【正文】 。四環(huán)素對 PrP的作用機制尚不清楚，但可能與其理化性質有關。u 四環(huán)素具有兩性性質（親水基團的半芳香基團構成伸展的疏水核心）。 PrPc轉化為 PrPSc的過程中，由于親脂位點的暴露(b224。ol249。)及形成不溶性積聚物和淀粉樣纖維，從而導致疏水性增加。由于四環(huán)素等化合物具有疏水的特性，因而可以和PrPSc及其片段的脂質位點發(fā)生強烈的相互作用。u 四環(huán)素的極性基團與 PrPSc的特異性位點形成氫的鍵加強了藥物－蛋白的相互作用。極性基團在體外抑制 PrPSc的形成方面具有重要作用。對四環(huán)素類似物的初步研究提示極性基團的性質和在苯環(huán)上的位置對四環(huán)素抑制 PrP肽鏈聚合的均有顯著影響。 第九十六 頁 ，共一百零九 頁 。（ 2)n 人類對四環(huán)素藥力作用、藥代動力學和毒理學等已有充分認識。四環(huán)素的衍生物如二甲胺四環(huán)素能夠較好的透過血腦屏障，還能抑制活化 Caspase3的形成，抑制凋亡、避免興奮性毒性、壞死細胞死亡。二甲胺四環(huán)素在肌萎縮側所硬化、 Huntinton病等神經變性病實驗動物模型中具有 (j249。yǒu)神經保護作用 [4]。推測四環(huán)素類化合物有可能對 prion病有效。第九十七 頁 ，共一百零九 頁 。（ 3）n 四環(huán)素對羊瘙癢因子 263K的蛋白酶抗性和感染性影響n 用不同濃度四環(huán)素與羊瘙癢因子 263K共孵育 12h、 24h、 48h、 72h和 96h后消化，用蛋白印跡法檢測蛋白酶 K（ Protease Ｋ， PK） 抗性 PrPSc產物的存在。結果發(fā)現四環(huán)素濃度與羊瘙癢因子263K蛋白酶抗性正相關，隨作用時間延長，這一作用更加明顯。四環(huán)素處理后的樣品顱內接種金黃倉鼠，觀察潛伏期。5mM四環(huán)素處理組實驗動物潛伏期延長了 %，差異具有顯著性（ p， 獨立樣本 t檢驗）。本研究提示四環(huán)素能夠降低(ji224。ngdī)PrPSc的 PK抗性，使羊瘙癢因子 263K感染動物后潛伏期延長。 第九十八 頁 ，共一百零九 頁 。n 多烯抗生素較早的用于治療 prion病的研究，結果也比較肯定。它是一類以疏水性的七烯為主要結構、帶有親水性基團的化合物。u 主要包括 (bāoku242。)：t 兩性霉素 Bt 1脫氧 4,6氧 次芐基 D果聚糖 兩性霉素 B的 N甲基葡聚糖水溶液（ MS8209）t 菲律賓霉素（ Flupirtine）u 最初應用兩性霉素 B治療 prion病是由于當時人們尚不了解CJD的致病因子，而接種了 CJD腦組織的非洲綠猴接受兩性霉素 B治療后，發(fā)病潛伏期延長，從而認為這種抗真菌藥物可能有價值。 第九十九 頁 ，共一百零九 頁 。n 剛果紅抑制 ScN2a細胞中的 PrP以 PrPres形式積聚。 Demaimay等在純化的 PrPres和 PrPsen組成的最簡單的無細胞轉化系統(tǒng)中發(fā)現，剛果紅能夠抑制 PrPres的形成。在另外一個無細胞轉化模型中，剛果紅衍生物能夠逆轉 PrPSc的蛋白酶抗性。剛果紅及其衍生物作用 1小時 (xiǎosh237。)就能使 PrPres轉化為 PrPsen， 還能與過度穩(wěn)定的PrPres積聚物發(fā)生相互作用。 n 剛果紅對顱內、腹腔接種的實驗動物都有效，在感染早期給藥有效。 第一百 頁 ，共一百零九 頁 。n 主要包括 多硫酸戊聚糖（ Pentosan polysulfate）、 硫酸右旋糖苷 500（ dextran sulphate 500）。 已知 PrPres形成的淀粉樣物質中含有硫酸粘多糖，后者是 PrPres積聚、形成淀粉樣物所必需的物質。聚陰離子競爭性抑制 PrPres與內源性硫酸粘多糖的相互作用從而抑制 PrPres的積聚。 