【導(dǎo)讀】1．將一預(yù)溫后的燒杯或塑料杯放在電子秤上，打開(kāi)電子秤，當(dāng)顯示為零時(shí)，將裝精液的食品袋從集精杯中取出放入杯中，顯示讀數(shù)為精液的重量。2．將放精液的燒杯輕輕搖勻精液后，放入35℃的水浴鍋中與稀釋液等溫。3．立即用取樣器取精液10～25微升左右，滴在載物臺(tái)上預(yù)熱的載玻片上，蓋上蓋玻片，估測(cè)活力。精子活力大于，則可用于下一步的處理。4．另取1毫升精液放入加有10毫升生理鹽水的精子密度杯中，讀出讀數(shù)后，在查對(duì)表上查到精子密度值。5．計(jì)算精液可分裝的份數(shù)和最終的精液體積或重量。①經(jīng)過(guò)清洗干燥消毒的三角瓶，將一袋BTS稀釋粉（50克）全部加入瓶中，用保溫杯作集精杯時(shí)，不能直接將精液采入杯中。采精前應(yīng)將集精杯、消毒紙巾、一次性手套放入壁廚中，以方便采精時(shí)取用。公豬的精液對(duì)溫度十分敏感，尤其是低溫。

　　

【正文】 形成一個(gè)角度，呈一個(gè)銳角，并向右移動(dòng)蓋玻片，蓋玻片與精液接觸時(shí)，再將蓋玻片放下，這樣可避免產(chǎn)生氣泡，影響檢查結(jié)果。蓋上蓋玻片可以在顯微鏡視野里看到一 薄層的精子，視野清晰，避免因不同層精子的活力不同而使判斷出現(xiàn)人為誤差。 用 100 倍或 400 倍的顯微鏡來(lái)檢測(cè)精子的活力，即判斷視野中前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子所占的比例。 活力 5級(jí)評(píng)分方法是： 整個(gè)視野中有明顯的大的運(yùn)動(dòng)波 很好 5分 出現(xiàn)一些運(yùn)動(dòng)波和精子成群運(yùn)動(dòng) 好 4分 出現(xiàn)成群運(yùn)動(dòng) 較好 3分 無(wú)成群運(yùn)動(dòng)，部分呈前進(jìn)運(yùn)動(dòng) 一般 2分 只有蠕 動(dòng) 差 1分 無(wú)精子活動(dòng) 0分 注：運(yùn)動(dòng)波是指精子成群運(yùn)動(dòng)時(shí)，推動(dòng)液體運(yùn)動(dòng)形成的云霧狀翻滾現(xiàn)象。 取精液滴在預(yù)溫后的載玻片上 蓋上蓋玻片后，觀察精液運(yùn)動(dòng)狀況 精子運(yùn)動(dòng)活潑可形成運(yùn)動(dòng)波 對(duì)稀釋保存的精液，在進(jìn)行精子活力評(píng)估時(shí)，一般采用十級(jí)制評(píng)分。即估測(cè)視野中前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子的百分率，因?yàn)?，稀釋后的精液，精子的運(yùn)動(dòng)較容易看清，可根據(jù)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子和非前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子的大致比例，來(lái)進(jìn)行估計(jì)。例如，有 70%的精子呈前進(jìn)運(yùn)動(dòng)，則活力為 ，以此類推。 公豬采精 19 不論是原精液還是稀釋保存的精液，如果在檢查中精子的活力很差，應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)環(huán)節(jié)，進(jìn)行第二次檢查，應(yīng)注意吸咀、載玻片和蓋玻片必須潔凈，對(duì)精子無(wú)毒害，載玻片溫度適宜。如果第 二次檢查仍很差，則精液必須廢棄。 （ 5） 精子的濃度（或密度） 精子的濃度是指單位體積精液所含的總精子數(shù) （通常為億 /ml） 。 （ 1）血球計(jì)數(shù)板法濃度測(cè)定 精子的濃度可用血球計(jì)數(shù)板法進(jìn)行測(cè)定：輕輕搖動(dòng)精液，用微量移液器（取樣器）取精液 100 微升，擦去外部精液，加入一次性試管中，用移液管吸取 3%氯化鈉溶液 毫升 (即 3900 微升 )加入精液中，混合均勻，原精液被稀釋了 40倍。 