20xx年醫(yī)學(xué)專題—神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及應(yīng)用-資料下載頁
2024-11-15 13:23本頁面
【正文】 膜片鉗技術(shù)，細(xì)胞表面通道(tōngd224。o)和離子流動(dòng)，電變化。,第二十四頁，共三十頁。,研究手段及測(cè)量(c232。li225。ng)指標(biāo),4. 聚丙烯酰胺凝膠電泳：細(xì)胞內(nèi)蛋白，核酸變化 5. 染色：蘇木(sū m249。)素伊紅（HE）染色及尼氏（Nissl)染色，免疫組化染色。 6. 顯微測(cè)量：胞體平均直徑和胞體橢圓率，突起長(zhǎng)度及胞徑。 7. 熒光光度分析儀：MTT法測(cè)定細(xì)胞的OD值,第二十五頁，共三十頁。,培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的觀察(guānch225。)和鑒定,1. 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)存活的標(biāo)志：種植24小時(shí)后貼壁，漸長(zhǎng)出幾十微米的突起，神經(jīng)細(xì)胞大多都能存活。 2. 特殊培養(yǎng)階段(jiēdu224。n)：培養(yǎng)的9到12天之間，有較多神經(jīng)元死亡，以后存活下的細(xì)胞突起長(zhǎng)而多，互相形成網(wǎng)絡(luò)，電鏡下可見突觸。 3. 形態(tài)學(xué)觀察：神經(jīng)細(xì)胞胞體大，飽滿，核大，有立體感，折光性強(qiáng)，周圍有一圈光暈，軸突細(xì)長(zhǎng)均勻，直徑恒定。,第二十六頁，共三十頁。,第二十七頁，共三十頁。,研究(y225。njiū)范圍,細(xì)胞凋亡 細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài) 存活率 膜流動(dòng)性 基因產(chǎn)物表達(dá) 細(xì)胞內(nèi)酶活性 細(xì)胞內(nèi)離子含量(h225。nli224。ng)變化 細(xì)胞表面受體，等等,第二十八頁，共三十頁。,放映(f224。ngy236。ng)完畢,請(qǐng)多指教(zhǐji224。o),第二十九頁，共三十頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及應(yīng)用。由于該方法具有簡(jiǎn)化細(xì)胞生化環(huán)境、明確生長(zhǎng)條件、便于施加實(shí)驗(yàn)因素及容易獲得活體直接觀測(cè)結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，因而已成為研究神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的有效手段(shǒudu224。n)。組織塊培養(yǎng)→分離細(xì)胞培養(yǎng)→甚至單一型細(xì)胞培養(yǎng)。CNS灰質(zhì)、白質(zhì)、外周神經(jīng)節(jié)或神經(jīng)小段。該實(shí)驗(yàn)室共列出了三種神經(jīng)元限定性培養(yǎng)添加物的配方，代號(hào)分別為NNN3。用巴斯德吸管吹打20次，再用套有微量加樣器頭的加樣器吹打20次。請(qǐng)多指教,第三十頁，共三十頁
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