【正文】 amp。沒有他們的付出，將不會有今天的我，將最崇高的敬意獻給父母！參考文獻[1] 陳寶泉. 基于硒元素的抗癌藥物研究進展 [J]. 化學(xué)通報, 2011, (08).[2] Brown, . and . Arthur. Selenium, selenoproteins and human health: a review [J]. Public health nutrition, 2001, 4(2B): 5939.[3] Rotruck, . Selenium: biochemical role as a ponent of glutathione peroxidase [J]. Science (New York, .), 1973, 179(4073): 58890.[4] Mills, catabolism. I. Glutathione peroxidase, an erythrocyte enzyme which protects hemoglobin from oxidative breakdown [J]. The Journal of biological chemistry, 1957, 229(1): 18997.[5] Agay, D. Optimization of selenium status by a single intraperitoneal injection of Se in Sedeficient rat: Possible application to burned patient treatment [J]. Free Radical Biology and Medicine, 2005, 39(6): 762768.[6] Naz?ro?lu, M., A. Karao?lu, and . Aksoy. Selenium and high dose vitamin E administration protects cisplatininduced oxidative damage to renal, liver and lens tissues in rats [J]. Toxicology, 2004, 195(2–3): 221230.[7] Ozardal?, . 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TEMEDX分析EDX分析的元素組成顯示納米粒子存在強的Se信號峰，以及C,O原子。（2）細(xì)胞存活率實驗（MTT法）細(xì)胞活性用MTT法進行測定。L/孔，振蕩10 min左右，酶標(biāo)儀測定570 nm處的OD值，計算細(xì)胞存活率。具體方法：%胰蛋白酶消化1 min成單細(xì)胞懸液，然后用臺盼藍染色計數(shù)活細(xì)胞數(shù)，調(diào)整活細(xì)胞設(shè)置為所需密度加入96孔培養(yǎng)板，每孔100 181。（2）MTT法MTT法又稱MTT比色法，是用來檢測細(xì)胞存活率的方法。 mg。表34 不同SeC投藥量的包封率和載藥率Table34 Encapsulation and Loading EfficiencyNo.CS:LSeCSize()包封率載藥率F14:1 %%F22:1 %%F31:1 %% 不同SeC投藥量粒徑，包封率及載藥率Fig. Size, Encapsulation and Loading Efficiency of different SeC dosage 本章小結(jié)殼聚糖納米粒子負(fù)載藥物后的載藥率與包封率與投藥量有關(guān)。 不同SeC投藥量納米粒子TEM圖 Comparison of ratio of CS to SeC on nanoparticles’ shapes(F1) CS:SeC = 4:1 (F2) CS:SeC = 2:1 (F3) CS:LSeC = 1:1 包封率與載藥率的計算載藥率 = 納米粒子中所含藥物量/納米粒子總量100 %包封率 = 納米粒子中包封的藥量/投入的總藥量100 %通過電感耦合等離子體質(zhì)譜儀 (ICPAES) 檢測 F1,F2,F3中Se的含量，通過計算得到各自的包封率與載藥率。表33 SeC投藥量對納米粒子粒徑的影響Table 33Effect of LSeC dosage on nanoparticles39。含硒代胱氨酸殼聚糖溶液的配制：分別取500 μL，400 μL，200 μL SeC溶液與500 μL CS溶液混合均勻冷藏備用。 