【正文】 與已知抗體類型的血型抗體對應(yīng)的 O 型相應(yīng)抗原陰性紅細胞的反應(yīng)為陰性。 對于抗人球蛋白檢測試劑建議著重對以下分析性能進行研究： ： 提供臨床有意義的血型系統(tǒng)至少 7 種不規(guī)則抗體（ IgG）檢測靈敏度和特異 性的驗證資料，明確所檢出抗體的抗體效價的具體要求，可參照以下要求進行實驗。分析性能評估的實驗方法可以參考國內(nèi)或國際有關(guān)體 外診斷產(chǎn)品性能評估的指導(dǎo)原則進行。 反應(yīng)體系的設(shè)置應(yīng)符合《全國臨床檢驗操作規(guī)程》等公認標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范、指南或標(biāo)準(zhǔn)的要求。 。應(yīng)提交選擇比較過程，提交驗證試驗資料。 特異性：臨床有意義的已知血型系統(tǒng)至少 7 種，每種選 1 個抗體（ IgG），與對應(yīng)的抗原陽性細胞均應(yīng)檢測陽性。 明確抗體的來源，如為單克隆抗體應(yīng)明確細胞株、克隆號等內(nèi)容。其他未盡事宜，應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）（以下簡稱《辦法》）等相關(guān)法規(guī)要求。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。 五、參考文獻 1.《中國生物制品規(guī)程》（ 2021年版），化學(xué)工業(yè)出版社 — 27— 第四篇：抗人球蛋白檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（ 2021 年） 附件 3 抗人球蛋白檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對抗人球蛋白檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。 5．試劑批放行前，應(yīng)對需要進行穩(wěn)定性考核的試劑成分，在特定溫度或條件下進行穩(wěn)定性試驗。 — 26— （ 2）產(chǎn)品完成包裝后，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)量進行抽樣和生產(chǎn)記錄審核。 （ 3）半成品檢定內(nèi)容包括：陰 /陽性參考品符合率、靈敏度、特異性、精密度。 （四）質(zhì)量控制 （ 1）按批號抽取規(guī)定數(shù)量的半成品。 — 20℃保存。 20℃保存。另外，根據(jù)標(biāo)記熒光素的不同，還應(yīng)該在熒光素的激發(fā)波長處有吸收峰，如 FAM熒光素在 494nm、TET 熒光素在 521nm、 TAMRA 熒光素在 560nm 處有特異的吸收峰，雜交探針在 493nm、 625nm、 685nm 處有特異的吸收峰 ，檢定合格后入庫。端標(biāo)記熒光素淬滅 基團，并經(jīng) HPLC 或其他適宜方法純化。 是指特定的帶有示蹤物（標(biāo)記物）的已知核酸片段（寡聚核苷酸片段），能與互補核酸序列退火雜交，用于特定核酸序列的探測。應(yīng)提供合成機構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì) 檢證明，如 PAGE電泳結(jié)果或 HPLC分析圖譜。 — 20℃保存。主要原材料（包括生產(chǎn)工藝）或其供應(yīng)商發(fā)生變更，應(yīng)依據(jù)國家相關(guān)法規(guī)的要求進行變更申請。 ，應(yīng)提供與通行原材料比對研究結(jié)果及相關(guān)資料。建立專用實驗室，實驗室應(yīng)當(dāng)嚴格分區(qū)，人員和物品應(yīng)當(dāng)單向流動，以最大限度地防止實驗過程中樣品之間的污染和避免擴增產(chǎn)物的污染。 二、適用范圍 本指導(dǎo)原則適用于核酸擴增法檢測試劑的注冊技術(shù)審查，其他類核酸檢測試劑可參照相關(guān)內(nèi)容。 本指導(dǎo)原則系對核酸擴增法檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需詳細闡述其理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)。若該診斷試劑沒有國家 — 9— 標(biāo)準(zhǔn)品（參考品），則使用企業(yè)參考品，企業(yè)參考品的制備應(yīng)有規(guī)范的質(zhì)量控制程序，以保證產(chǎn)品的安全性、有效性及質(zhì)量可控，其質(zhì)量應(yīng)不低于國家食品藥品監(jiān)督管理局已經(jīng)批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品的質(zhì)量。抽樣數(shù)量應(yīng)包括檢驗用數(shù)量和留樣數(shù)量。對定量檢測試劑，同時應(yīng)分析其線性相關(guān)系數(shù)和定量質(zhì)控品檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。半成品檢驗，一般使用國家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）或經(jīng)國家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）標(biāo)化后的企業(yè)參考品。 分裝及包裝均應(yīng)按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程要求進行。不同批號的板條不能混用。對于定量檢測試劑，其標(biāo)準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品）溶液應(yīng)具有量值溯源性。 （三）試劑盒各組分的生產(chǎn) 酶聯(lián)免疫法檢測試劑主要組分的生產(chǎn)包括酶標(biāo)記物的制備及滴配過程（酶工作液濃度確定）、各種工作溶液的配制、包被酶標(biāo)反應(yīng)板、分裝及包裝等步驟；并通過產(chǎn)品的半成品檢驗和成品檢驗兩個質(zhì)控過程來保證其質(zhì)量符合規(guī)定。 （ 3）其他材料 包括試劑瓶標(biāo)簽、粘膠紙、鋁箔袋、襯墊、可密封塑料袋、說明書、干燥劑和包裝外盒等，應(yīng)參照國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā) 布的《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》和《醫(yī)療器械說明書、標(biāo)簽和包裝標(biāo)識管理規(guī)定》建立相應(yīng)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。②吸附能力和精密性采用合適的方法進行檢驗。 3.化學(xué)原材料 化學(xué)原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括外觀、一般鹽類檢測、溶液 pH 值、溶解情況、干燥失重、熾灼殘渣等，均應(yīng)符合《中國生物制品主要原輔材 — 5— 料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（ 2021 年版）》分析純級別的要求，并且要適合于本企業(yè)的生產(chǎn)。（ 3）酪蛋白： 應(yīng)符合生產(chǎn)所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 溶解性：將 牛血清白蛋白配成 10%溶液，在 18 26℃時，溶解時間應(yīng)≤ 15 分鐘， pH值應(yīng)為 。無菌試驗：將血清直接 37℃放臵 7 天，明亮處觀察，不得出現(xiàn)混濁或 — 4— 沉淀。 （ 5）功能性實驗 功能性實驗是指生物原料用于試劑盒實際生產(chǎn)中的情況，一般考查使用該原料的試劑盒的靈敏度、特異性和穩(wěn)定性等，并比較其與上批次原料的相關(guān)性。染色后的凝膠用電泳掃描儀分析原料的純度和分子量，純度應(yīng)達到相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，分子量大小應(yīng)在正確的條帶位臵。主要生物原料若 為企業(yè)自己生產(chǎn)，其工藝必須相對穩(wěn)定；若購買，其供應(yīng)商要求相對固定，不能隨意變更供應(yīng)商，如果主要原料（包括工藝）或其供應(yīng)商有變更，應(yīng)依據(jù)國家相關(guān)法規(guī)的要求進行變更申請。 ：保證試劑使用安全、質(zhì)量穩(wěn)定、工藝可控、檢測有效。 — 2— 術(shù)人員、儀器設(shè)備以及適宜的生產(chǎn)環(huán)境，獲得《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》；同時，應(yīng)按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）》的要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，形成文件和記錄，加以實施并保持有效運行；還應(yīng)通過《體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系考核評定標(biāo)準(zhǔn)（試行）》的考核。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認知水平下制訂的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善、科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，其相關(guān)內(nèi)容也將進行適時的調(diào)整。 第二篇：酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 1 酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 一、前言 本指導(dǎo)原則主要針對酶聯(lián)免疫類檢測試劑的主要原材料、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系、產(chǎn)品質(zhì)量控制等環(huán)節(jié)提出指導(dǎo)性技術(shù)要求。 （六）參考物質(zhì)（ ReferenceMaterial）。線性是描述一個測量系統(tǒng)的測量示值或測量結(jié)果相關(guān)于樣本的賦值符合直線的屬性。分析特異性用于描述檢測程序在樣本中有其他物質(zhì)存在時只測量被測量物的能力。 （二）準(zhǔn)確度（ Accuracy）。 （五）說明書中預(yù)期用途、儲存條件及有效期、檢驗方法、參考區(qū)間、產(chǎn)品性能指標(biāo)、抗干擾能力等描述應(yīng)分別與臨床評價資料、穩(wěn)定性研究資料、主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系研究資料、參考范圍研究 資料、分析性能評估資料的研究結(jié)論相一致。ng/mL =nmol/L。 18.【醫(yī)療器械注冊證編號 /產(chǎn)品技術(shù)要求編號】應(yīng)當(dāng)寫明醫(yī)療器械注冊證編號 /產(chǎn)品技術(shù)要求編號。 16.【參考文獻】注明引用參考文獻，其書寫應(yīng)清楚、易查詢且格式規(guī)范統(tǒng)一，符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。 驗室規(guī)范要求進行操作，否則可能對結(jié)果造成的影響。 14.【注意事項】 ，如：“本品僅用于體外診斷”。 12.【檢驗方法的局限性】明確常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，企業(yè)可根據(jù)自身情況對特殊干擾物進行說明，并注明可接受的最高限值，不應(yīng)使用模糊的描述方式。 應(yīng)與資料（五）參考區(qū)間確定性資料數(shù)據(jù)一致。 試驗結(jié)果的計算或讀取，包括對每個系數(shù)及對每個 計算步驟的解釋。 能夠保證樣本穩(wěn)定的儲存、處理和運輸方法。 8.【樣本要求】 應(yīng)在以下幾方面進行說明： 適用的樣本類型。 生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見標(biāo)簽）。 保存溫度不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”“室溫”，應(yīng)直接以℃為單位。 