20xx年醫(yī)學(xué)專題—淋巴細(xì)胞標(biāo)志檢測-資料下載頁
2024-11-11 20:36本頁面
【正文】 細(xì)胞（target cell），可表現(xiàn)出對Target cell的破壞(p242。hu224。i)（裂解或凋亡）。 Apoptosis is a highly ordered process in which cells are systematically disassembled. Morphology（凋亡小體） Electrophoresis（DNA梯狀圖譜） FACS or ELISA,第五十六頁，共七十頁。,Enzymelinked immune spot,ELISPOT,酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法: 用抗原包被固相載體, + (刺激原 待檢細(xì)胞) 分泌的抗體固相抗原結(jié)合(使細(xì)胞吸附于固相) + 酶標(biāo)二抗 +底物顯色, 鏡下計數(shù)著色(zhu243。 s232。)斑點(diǎn)。 應(yīng)用：檢測抗體分泌細(xì)胞和其分泌抗體的量 特點(diǎn)：穩(wěn)定、特異；定性、定量。,第五十七頁，共七十頁。,Skin test in vivo,正常機(jī)體對某種抗原建立了細(xì)胞免疫后，如用相同的抗原做皮膚試驗(yàn)(sh236。y224。n)時，常出現(xiàn)陽性的遲發(fā)型超敏反應(yīng)。本試驗(yàn)(sh236。y224。n)不僅可以檢查受試者是否對某種抗原具有特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答能力，而且可以檢查受試者總體細(xì)胞免疫狀態(tài)。,第五十八頁，共七十頁。,B細(xì)胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig 和血型抗體量下降或缺如，患者對外源性抗原的應(yīng)答能力減弱或缺如，僅產(chǎn)生極低或不能產(chǎn)生特異性抗體。故臨床定量測定受檢者血清中各種Ig量和相應(yīng)血型抗體可判斷B細(xì)胞功能，也是診斷體液(tǐy232。)免疫缺陷的重要指標(biāo)。反之，如血清中一種或多種Ig或輕、重鏈片段異常增高，表明B細(xì)胞產(chǎn)生Ig的功能異常增高。,第五十九頁，共七十頁。,Skin test in vivo,Intradermal injection Immediate ～(within 20 min) Late ～ (at 412 hours) Delayed ～ (2448 hours),第六十頁，共七十頁。,Assays for Phagocyte function,Phagocyte function: 指吞噬細(xì)胞的吞噬活力(hu243。l236。) — 趨化（chemotaxis） 吞噬（taken into～） 胞內(nèi)消化（digest）,第六十一頁，共七十頁。,Chemotaxis of leucocyte,Chemotactic index (CI) = 趨化移動距離(A)/自發(fā)移動距離(B) 趨化指數(shù)與細(xì)胞的定向(d236。nɡ xi224。nɡ)移動能力呈正相關(guān) (瓊脂糖凝膠平板法),第六十二頁，共七十頁。,吞噬(Phagocytic)和殺菌(bactericidal)功能(gōngn233。ng)測定,白細(xì)胞+細(xì)菌共同溫育, 涂片, 染色鏡檢， 計算(j236。 su224。n)吞噬率和殺菌率。 吞噬率（phagocytic rate）%= 吞噬細(xì)菌的白細(xì)胞數(shù)/計數(shù)的白細(xì)胞數(shù)100% 殺菌率又稱吞噬指數(shù)（phagocytic index）%= 含著色菌體的白細(xì)胞數(shù)/計數(shù)的白細(xì)胞數(shù)100% Others：溶菌法、NBT還原法、化學(xué)發(fā)光法等,第六十三頁，共七十頁。,T細(xì)胞表面標(biāo)記和亞群檢測(jiǎn c232。)意義,用于T淋巴細(xì)胞總數(shù)的計算 判定T淋巴細(xì)胞的活化程度 了解CD3/CD4/CD8細(xì)胞分布正常與否，尤其CD4/CD8的比值是否下降、倒置？ T淋巴細(xì)胞是機(jī)體極其重要的一群免疫細(xì)胞，參與并維持宿主的細(xì)胞免疫功能。其檢測助于判斷(p224。ndu224。n)宿主的細(xì)胞免疫狀態(tài)，助于多種疾病的輔助診斷和發(fā)病機(jī)理的探明以及療效的評價等。,第六十四頁，共七十頁。,B細(xì)胞(x236。bāo)表面標(biāo)記和亞群檢測意義,檢測B淋巴細(xì)胞的成熟度和產(chǎn)生不同抗體細(xì)胞的分布。 了解產(chǎn)生免疫球蛋白B細(xì)胞種類和數(shù)量的變化，提示增殖、缺陷或惡性？ B細(xì)胞是機(jī)體(jītǐ)唯一能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，其參與并維護(hù)宿主的體液免疫防御功能。,第六十五頁，共七十頁。,NK、吞噬細(xì)胞檢測(jiǎn c232。)意義,NK細(xì)胞為自然殺傷細(xì)胞，即不受細(xì)胞表面MHC限制，能直接殺傷效應(yīng)細(xì)胞。具廣譜的抗腫瘤、感染（胞內(nèi)寄生）和免疫調(diào)節(jié)。 Phagocyte胞質(zhì)具多種酶，通過(tōnggu242。)氧化或非氧化途徑殺滅病原體，抗感染。若其功能低下，助擴(kuò)散、慢性肉芽腫形成和反復(fù)感染～。,第六十六頁，共七十頁。,小結(jié): 免疫細(xì)胞種類多，彼此發(fā)揮相應(yīng)的功能 分析時需要分離與純化其相應(yīng)的細(xì)胞。 免疫細(xì)胞的分離是利用不同(b249。 t243。nɡ)細(xì)胞的比重、 黏附力及表面標(biāo)志物的不同；方法包括花 環(huán)形成、尼龍毛粘著和免疫學(xué)原理等。 免疫細(xì)胞功能檢測包括：其數(shù)量、成熟度 （標(biāo)志物表達(dá)）和其分泌活性物質(zhì)的能力 與其功效的檢測。 皮膚試驗(yàn)?zāi)芊从硻C(jī)體細(xì)胞免疫功能。,第六十七頁，共七十頁。,思考題： 免疫細(xì)胞主要指哪些細(xì)胞？分離的方法及其 評價您知道嗎？ 什么是細(xì)胞表面標(biāo)志？具何作用？如何檢測？ 您是否(sh236。 fǒu)記住T、B、NK和單核細(xì)胞的主要表面 標(biāo)志？ T/B細(xì)胞功能檢測包括哪些內(nèi)容？ 為什么皮膚試驗(yàn)可用于機(jī)體細(xì)胞免疫功能監(jiān) 測？,第六十八頁，共七十頁。,謝 謝,第六十九頁，共七十頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),細(xì)胞免疫學(xué)檢測 （cellular immunoassay） 一、淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測 (Assay of membran molecules for lymphocytes）。淋巴細(xì)胞純度98%, 單核細(xì)胞純度78%。③另外(l236。nɡ w224。i)連續(xù)兩次過柱分選可進(jìn)一步提高分選細(xì)胞純度，通常可達(dá)95－99％。原特異性地提呈給T淋巴細(xì)胞而產(chǎn)生抗原特異性免疫應(yīng)。計算吞噬率和殺菌率。測,第七十頁，共七十
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