粒直接作為植物基因工程載體存在著許多障礙： ? （ 1） 質(zhì)粒過大 ， 造作困難 ? （ 2） 大型的 Ti質(zhì)粒有多個酶切位點 ? （ 3） 植物激素類的影響 ? （ 4） Ti質(zhì)粒中存在不起作用的序列 ? （ 5） Ti質(zhì)粒的局限性 ? 因此 ， 必須對野生型的 Ti 質(zhì)粒進(jìn)行改造后才能作為轉(zhuǎn)基因植物的載體 。 冠癭瘤 上： 電鏡下的根癌農(nóng)桿菌 下： 冠癭瘤 冠癭瘤的一般生物學(xué)特性 ? 45℃ 殺死侵染植物的根癌農(nóng)桿菌 ， 植物組織仍然能形成癌 。 人們最感興趣的癭是冠癭瘤 。 ? 在根癌農(nóng)桿菌內(nèi)有一個大的致瘤質(zhì)粒 ，簡稱 Ti質(zhì)粒 。 ５激光微束介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)化 ?原理： 將激光引入光學(xué)顯微鏡聚焦成微米級的微束 照射培養(yǎng)細(xì)胞 ， 在細(xì)胞膜上形成能自我愈合的小孔 ， 使加入細(xì)胞培養(yǎng)基里的外源 DNA流入細(xì)胞 ， 實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移 。 3 電激法介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)化 ? 原理： 利用高壓電脈沖作用 ， 在原生質(zhì)體膜上“ 電激穿孔 “ ， 形成可逆的瞬間通道 ,從而促進(jìn)外源 DNA進(jìn)入原生質(zhì)體 。 ? 案例： 轉(zhuǎn)基因煙草 2 脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)化 ? 原理： 利用脂類化學(xué)物質(zhì)包裹外源 DNA成球體 , 通過植物原生質(zhì)體的吞噬或融合作用把包含外源 DNA的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞 。 國內(nèi)轉(zhuǎn)基因作物發(fā)展現(xiàn)狀 ? 在某些領(lǐng)域達(dá)到了國際先進(jìn)水平 。 ? 轉(zhuǎn)基因植物可作為一種生物反應(yīng)器 ， 生產(chǎn)藥用蛋白和植物次生代謝產(chǎn)物 ， 或生產(chǎn)某些有機化合物 。如今培育出轉(zhuǎn)基因玉米，品質(zhì)更好，產(chǎn)量更高 轉(zhuǎn)基因牽?；? ? 我國科學(xué)工作者 ， 用轉(zhuǎn)基因技術(shù) ，可以轉(zhuǎn)變矮牽?；ǖ幕ㄉ?， 使矮牽?；ǖ幕ㄉ迂S富多彩 。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，培育出來的油菜籽，可以大大地提高它的出油率。 轉(zhuǎn)基因番茄 轉(zhuǎn)基因甜椒 ? 甜椒在栽培的過程中 ， 容易受病毒的感染 。 ? 在成熟過程中 ， 乙烯是非常重要的 。 抗凍蛋白基因 ? 抗凍蛋白 （ antifreeze protein， AFP） 是指具有降低冰點和減少冰晶生長速度的蛋白質(zhì) ， 抗凍蛋白基因可以作為轉(zhuǎn)基因植物的目的基因 。 ? 已成功的導(dǎo)入煙草和萵苣 。 這類抗蟲基因已經(jīng)被轉(zhuǎn)到水稻 、 油菜 、 白薯 、 蘋果 、 楊樹等植物 。 降低植物油中的飽和脂肪酸的含量 ? ① 增加 3酮酯酰 ACP合成酶 Ⅱ 的水平 ， 因為這種酶是植物脂肪酸合成過程中的一種極其重要的關(guān)鍵酶 ， 它負(fù)責(zé)不飽和脂肪酸的形成； ? ② 減少酯 ACP硫酯酶的活性 ， 這種酶是植物脂肪酸合成過程中的另一種極其重要的關(guān)鍵酶 ， 它負(fù)責(zé)飽和脂肪酸的形成； ? ③ 增加具有把飽和脂肪酸轉(zhuǎn)變?yōu)椴伙柡椭舅峁δ艿哪そY(jié)合脫飽和酶水平 。 ? 目前最新的育種技術(shù)是有 “ 白色革命 ” 之稱的分子育種技術(shù) 。 種植面積發(fā)展到 3億多畝 ， 平均畝產(chǎn) 500公斤以上 ， 最高畝產(chǎn)達(dá) 1000公斤 。 ? 因為生產(chǎn)過程非常嚴(yán)格 ， 分子操作常在白色的小試管中而且操作者穿著白色的衣服 ， 所以形象地稱之為 “ 白色農(nóng)業(yè) ” 。 人們已不懷疑 ， 蔚藍(lán)無際的海洋將是 21世紀(jì)人類的第二糧倉 。 ? 綠色農(nóng)業(yè)的發(fā)展方向是利用生態(tài)農(nóng)業(yè)技術(shù)和可持續(xù)發(fā)展技術(shù)發(fā)展生產(chǎn) ， 實現(xiàn)高效的物質(zhì)能量循環(huán)和生產(chǎn)資料的加工和轉(zhuǎn)換 ， 保持環(huán)境 、 生態(tài)與經(jīng)濟(jì)的協(xié)調(diào)發(fā)展 。徹底改變了傳統(tǒng)經(jīng)驗農(nóng)業(yè)技術(shù)長期停滯不變的局面 。 ? 其特點是以機械化 、 水利化 、 化學(xué)化和電氣化來進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)；直接和間接依賴石化能源；農(nóng)業(yè)勞動生產(chǎn)率大大提高；土地生產(chǎn)率和農(nóng)產(chǎn)品商品率提高 （ 在美國 ， 1％ 的人種糧 ） 。 ? 注意到了保持地力常新和順應(yīng)自然規(guī)律 、 天時地利來進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 。 因此 ， 人均 400公斤僅可以作為國家調(diào)控糧食安全的基本參考線； ? ⑤ 貧困人口糧食安全的最低要求： 保證溫飽 （ 人體最低熱量攝入標(biāo)準(zhǔn)為每人每天 2100大卡 ， 其中糧食每人每年 220公斤 ） 。 糧食年末庫存量保持在 1000～ 1250億公斤； ? ② 糧食產(chǎn)量波動系數(shù)： 糧食產(chǎn)量年波動幅度應(yīng)穩(wěn)定在 2%左右 。 糧食安全的本質(zhì) ? 糧食安全是指一個國家滿足糧食需求以及抵御可能出現(xiàn)的各種不測事件的能力 。 ? 能源危機 、 人口增長 、 環(huán)境污染嚴(yán)重和自然災(zāi)害等一系列復(fù)雜問題的負(fù)面影響波及到全球各個角落 。
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