質(zhì)控品需注明靶值范圍，如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值單。對于多組分試劑盒，明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。 3.【預(yù)期用途】 第一段說明試劑盒用于體外定量測定血清或血漿中的孕酮的含量。 應(yīng)注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如測試 /盒、 mL。名稱中不應(yīng)當(dāng)出現(xiàn)定性 /定量等內(nèi)容。因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。應(yīng)當(dāng)包括準(zhǔn)確度、均勻性檢驗方法的詳細描述。 特異性方法見（四）分析 性能評估資料部分，結(jié)果符合 的要求。 批間差使用 3 個批次試劑盒對濃度在（ 2— 14） nmol/L和（ 46— 85） nmol/L范圍內(nèi)的樣本各重復(fù)測定 10 次，計算 30 個測量值的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）。將每一濃度的樣本重復(fù)測定最少 2 次，計算平均值，將結(jié)果平均值和稀釋比例用最小二乘法進行直線擬合，并計算線性相關(guān)系數(shù)（ r），所得結(jié)果應(yīng)符合 。根據(jù)所提供信息，對 5 份濃度近似檢出限的低值樣本進行測定，每份樣本測定 5 次。 根據(jù)所聲稱的熱穩(wěn)定性條件取有效期內(nèi)的試劑盒進行熱加速后，測定其檢出限、線性、 重復(fù)性、準(zhǔn)確性，特異性，結(jié)果應(yīng)符合要求。 15%，潛在干擾物濃度符合企業(yè)規(guī)定要求），各個樣本測量結(jié)果的均值應(yīng)在目標(biāo)濃度平均值（ M）177。 批間差用三批試劑盒測試同一份樣本，其測試結(jié)果的變異系數(shù)（ CV）應(yīng)不大于 15%。 ： 、性狀； ，文字符號標(biāo)識清晰。 /規(guī)格及其劃分說明明確試劑的組成、組成成分及規(guī)格。如已有相應(yīng)的國家 /行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則技術(shù)要求中不得低于其相關(guān)要求。 主要參考文獻 主要研究者簡歷 申請人需要說明的其他情況等。 臨床試驗結(jié)果及分析 討論和結(jié)論。 定量值相關(guān)性和一致性分析：用相關(guān)分析、 BlandAltman 分析、線性分析、配對 t 檢驗等進行定量值相關(guān)性和一致性分析，應(yīng)給出相關(guān)系數(shù)、 95%一致性界限、回歸分析的擬合方程 y=ax+b和 R t值、 p值、 95%（ 99%）置信區(qū)間等統(tǒng)計結(jié)果，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。對質(zhì)量控制方法進行簡要的闡述。 。試驗進行時方案修改的情況和任何方案以外的信息來源也應(yīng)詳細敘述。 。 試驗研究人員列出臨床試驗主要研究人員的姓名、單位、在研究中的職責(zé)及其簡歷（列于附件中），主要研究人員包括主要研究者及各單位的主要參加人員、統(tǒng)計學(xué)負責(zé) 人、臨床試驗報告的撰寫人。臨床試驗報告的格式及內(nèi)容如下： 首篇首篇是每份臨床試驗報告的第一部分，所有臨床試驗報告均應(yīng)包含該部分內(nèi)容。如無需復(fù)核，應(yīng)詳細說明理由。 ，如相關(guān)分析、 BlandAltman 分析、線性回歸、配對 t 檢驗等。如產(chǎn)品發(fā)生涉及檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項，臨床樣本總數(shù)至少為 100 例，并在至少 2家（含2 家）臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗； 變更抗體等主要原材料的供應(yīng)商、參考區(qū)間的變化及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗總樣本數(shù)。 非孕女性不同生理周期的考慮非懷孕正常女性在不同的生理期，其孕酮的含量也不同，樣本選擇時，應(yīng)含有一定數(shù)量的各生理周期的樣本。企業(yè)在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群 /在進行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，孕酮檢測樣本通常為血清，總體樣本數(shù)不少于 200例，參考區(qū)間范圍外的樣本數(shù)不少于 30%。臨床試驗中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且不應(yīng)超越參比試劑對樣本類型的檢測要求，如果選擇了參比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應(yīng)采用其他合理方法對額外的樣本類型進行驗證。各臨床研究機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。建議企業(yè)盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍及精密度等性能接近的同類試劑作為對比試劑。根據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，申請人可按照《免于進行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 179 號）要求進行臨床評價。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進行評價。常用的穩(wěn)定性研究方案為證實試劑在經(jīng)過被作用于指定條件后仍能證明主要性能指標(biāo)要求與未被作用于指定條件的試劑性能一致。 表 2 各 廠 家 參 考 區(qū) 間 篩 選 分 組 示 例 廠 家 篩 選 分 組Ang/mLBng/mLCng/mLDng/mL男性 — — — — 卵泡期 — — — — 排卵期 /—— — 黃體期 — — 27/—