臨床微生物檢測的基因同源性分析范文-wenkub.com
2025-07-17 10:08 本頁面
【正文】 (四)適于單向電場電泳難以分辨的DNA物理圖譜的制作。 (三)探測細(xì)胞染色體上百萬堿基對以上的基因組DNA的缺失。 (二)人類染色體內(nèi)切酶物理圖譜分析，并將大片段DNA分子直接克隆，是人類基因組序列測定工程中有效的方法之一。 (一)分離原核生物的染色體。 四、PFGE技術(shù)的應(yīng)用電泳緩沖液為0．5XTBE，也可用TAE緩沖液。 (一)正交交變電場凝膠電泳二、PFGE分類當(dāng)DNA分子變形轉(zhuǎn)向所需時間與脈沖時間較接近時，遷移率與DNA分子量成反比。 PFGE施加在凝膠上至少有兩個電場方向，時間與電流大小也交替改變，使得DNA分子能夠不斷地調(diào)整泳動方向，以適應(yīng)凝膠中不規(guī)則的孔隙變化，達(dá)到分離大分子線性DNA的目的，最大分辨率為5000kb大小的線性DNA分子。普通的單方向恒定電場給DNA分子的泳動動力方向確定且不發(fā)生變化，所以嚴(yán)重影響凝膠電泳分離大分子量DNA片段的效果。 然而，醫(yī)院感染病原菌存在廣泛而迅速的變異，這些變異使得菌株的基因同源性分析資料的解釋變得錯綜復(fù)雜。缺點：序列比對，得出鑒定結(jié)果。在細(xì)菌界中，核糖體的某些學(xué)列高度保守，人們可以設(shè)計幾乎從任何細(xì)菌都可以擴(kuò)增到核糖體序列的引物。determination）原理：軟件。software實驗方法的評價：當(dāng)兩個序列的距離足夠近時，那么位點之間的DNA片段將被有效的復(fù)制。extragenic實驗流程：，抽提基因組DNA；；；；片段連接作為擴(kuò)增反應(yīng)的模板，用含有選擇性堿基的引物對模板DNA由于不同物種的基因組DNAAFLPPCR）原理：Fragment實驗方法的評價：withc1.使重復(fù)序列之間的區(qū)域得以擴(kuò)增。DNA優(yōu)勢：實驗方法的評價：因此凡是可以引起酶切位點變異的突變?nèi)琰c突變（新產(chǎn)生和去除酶切位點）和一段DNA的重新組織（如插入和缺失造成酶切位點間的長度發(fā)生變化）等均可導(dǎo)致RFLP的產(chǎn)生。Fragment用大腸桿菌rRNA印記、放射性自顯影。實驗流程：缺點：腸桿菌和葡萄球菌基因分型的金標(biāo)準(zhǔn)。實驗流程：；（主要是XbaI）；(脈沖場；、凝膠成像；。Gel缺點：實驗方法的評價：恒定的電場瓊脂糖電泳，可以根據(jù)分子質(zhì)量的大小將這些DNA片段分開，然后通過EB染色并在紫外燈下觀察其圖譜。Endo
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