【正文】 ēngw249。)技術(shù)制藥一、現(xiàn)代生物 (shēngw249。)技術(shù)以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ) ,把 生物體系 與 工程學(xué)技術(shù) 有機(jī)結(jié)合在一起，按照預(yù)先的 設(shè)計(jì)，定向 地在不同水平上改造生物遺傳性狀 或加工生物原料 ,產(chǎn)生對(duì)人類有用(yǒuy242。nɡ)的 新產(chǎn)品 (或達(dá)到某種目的 )之綜合性科學(xué)技術(shù)。 第八十一 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。二、生物 (shēngw249。)技術(shù)制藥生物藥物 泛指包括生物制品在內(nèi)的生物體的初級(jí)和次級(jí)代謝產(chǎn)物及生物體的某一組成部分，甚至整個(gè)生物體用作診斷和治療疾病的醫(yī)藥品。生物技術(shù)藥物 是將一些難以規(guī)?；崛∩a(chǎn) (shēngchǎn)的微量生命活動(dòng)物質(zhì)，經(jīng)分離純化研究確證其結(jié)構(gòu)、功效后，利用DNA重組技術(shù)和單克隆抗體技術(shù)等方法進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)(shēngchǎn)而獲得的蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、疫苗、單克隆抗體和細(xì)胞生長(zhǎng)因子等藥物。包括基因工程藥物、酶工程藥物、動(dòng)植物細(xì)胞工程藥物等。第八十二 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。三、生物技術(shù) (j236。sh249。)制藥的特點(diǎn)① 可以大量生產(chǎn)過(guò)去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床應(yīng)用提供有力的保障。② 可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便對(duì)其生理和生化結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究，從而擴(kuò)大這些 (zh232。xiē)物質(zhì)的應(yīng)用范圍。③ 應(yīng)用基因工程技術(shù)可發(fā)現(xiàn)、挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)。④ 內(nèi)源性生理活性物質(zhì)在作為藥物使用時(shí)存在的不足之處，可以通過(guò)基因工程和蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造和去除。⑤ 利用基因工程技術(shù)可獲得新化合物、擴(kuò)大藥物篩選 來(lái)源。第八十三 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。四、生物技術(shù)藥物 (y224。ow249。)的種類（ 1）干擾素類， 如： α 干擾素（ 2）白細(xì)胞介素， 已發(fā)現(xiàn) 23種， IL IL2 IL23（ 3）集落刺激 (c236。jī)因子（ CSF）類， 如：粒細(xì)胞 CSF（ 4）生長(zhǎng)因子類， 如： EGF、 HGF（ 5）趨化因子類（ 6）腫瘤壞死因子（ TNF）， 如： TNFα 、 TNFβ第八十四 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。2.激素類有胰島素、生長(zhǎng)激素 (shēnɡch225。nɡjīs249。)、心鈉素、人促腎上腺皮質(zhì)激素等。3.治療心血管及血液疾病的活性蛋白類（ 1）溶解血栓類， 如：人組織纖溶酶原激活劑（ tPA）（ 2）凝血因子類， 如：凝血因子 Ⅶ 、 凝血因子 Ⅷ 等。（ 3）生長(zhǎng)因子類， 如：促紅細(xì)胞生成素（ EPO）、血小板生成素（ TPO）等。（ 4）血液制品， 如：血紅蛋白、白蛋白等。第八十五 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。5.可溶性細(xì)胞因子受體類， 如： IL1受體、 TNF受體等。（ 1）細(xì)胞因子導(dǎo)向毒素， 如： IL1導(dǎo)向毒素、 EGF導(dǎo)向毒素（ 2）單克隆抗體導(dǎo)向毒素， 如：抗 B4封閉的蓖麻毒蛋白7.基因工程疫苗（ 1）基因工程亞單位疫苗， 如：乙肝疫苗（ 2）基因工程載體 (z224。itǐ)疫苗， 如：麻疹疫苗（ 3）核酸疫苗， 如：流感疫苗、單純皰疹病毒疫苗第八十六 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。第二節(jié) 幾種重要的生物技術(shù) (j236。sh249。)藥物簡(jiǎn)介一、人生長(zhǎng)激素是腦垂體前葉分泌的一種蛋白質(zhì)類激素，能促進(jìn)人和動(dòng)物的生長(zhǎng)，臨床上用來(lái)治療多種疾病。（一）分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)由 191個(gè)氨基酸組成的非糖基化蛋白質(zhì)，分子質(zhì)量 ，N端和 C末端均為苯丙氨酸。