生物化學(xué)核酸生物化學(xué)-wenkub.com
2025-01-15 02:15 本頁面
【正文】 ? 核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定、 研究技術(shù) 、核酸的分離純化 . 重點(diǎn) 中、英文專業(yè)詞匯： ? nucleic acid核酸； purine嘌呤；deoxyribonucleic acid(DNA)脫氧核糖核酸；pyrimidine嘧啶； ribonucleic acid(RNA)核糖核酸； adenine(A)腺嘌呤； base堿基； guanine(G)鳥嘌呤； nudeotide核苷酸； cytosine(C)胞嘧啶；nucleoside核苷； uracil(U)尿嘧啶； thymine(T)胸腺嘧啶； base pair堿基對(duì)； phosphodiester linkage磷酸二酯鍵； nucleosome核小體；ribosome核糖體； hybridization雜交； geic code遺傳密碼； double helix雙螺旋； supercoil超螺旋； probe探針； ribosomal RNA(rRNA)核糖體 RNA； transfer RNA(tRNA)轉(zhuǎn)運(yùn) RNA； messenger RNA(mRNA)信使 RNA ? 1． DNA的 Tm值較高是由于下列哪組核苷酸含量較高所致： ? A． G+A ? B． C+G ? C． A+T ? D． C+T ? E． A+C ? 2．絕大多數(shù)真核生物 mRNA5′ 端有 ? A． PolyA ? B．終止密碼 ? C．帽子結(jié)構(gòu) ? D．啟動(dòng)子 ? E． SD序列 ? 3． hnRNA是下列哪種 RNA的前體？ ? A． tRNA ? B． rRNA ? C． mRNA ? D． snRNA ? E． snoRNA ? 4．核酸對(duì)紫外線的最大吸收峰在哪一波長(zhǎng)附近 ? A． 280nm ? B． 260nm ? C． 200nm ? D． 340nm ? E． 220nm ? 5．下列哪種堿基只存在于 RNA而不存在于 DNA： ? A．尿嘧啶 ? B．腺嘌呤 ? C．胞嘧啶 ? D．鳥嘌呤 ? E．胸腺嘧啶 ? 6． DNA變性是指： ? A．分子中磷酸二酯鍵斷裂 ? B．多核苷酸鏈解聚 ? C． DNA分子由超螺旋 → 雙螺旋 ? D．互補(bǔ)堿基之間氫鍵斷裂 ? E． DNA分子中堿基丟失 作業(yè) 比較 DNA、 RNA在化學(xué)組成、分子結(jié)構(gòu)和生理功能上的特點(diǎn)。 ? 根據(jù) sanger測(cè)序法，現(xiàn)在已經(jīng)有各種 DNA自動(dòng)測(cè)序儀， DNA測(cè)序速度大大加快 HGP得以提前完成 DNA酶法測(cè)序 DNA酶法測(cè)序 平行進(jìn)行四組反應(yīng)，每組反應(yīng)均使用 相同的模板 ，相同的引物 以及 四種脫氧核苷酸 ；并在四組反應(yīng)中各加入適量的 四種之一的雙脫氧核苷酸 ，使其隨機(jī)地接入 DNA鏈中，使鏈合成終止，產(chǎn)生相應(yīng)的四組具有特定長(zhǎng)度的、不同長(zhǎng)短的 DNA鏈。 4）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ polymeerase chain reaction, PCR) ? 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （ PCR） ?每一輪聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可使目的基因片段增加一倍 ?30輪循環(huán)可獲得 —— 230（ 109)個(gè)基因片段 應(yīng)用： ? 廣泛用于克隆、測(cè)序、產(chǎn)生特異突變、醫(yī)學(xué)診斷和法醫(yī) . 核酸分子的核苷酸序列分析是以 純品核酸 為材料，經(jīng)水解，測(cè)定核苷酸組成及比例。 核酸的性質(zhì) DNA變性與復(fù)性 減色效應(yīng) ?當(dāng)變性的 DNA經(jīng)復(fù)性又重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)時(shí)，其溶液的 A260值減小，最多可減小至變性前的 A260值，這種現(xiàn)象稱為減色效應(yīng)。 2）介質(zhì)中的離子強(qiáng)度： 離子強(qiáng)度低，Tm低，在純水中 , DNA 在室溫下即可變性。 核酸的性質(zhì) 增色效應(yīng) ? DNA變性后，由于雙螺旋解體，藏于螺旋內(nèi)部的堿基暴露出來，使 DNA的 A260值升高，這種現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)。 1） DNA： OD260/OD280 ≈ 純品 2） RNA： OD260/OD280 ≈ 純品 在純化 DNA 時(shí) ,通常用 A260/A280= 作為純度標(biāo)準(zhǔn) ,若大于此值 ,表示有 RNA 污染 。 核酸的性質(zhì) ? 一個(gè)單鏈 DNA和一個(gè)單鏈 RNA分子量相同，試述可以用幾種方法將它們區(qū)分開？ ？ 轉(zhuǎn)基因有兩派 反對(duì)派：反對(duì)派的道理在于轉(zhuǎn)基因抗病抗蟲的功能來自于毒蛋白基因，蟲吃了是要死的，人吃了怎么辦？ 贊成派：昆蟲的死亡是因?yàn)闅饪组]塞了，但這跟人的消化道完全是兩碼事。 – 限制性核酸內(nèi)切酶 (restriction endonucleases)：能夠識(shí)別 DNA分子的特定核苷酸序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍斷開 DNA雙鏈的一類核酸酶 DNA限制性內(nèi)切酶 細(xì)菌的限制 修飾系統(tǒng)：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）特異性強(qiáng)，可在 DNA特異位點(diǎn)切開； 細(xì)菌堿基修飾 ： 概念： 在 DNA特定短堿基序列上產(chǎn)生某專一性修飾，使得內(nèi)切酶無法識(shí)別而不能斷裂。端或 3180。在 RNA水解時(shí)， 2′ OH首先進(jìn)攻磷酸基，在斷開磷酯鍵的同時(shí)形成環(huán)狀磷酸二酯，再在堿的作用形成水解產(chǎn)物。 ? 核酸分子中的磷酸二酯鍵可在酸、堿性和 酶條件下水解切斷 ,結(jié)果是多核苷酸鏈被打斷 ,核酸被降解 . 酸解 酸可以使 DNA和 RNA降解，酸對(duì)核酸的作用因酸的濃度、溫度和作用時(shí)間的不同而不同。 核酸的溶解性質(zhì) ? DNA和 RNA都微溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有機(jī)溶劑。 RNA 五、核酸的性質(zhì) （ 一 ） 一般的理化性質(zhì) ? 為兩性電解質(zhì)，通常表現(xiàn)為酸性。
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