將血球計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)上，加蓋蓋玻片，用取樣器吸取 25 微升稀釋后精液加入計(jì)數(shù)板與蓋玻片之間的計(jì)算室中使計(jì)算室充滿（見(jiàn)圖）。放在顯微鏡下找到 計(jì)算室，計(jì)數(shù)計(jì)算室內(nèi)的總精子數(shù)，為了減少計(jì)數(shù)的工作量，可選擇有代表性的五個(gè)中方格，如四角一中心，或斜對(duì)角線的五個(gè)方格（見(jiàn)圖用紅色框標(biāo)記的中方格）計(jì)數(shù)精子。 為了避免計(jì)數(shù)精子時(shí)重復(fù)，應(yīng)以精子的頭數(shù)為準(zhǔn)，對(duì)在格線上的精子，可依照數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右的原則，計(jì)數(shù)五個(gè)中方格中的總精子數(shù)。為計(jì)算室的一個(gè)中方格，在計(jì)數(shù)量，在右側(cè)線和下端上的精子（為了識(shí)別，標(biāo)記為白色）是不應(yīng)進(jìn)行計(jì)數(shù)的精子。 五個(gè)中方格總精子計(jì)數(shù)完后得出的結(jié)果，依下列公式進(jìn)行計(jì)算原精子密度（此公式已被簡(jiǎn)化）： 精子密度（億個(gè) /毫升） =五個(gè)中方格總精子數(shù) 血球計(jì)數(shù)板法是其它光學(xué)測(cè)定方法的基礎(chǔ)，因?yàn)楣鈱W(xué)的度數(shù)是根據(jù)光學(xué)儀器的原理得出的，與精子密度并沒(méi)有直接關(guān)系，必須有已知的密度值才能獲得對(duì)照表。 公豬采精 20 計(jì)數(shù)室的五個(gè)中方格 一 個(gè)中方格的精子（白色為不計(jì)數(shù)精子） （ 2）分光光度計(jì)或精子密度計(jì)法 這種方法是采用光學(xué)儀器，根 據(jù)精子濃度越高，透光率越低的原理進(jìn)行精子濃度測(cè)定的。在 440 納米可見(jiàn)光下，用加檸檬酸鈉溶液的比色杯，按 100%透過(guò)率作空白對(duì)照，然后在另一比色杯中加入等量的檸檬酸鈉溶液，再加定量精液，混合均勻后，放入樣本池，讀出透光率讀數(shù)。最后查精子密度查對(duì)表，查出精子濃度讀數(shù)。有時(shí)提供的對(duì)照表是指稀釋后精液的精子濃度，需根據(jù)稀釋倍數(shù)，換算出原精液精子濃度。精子密度查對(duì)表是用先用血球計(jì)數(shù)板測(cè)出諾干個(gè)精液標(biāo)準(zhǔn)樣本的精子濃度值，然后將其稀釋成不同濃度梯度的樣本，每個(gè)樣本的精子濃度均可計(jì)算出，測(cè)出其透光率，然后制成透光率和精子濃 度查對(duì)表。 （ 3）精子密度杯法 由鄭州牧業(yè)工程高等專科學(xué)校張長(zhǎng)興老師發(fā)明的精子密度杯，可以很方便地進(jìn)行豬精子密度的測(cè)定，而且設(shè)備簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉。 將 10 毫升生理鹽水加入精子密度杯，根據(jù)采集到精液的色澤，初步判斷精子濃度的高低，可選擇添加原精液 毫升、 1毫升、 2 毫升任一個(gè)添加量，加入生理鹽水中，對(duì)初學(xué)者來(lái)說(shuō)，可不必選擇原精液添加量，只需固定地添加 1毫升量即可，只是測(cè)定值的精確度略低。用拇指壓緊杯口，上下翻轉(zhuǎn) 4～ 5次， 然后在自然光或較強(qiáng)的光照下，將密度杯與眼呈水平，從上向下觀察其讀數(shù)值，再根據(jù)實(shí)際添加量， 查對(duì)照表的相應(yīng)的列，就可以查到原精液的精子濃度值。 （ 6） 精子的形態(tài)觀察 （ 畸形率 ） 精子的形態(tài)觀察主要是觀察精子的畸形率，豬的精子畸形率不能超過(guò) 20%，否則就必須廢棄。 公豬采精 21 左側(cè)為正常精子（點(diǎn)狀物為原生質(zhì)），右側(cè)為各種畸形精子 （ 7） 精子的凝集現(xiàn)象 與牛羊不同的是，豬的精子很容易發(fā)生凝集。當(dāng)凝 集嚴(yán)重時(shí)，精液在直觀條件下就可看到精液很不均勻。輕度凝集，可在顯微鏡下觀察到，精子成團(tuán)存在，有些精子盡管在蠕動(dòng)，但已經(jīng)失去了前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的能力。精子凝集后，凝集的精子失去了活力，使精子活力總體上大幅度下降。因此，凡有輕度凝集的精液，如果活力符合要求，應(yīng)注意作好記錄，并在精液稀釋后 12小時(shí)進(jìn)行活力檢查，如果活力下降很明顯，應(yīng)考慮將精液廢棄。活力 以上，有少量凝集，可用一個(gè) +號(hào)表示，有明顯的成團(tuán)精子凝集可用 ++表示，有大團(tuán)凝集者為 +++。有成團(tuán)凝集的精液應(yīng)廢棄。 精子凝集成團(tuán)，分布不均 公豬采精 22 豬精液的運(yùn)輸 最常用的短途運(yùn)輸工具是泡沫塑料箱或疫苗箱。氣候溫和季節(jié)可將精液容器直接放入疫苗箱中運(yùn)輸；如果氣溫較高或較低（尤其是氣溫較低時(shí)），應(yīng)用冰袋或熱水袋放在疫苗箱底部，然后蓋上小棉被，再將精液放入箱中，并放一支溫度計(jì)，隨時(shí)測(cè)量箱內(nèi)的溫度，力爭(zhēng)使溫度保存在 16～ 20℃，但如果在短時(shí)間內(nèi)輸精，溫度允許達(dá)到 25℃，但不可低于 16℃。極端寒冷地區(qū)在輸精前可用熱水袋將精液逐步升溫到 33℃左右，再用于輸精，以防輸精時(shí)，精液溫度進(jìn)一步下降。 長(zhǎng)途運(yùn)輸情況下，精液受外界溫度影響程度較大，可采用專用車載冰箱存放精液。如果用疫苗箱或泡沫塑料箱存放應(yīng)定時(shí)觀察箱內(nèi)溫度。如果能保證車箱內(nèi)合適的溫度，則運(yùn)輸更安全，對(duì)存放容器的要求可以低些。 精液品質(zhì)檢查 本交公豬的精檢原則： （ 1） 所有在用的公豬每月必須普查精液品質(zhì)一次， 夏季每月兩次，若連續(xù)三次精檢不合格或連續(xù)二次精檢不合格且伴有睪丸腫大、 萎縮、性欲低下、跛行等疾病時(shí)，必須淘汰。 （ 2） 精檢不合格的公豬絕對(duì)不可以使用，公豬不夠用采用人工授精 （ 3） 關(guān)于不合格公豬的復(fù)檢工作，請(qǐng)按《五周四次精檢法》進(jìn)行復(fù)檢。 《五周四次精檢法》 （ 1） 首次精檢不合格的公豬， 7 天后復(fù)檢 (第二次 )。 （ 2） 復(fù)檢不合格的公豬， 10天后采精 ,作廢，再隔 4 天后采精檢查 （第三次） 。 （ 3） 仍不合格者， 10天后再采精 ,作廢，再隔 4 天后作第四次檢查 。 經(jīng)過(guò)連續(xù)五周四次精檢，一直不合格的公豬建議作淘汰處理，若中途檢查合格，視精液品質(zhì)狀況酌情使用。 公豬全份精液品質(zhì)檢查暫行標(biāo)準(zhǔn) ? 優(yōu)： 精液量 250ML 以上，活力 以上，密度 億 /ML 以上，畸型率 5%以下，感觀正常。 ? 良： 精液量 150ML 以上，活力 以上，密度 億 /ML 以上，畸型率 10%公豬采精 23 以下，感觀正常。 ? 合格： 精液量 100ML 以上，活力 以上，密度 億 /ML 以上 ， 畸型率18%以下 (夏季訂為 20%)，感觀正常。 ? 不合格： 精液量 100ML 以下且密度 億 /ML 以下，活力 以下，畸型率18%以上 (夏季訂為 20%)，感觀正常。以上四個(gè)條件只要有一個(gè)條件符合即評(píng)為不合格。 四川安佑技術(shù)服務(wù)部 提供 20200914