等電點(diǎn)為 。用糜蛋白酶或胰蛋白酶部分水解 hGH，其活性并不喪失，說(shuō)明 hGH活性不需要 (xūy224。o)整個(gè)分子。第八十七 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。H2NCOOH1191人生長(zhǎng)激素 (shēnɡch225。nɡjīs249。)的一級(jí)結(jié)構(gòu)53165182189phe第八十八 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。（二）生產(chǎn)工藝1.合成 hGH基因用化學(xué)合成法合成 hGH191肽編碼序列，將合成的基因片段用分子克隆技術(shù)分別進(jìn)行克隆化、擴(kuò)增和純化，并連接(li225。njiē)形成完整的 hGH基因。通過(guò)定點(diǎn)突變對(duì) hGH基因進(jìn)行改造。pINⅢompA3 質(zhì)粒含 Ipp啟動(dòng)子和外膜蛋白 ompA的信號(hào)肽（ α1肽）編碼順序，將經(jīng)過(guò)改造的 hGH基因克隆到 ompA信號(hào)肽編碼序列之后的 EcoRⅠ 位點(diǎn)和黏性末端用 DNA聚合酶的修平的HindⅢ 位點(diǎn)之間，得到表達(dá)質(zhì)粒 pSSM。第八十九 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。3.細(xì)菌轉(zhuǎn)化和表達(dá) hGH用 pSSM質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌 K802，獲得基因工程菌株，能高效 (ɡāoxi224。o)表達(dá)含信號(hào)肽的 hGH前體蛋白。前體蛋白分泌到細(xì)胞內(nèi)膜時(shí)，信號(hào)肽被切除，同時(shí)形成 2個(gè)二硫鍵，成熟 hGH分泌到細(xì)胞周質(zhì)內(nèi)。4.粗提取通過(guò)滲透休克處理，從周質(zhì)提取 hGH粗品，純度約 30%。5.純化通過(guò)等電點(diǎn)（ pI=）沉淀，硫酸銨鹽析， QSepharose Fast Flow陰離子交換柱色譜和 Sephacryl S200 柱凝膠過(guò)濾得 hGH純品，純度達(dá) 95%以上。第九十 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。（三）檢測(cè)方法重組 hGH為澄清透明液體 (y232。tǐ)， SDSPAGE測(cè)定分子量 ，反向 HPLC分析肽圖與標(biāo)準(zhǔn)品一致；等電聚焦電泳測(cè)定 pI=； N端氨基酸序列分析結(jié)果與文獻(xiàn)一致；點(diǎn)雜交法測(cè)定殘余DNA量 100pg； HPLC測(cè)定純度為 95%。第九十一 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。用大白鼠脛骨增寬法測(cè)定生物活性為 IU/mg蛋白。3.生物活性（ 1）促生長(zhǎng)作用 GH能直接 (zh237。jiē)或間接地刺激合成代謝過(guò)程，如細(xì)胞分裂、骨骼生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成，因此能促進(jìn)骨骼肌肉、結(jié)締組織、內(nèi)臟、皮膚、毛發(fā)和全身生長(zhǎng)。（ 2）脂解活性 GH能增強(qiáng)脂肪的氧化作用。（ 3）催乳素活性 GH與催乳素的氨基酸序列約有 50%的同源性，因此有弱的催乳素活性。（ 4）升血糖活性 GH能抑制葡萄糖向全身轉(zhuǎn)移。第九十二 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。（五）臨床應(yīng)用重組 hGH主要用于治療兒童（ 15歲以下）自發(fā)性垂體性侏儒癥。還可以用于治療燒傷、創(chuàng)傷、骨折、出血性潰瘍、組織 (zǔzhī)壞死、肌肉萎縮癥、骨質(zhì)疏松和肥胖癥等；對(duì)毛發(fā)生長(zhǎng)和乳汁分泌有良好效果；對(duì)免疫系統(tǒng)也有一定的增強(qiáng)作用。第九十三 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。第九十四 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。內(nèi)容 (n232。ir243。ng)總結(jié)第十章 植物 藥 用成分的提取。 ① 顏 色：大多 為 無(wú)色 (w s232。)或微 帶 淡黃色，也有少數(shù)具有其它 顏 色。 ② 氣味：大多數(shù)具有香氣或其它特異氣味。 搗 碎 → 冷 壓 → 靜置分 層 → 粗品。利用成分沸點(diǎn)不同，氣化先后次序不同 進(jìn) 行分離的。糖部分不同，其水解 產(chǎn) 物 難 易及 產(chǎn) 物均不同。 這類 成分分布得最廣的 還 是高等植物中，其中蕓香科和 傘 形科中分布最多。某些香豆素及其衍生物具有 熒 光，在堿性溶液中 熒 光更 顯 著。 側(cè)鏈 不 飽 和 鍵 吡喃 環(huán) 或 呋 喃 環(huán) 上的雙 鍵C C4雙 鍵第九十五 頁(yè) ，共九十五 頁(yè) 。