【正文】 ? 種類： 抗代謝藥物 抗生素 化學(xué)治療 劑 二氫蝶啶 + 對氨基苯甲酸 二氫葉酸 四氫葉酸 輔酶 F 磺胺藥 核酸合成 二氫葉酸合成酶 二氫葉酸還原酶 磺胺藥作用機(jī)理： ?細(xì)菌需要利用對氨基苯甲酸合成生長所需的葉酸： ?磺胺的選擇毒力：直接攝取現(xiàn)成 THFA者，對磺胺不敏感。 ?表面消毒劑的相對殺菌強(qiáng)度 ——石炭酸系數(shù) （ .） 在一定時(shí)間內(nèi)，被試藥劑殺死全部供試菌的最高稀釋度與達(dá)到同效的石炭酸最高稀釋度之比。 如酒精等； ② 破壞菌體的酶系統(tǒng) ， 影響菌體代謝 。 ?消毒劑 :對一切活細(xì)胞都有毒性 ， 不能用作活細(xì)胞內(nèi)或機(jī)體內(nèi)治療用的化學(xué)藥劑 。 半致死量：評定某藥物毒性強(qiáng)弱的指標(biāo) 。 ? 多數(shù)細(xì)菌 、 酵母菌 、 霉菌的營養(yǎng)細(xì)胞和病毒 ， 在50～ 65 ℃ 10min即可致死 。 ? 優(yōu)點(diǎn)： （ 1）可以減少培養(yǎng)基中的有效成分因長時(shí)間加熱而遭受的破壞； （ 2）所用時(shí)間短，提高發(fā)酵罐的利用率； （ 3）提高鍋爐使用效率； （ 4）適宜工業(yè)化生產(chǎn) 。 例如：生理鹽水、營養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基用 121 ℃ 。 ?方法： 121℃ （ 1kg/cm2或 15磅 /英寸 2）維持 15～ 20min。 （ 3）間歇滅菌法（分段滅菌法、丁達(dá)爾滅菌法） 過程如下： ? 80 ~ 100℃ 下蒸煮 15~ 60min（ 殺滅其中所有的微生物營養(yǎng)體 ） ； ? 室溫或 37℃ 保溫過夜 （ 誘使其中殘存的芽孢萌發(fā) ） ； ? 第二天再以同法蒸煮和保溫過夜； ? 如此連續(xù)重復(fù) 3天 ， 即可在較低的溫度下達(dá)到徹底滅菌的效果 。 ? 同溫同壓和相同作用時(shí)間下濕熱比干熱滅菌更好。 簡單 、 徹底 ， 但對被滅菌物品的破壞極大 。 ? 防腐劑：苯甲酸、山梨酸、脫氫醋酸等。 ? 干燥：采用曬干或紅外線干燥保藏糧食、食品等，或在密封條件下用吸濕劑也可達(dá)到防霉作用。 利用具有高度選擇毒力的化學(xué)物質(zhì)抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖 ， 以達(dá)到治療該傳染病的一種措施 。滅菌還可分殺菌（菌體雖死、形體尚存）、溶菌（菌體被殺死后，細(xì)胞自溶、裂解消失）。 ? 保證微生物獲得適宜的溫度和良好的 O2條件。 ?微生物胞內(nèi)酶的最適 pH值一般為中性 ， 胞外酶的最適 pH值接近環(huán)境 pH值 。 例如：黑曲霉 pH值 =2～ 3時(shí) ， 產(chǎn)物以檸檬酸為主 ， 只產(chǎn)少量草酸 。 ?微生物生長的 pH值三基點(diǎn)： 各種微生物都有其生長的最低、最適和最高 pH值。 ?改變酶活 、 酶促反應(yīng)的速率及代謝途徑：如：酵母菌在 ～ 5產(chǎn)乙醇 ， 在 、酸 。 生物體中超氧陰離子的形成與去除 1 2 SOD 好氧生物 和耐氧細(xì)菌 過氧化氫酶 好氧生物 過氧化物酶 NADH2 NAD 耐氧菌 各類菌所含對氧解毒酶 專性好氧菌 SOD，過氧化氫酶 兼性厭氧菌 SOD， 過氧化氫酶 專性厭氧菌 二種酶均無 微好氧菌 少量 SOD 耐氧菌 SOD， 過氧化物酶 在培養(yǎng)不同類型的微生物時(shí) ， 要采用相應(yīng)的措施 : ?培養(yǎng)好氧微生物：需振蕩或通氣 ， 保證充足的氧氣 。 厭氧菌的氧毒害機(jī)制 —— SOD學(xué)說： H2O + O2 2 O2 五類與氧關(guān)系不同的微生物在半固體瓊脂 柱中的生長狀態(tài)（模式圖） ?嚴(yán)格厭氧微生物并不是被氣態(tài)的氧所殺死 ， 而是由于不能解除某些氧代謝產(chǎn)物的毒性而死亡 。 細(xì)胞內(nèi)存在 SOD和過氧化物酶 ， 但缺乏過氧化氫酶 。 ? 微好氧菌： 只能較低的氧分壓下才能正常生長 ， 。 根據(jù)微生物與氧的關(guān)系 ,可把它們分為幾種類群 : 專性好氧菌 好氧菌 微好氧菌 兼性厭氧菌 耐氧厭氧菌 厭氧菌 (專性 )厭氧菌 二、氧氣對微生物生長的影響 ? 專性好氧菌：必須在有分子氧的條件下才能生長；細(xì)胞含有超氧物歧化酶 （ SOD） 和過氧化氫酶 。 ? 最適生長溫度 ：某菌分裂代時(shí)最短或 生長速率最高 時(shí)的培養(yǎng)溫度 。 ?影響物質(zhì)的溶解度，對生長有影響。 連續(xù)發(fā)酵的生產(chǎn)時(shí)間受以上因素限制，一般只能維持?jǐn)?shù)月 ~ 1年。 裝置 控制對象 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基流速 生長速率 產(chǎn)物 應(yīng)用范圍 恒濁器 菌體密度（內(nèi)控制） 無限制生長因子 不恒定 最高 大量菌體或與菌體形成相平行的產(chǎn)物 生產(chǎn)為主 恒化器 培養(yǎng)基流速（外控制） 有限制生長因子 恒定 低于最高 不同生長速率的菌體 實(shí)驗(yàn)室為主 恒濁器與恒化器的比較 連續(xù)發(fā)酵 ?將連續(xù)培養(yǎng)用于發(fā)酵，即為連續(xù)發(fā)酵，相對于單批發(fā)酵而言。 ?使用范圍：用于生產(chǎn)大量菌體、生產(chǎn)與菌體生長相平行的某些代謝產(chǎn)物，如乳酸、乙醇等。 絲狀微生物的群體生長曲線 五、微生物的連續(xù)培養(yǎng) ?分批培養(yǎng)：將微生物置于一定容積的定量的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基一次性加入。 ?以菌絲干重作為衡量生長的指標(biāo)，即以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以菌絲干重為縱坐標(biāo)，繪制生長曲線。 （四）衰亡期 特點(diǎn)： （ 1） 細(xì)胞死亡數(shù)增加，死亡數(shù)大大超過新增殖的細(xì)胞數(shù)，群體中的活菌數(shù)目急劇下降，出現(xiàn)“負(fù)生長” （ R＜ 0 ） ； （ 2） 細(xì)胞出現(xiàn)多形態(tài)，畸形或衰退形； （ 3） 因菌體本身產(chǎn)生的 水解 酶及代謝產(chǎn)物的作用，使菌體死亡、自溶等。 （ 4）細(xì)胞內(nèi)開始積聚糖原、異染顆粒和脂肪等內(nèi)含物；芽孢桿菌一般在這時(shí)開始形成芽孢； （ 5）通過復(fù)雜的次生代謝途徑合成各種次生代謝物。 （ 4） 進(jìn)行染色、形態(tài)觀察等 的良好材料 。 ? （ 3）營養(yǎng)物濃度：既影響微生物的生長速率，又影響它的生長總量。 ?細(xì)胞進(jìn)行平衡生長， 菌體大小、形態(tài)、生理特征等比較一致 。 （一） 延滯期 在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短延遲期，措施有 ： ①接種齡： 對數(shù)生長期的菌種接種 ,子代停滯期短；穩(wěn)定期的菌種接種，子代停滯期居中；停滯期或衰亡期菌種接種，子代停滯期長。 ?細(xì)胞形態(tài)變大或增長 。 每隔一定時(shí)間取樣 ， 測菌細(xì)胞數(shù)目 。 （ 2）機(jī)械篩選法：選擇性過濾、梯度離心或膜洗脫法。 二、微生物的個(gè)體生長和群體的同步生長 ? 使用同步培養(yǎng)技術(shù)，即設(shè)法使群體中的所有細(xì)胞盡可能都處于同樣細(xì)胞生長和分裂周期中，然后分析此群體的各種生物化學(xué)特征，從而了解單個(gè)細(xì)胞所發(fā)生的變化。 如何定量二者關(guān)系呢？ 濁度儀 ① 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 ② 測菌液濁度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線得出細(xì)菌數(shù)量