質(zhì)粒的提取與純化ppt課件-wenkub.com
2025-04-30 18:24 本頁面
【正文】 實驗結(jié)果及討論 ? 堿法提取質(zhì)粒是實驗室最常用的質(zhì)粒提取方法之一，提取量較大，便于操作。 ? 11. 向 Spin column 內(nèi)加 20μl Elution Buffer、去離子水或 TE 溶液，并于室溫靜置 1 分鐘。 ? 8. 向 Spin column 內(nèi)加 650μl Wash Buffer，于 12，000g 離心 30～ 60 秒，并棄去接液管內(nèi)液體。 ? 6. 于 13,000rpm離心 10 分鐘。 ? 不要劇烈振動，以防止基因組 DNA 被剪切。但勿過量，以免影響提取質(zhì)粒的質(zhì)量。 ? 11. 每管中加入 25μL無菌水 1μL RNase， 37℃ 溶解質(zhì)粒 DNA。 ? 7. 上清液中加入預(yù)冷的等體積異丙醇， 20℃ 沉淀 20~30 min。 ? 4. 加入 300μL SolutionIII,混勻（注意動作輕） ，冰箱 3 ℃ 放置5min。 實驗步驟 質(zhì)粒的提取 ? 1. 用滅菌的牙簽挑取單菌落放入 50ml LB液體培養(yǎng)基（含 Amp mg/ml ）中， 37℃ 振蕩培養(yǎng)過夜。 ? 3. SolutionⅡ (現(xiàn)用現(xiàn)配制 ) mol/L NaOH 1% SDS ? 4. Solution Ⅲ （ 100 ml） 5mol/L KAc 60 ml
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