n 多硫酸戊聚糖能有效地抑制 PrPres在 ScN2a細胞的積聚而不影響正常的 PrPC的代謝。即使將該藥去除，其抑制 PrPres積聚的作用仍將持續(xù)存在 (cnz224。i)。該藥主要防止新的 PrPres的積聚，但不能使業(yè)已存在的PrPres解聚。 第一百零一 頁 ，共一百零九 頁 。n 丫啶類化合物（ Acridine） 包括 (bāoku242。)阿的平（quinacrine）、 氯丙嗪。 2024年英國曾報道 1例 vCJD女病人試用阿的平和氯丙嗪后癥狀明顯好轉，但病人最終死亡的病例。n 近來發(fā)現抗瘧藥（阿的平， quinacrine） 可抑制ScN2a細胞系統(tǒng)中 PrPSc形成，其 IC50為 。對 24種吖啶和吩噻嗪衍生物進行比較分析發(fā)現，三環(huán)結構上的第 9位氮原子和脂肪側鏈的長度和構成成分對抑制 PrPSc形成有作用。 第一百零二 頁 ，共一百零九 頁 。 (zǔ du224。n)抗體 (Blocking antibodies) n 幾種特異性抗 PrP重組抗體 Fab段、抗 PrP單克隆抗體 6H4能抑制 ScN2a細胞 PrPSc形成，但不能抑制 PrPC表達。 n 英國科學家最近將 prion抗體注入羊瘙癢病小鼠模型，該模型一般在 7個月內死亡，但注射該抗體后，小鼠至少保持健康 2年。 Hawke等在小鼠接種 (jiēzh242。ng)30天時及抗體注入其腦內，此時小鼠尚未出現癥狀，但 PrPSc增殖非常迅速。抗體大概可以防止 PrPC錯誤折疊成 PrPSc。第一百零三 頁 ，共一百零九 頁 。 (Branched Polyamines)n 通過對多氨基胺，聚丙烯亞胺（ PPI) 結構活性研究發(fā)現，支鏈結構的體征和較高的表面密度是其在體外和 ScN2a細胞培養(yǎng)中使 PrPSc變性所必需的。 n 多胺對的 PrPSc清除作用與作用濃度和作用時間有關。在 ScN2a細胞中加入不產生細胞毒性的濃度的支鏈多胺， 1周后的含量降低到不能檢出的水平 (shuǐp237。ng)，這一作用持續(xù) 3周。第一百零四 頁 ，共一百零九 頁 。8. β片層結構阻斷 (zǔ du224。n)蛋白n 這種阻斷蛋白為異常折疊的蛋白質所共有，是一種與 PrP片段同源的肽鏈，它具有發(fā)揮阻斷 β片層結構的特異性位點，能夠(n233。ngg242。u)抑制和逆轉構型改變。第一百零五 頁 ，共一百零九 頁 。小結 (xiǎoji233。)n 總之，目前認為 Prion病系由于蛋白構象改變所致，治療靶點在于抑制異常 PrP的形成和增殖，藥物治療研究也集中在通過藥物本身的結構特點 (t232。diǎn)改變 PrP的異常構象等方面。相信隨著對 prion并及其他蛋白構象病發(fā)病機制、治療的研究，終將研究出對 Prion病有效的藥物。第一百零六 頁 ，共一百零九 頁 。謝謝 謝謝第一百零七 頁 ，共一百零九 頁 。PrP密碼子 129氨基酸多態(tài)性與遺傳性朊病毒病 (fCJD、 FFI)178密碼子點突變 (tūbi224。n)D178N 129M D178N 129V D178N FFI fCJD第一百零八 頁 ，共一百零九 頁 。內容 (n232。ir243。ng)總結瘋 牛病和 CJD。 DenmarkSpainGermany。一些 實驗發(fā)現 PrPres構型改 變 的 動 力學與感染性 動 力學不相符。與其他有 創(chuàng) 性在體 診斷技 術 （扁桃體活 檢 和 腦 活 檢 ）相比， MRI檢查 的 優(yōu) 越性不言自明。 MRI序列 對 于 (du236。y)發(fā)現 CJD高信號的敏感性依次 為 DWIFLAIRPDT2T1。 剛 果 紅對顱 內、腹腔接種的 實驗動 物都有效，在感染早期 給藥 有效。即使將 該藥 去除，其抑制 PrPres積 聚的作用仍將持 續(xù) 存在。 D178N第一百零九 頁 ，共一百零九 頁 。