實驗儀器表32 實驗儀器Table 32 Apparatus used in experiment儀器名稱型號產(chǎn)地電子天平BP301S德國Sartorius 公司離心機Centrifuge 5804REppendorf超聲破碎儀JY92IIDN寧波新芝生物科技股份有限公司電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀Optima2000DV美國PerkinElmer 公司納米粒度儀NanoZS英國馬爾文(Malvern)公司透射電子顯微鏡TECNAI10荷蘭Philips 實驗方法由第二章空白殼聚糖納米粒子的制備條件優(yōu)化得出制備殼聚糖粒子的最佳條件，即殼聚糖濃度為15 mg/mL, 油水比為50:1，表面活性劑為油相體積的3%，交聯(lián)劑濃度為3%。通過以上實驗，最終確定制備載藥殼聚糖納米粒子的最佳條件為：殼聚糖濃度為15 mg/mL, 油水比為50:1，表面活性劑為油相體積的3%，交聯(lián)劑濃度為3%。 不同交聯(lián)劑濃度納米粒子TEM圖Fig. TEM image of nanoparticles39。從TEM圖中可觀察到，當(dāng)交聯(lián)劑濃度較低時，一開始局部進行的是液滴內(nèi)交聯(lián)，隨后隨著交聯(lián)劑體積增加，進行液滴間交聯(lián)，因此交聯(lián)得到的產(chǎn)物粒子分布不均勻，交聯(lián)效果差。 sizesNo.Glutaraldehyde aqSize()PdIE1% E21% E33% E45% E57% 不同交聯(lián)劑濃度對納米粒子粒徑的影響Fig. Comparison of different glutaraldehyde concentration on nanoparticles39。當(dāng)交聯(lián)劑濃度較低時，交聯(lián)程度小，交聯(lián)效果差。①同交聯(lián)劑體積表27 交聯(lián)劑(1 %)體積對納米粒子粒徑的影響Table 27Effect of G dosage on nanoparticles39。 不同殼聚糖濃度納米粒子TEM圖Fig. TEM images of nanoparticles39。從TEM圖中可觀察到，殼聚糖溶液濃度過小或過大，得到的產(chǎn)物粒徑均比較大。 sizesNo.CS(mg/ml)size()PdIC110 C215 C320 C425 殼聚糖濃度對納米粒子粒徑的影響Fig. Comparison of different CS concentration on nanoparticles39。當(dāng)殼聚糖濃度為15 mg/mL時，產(chǎn)物的粒徑最小，分布性最好。 不同Span80用量納米粒子的TEM圖Fig. TEM images of nanoparticles39。從TEM圖中可觀察到，當(dāng)表面活性劑用量較少或較多時，形成的納米粒子性狀不規(guī)則，并且粒徑較大。 sizesNo.PercentageSpan80(g)Size()PdIB12% B23% B34% B45% B56% 不同Span80對納米粒子影響對比圖Fig. Comparison of different Span80 dosage on nanoparticles39。乳化劑的用量需要適中，太少(2%)可能導(dǎo)致界面層太薄，膜強度不夠。 shapes(A1) O/W=10:1 (A2) O/W=20:1 (A3) O/W=30: 1 (A4) O/W=40:1 (A5) O/W=50:1 表面活性劑用量對殼聚糖納米粒子的影響(1)粒徑分布及其穩(wěn)定性的分析。隨著油水比的增加，粒子逐漸變小，形貌趨于規(guī)則的圓球。 sizes 不同油水比納米粒子的粒徑分布Fig. Comparison of different ratio of paraffin to CS on nanoparticles39。這可能是由于在油相體積較小時，水相納米粒子分散不均勻，存在納米粒子粘連現(xiàn)象，而交聯(lián)劑的加入使得這些納米粒子粘連現(xiàn)象加重，從PdI和粒徑分布圖看出，油相體積比小時PdI較大，分散不均勻。 實驗結(jié)果與討論 油相體系對殼聚糖納米粒子的影響(1)粒徑分布及其穩(wěn)定性的分析表23 ，甲苯作為油相制備所得的納米粒子粒徑與PdI明顯比液體石蠟制得的粒子大，這可能與油相體系的粘度有關(guān)。取500 μL CS溶液緩慢滴加到油相溶液中，經(jīng)超聲2h處理后形成穩(wěn)定的W/O型微乳液，然后分別逐漸滴加2 mL，3 mL，4 mL，5 mL，6 mL 1 %的戊二醛作為交聯(lián)劑進行化學(xué)交聯(lián)，超聲分散后在室溫下攪拌3 h，8000 r/min離心，然后用無水乙醇和石油醚洗滌并離心，最后用蒸餾水清洗，得到乳白色溶液。取500 μL 不同濃度的CS溶液緩慢滴加到油相溶液中，經(jīng)超聲2 h處理后形成穩(wěn)定的W/O型微乳液，然后逐漸滴加1%的戊二醛作為交聯(lián)劑進行化學(xué)交聯(lián)，超聲分散后在室溫下攪拌3 h，8000 r/min離心，然后用無水乙醇和石油醚洗滌并離心，最后用蒸餾水清洗，得到乳白色