【正文】 直讀光度計，使得火焰光度法應(yīng)用范圍進(jìn)一步擴大。2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試生化檢驗輔導(dǎo)：火焰分光光度法的應(yīng)用火焰分光光度法主要用于堿金屬和堿土金屬元素的定量分析。方法簡單迅速，組分影響較小，取樣量小，用一份溶液即可進(jìn)行多種元素分析，每毫升10微克濃度的鈉溶液也可測定。此法不僅可作為一個光化學(xué)分析方法獨立使用，而且可作為一個有特色的光檢測器，與氣相色譜儀聯(lián)用，或作為一種試樣原子化裝置，用于原子吸收光譜法中。2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試血液檢驗復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓標(biāo)本的采集選擇骨髓標(biāo)本的采集選擇骨髓標(biāo)本大部分采用穿刺法吸取。骨髓穿刺部位選擇一般要從以下幾個方面考慮：①骨髓腔中紅骨髓豐富；②穿刺部位應(yīng)淺表、易定位；③應(yīng)避開重要臟器。臨床上常用的穿刺部位包括胸骨、棘突、髂骨、脛骨等處。髂骨后上棘此處骨皮質(zhì)薄，骨髓腔大，進(jìn)針容易，骨髓液豐富，被血液稀釋的可能性小，故為臨床上首選的穿刺部位。2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試血液檢驗復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓涂片的檢查骨髓涂片的檢查（1）普通光鏡低倍鏡檢驗：判斷骨髓增生程度；估計巨核細(xì)胞系統(tǒng)增生情況；觀察涂片邊緣、尾部、骨髓小粒周圍，有無體積較大或成堆分布的異常細(xì)胞。（2）油鏡：選擇滿意的片膜段，觀察200～500個細(xì)胞，按細(xì)胞的種類、發(fā)育階段分別計算，并計算它們各自的百分率；仔細(xì)觀察各系統(tǒng)的增生程度和各階段細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量的變化。2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試血液檢驗復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓象的分析與報告骨髓象的分析與報告包括骨髓有核細(xì)胞增生程度、粒細(xì)胞與有核紅細(xì)胞比例、粒系統(tǒng)細(xì)胞改變、紅系統(tǒng)細(xì)胞改變、巨核系統(tǒng)細(xì)胞改變、淋巴系統(tǒng)細(xì)胞改變、單核系統(tǒng)細(xì)胞改變和其他血細(xì)胞改變。2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試綜合知識輔導(dǎo)：均相酶免疫測定均相酶免疫測定：屬于競爭結(jié)合分析方法。①酶增強免疫測定技術(shù)（EMIT）：了解其基本原理，反應(yīng)后酶活力大小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。②克隆酶供體免疫分析：DNA重組技術(shù)可分別合成某種功能酶（如βD半乳糖苷酶）分子的兩個片段，大片段稱為酶受體（EA），小分子稱作酶供體（ED），兩者單獨均無酶活性，一定條件下結(jié)合形成四聚體方具酶活性。2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試綜合知識輔導(dǎo)：異相酶免疫測定異相酶免疫測定：又分為液相和固相酶免疫測定。①液相酶免疫測定：其測定靈敏度與放射免疫方法相近，近年有取代放射免疫方法的趨勢。②固相酶免疫測定：如常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）2012年醫(yī)學(xué)檢驗考試生化檢驗輔導(dǎo)：肝硬化的臨床意義肝硬化代償期患者血清ALT可輕度增高或正常，失代償期ALT可持續(xù)升高。膽汁淤積性肝硬化ALT活性較高可與黃疸平行，AST升高不及ALT顯著。肝硬化病變累及線粒體時，多數(shù)AST升高程度超過ALT。2012年醫(yī)學(xué)檢驗基礎(chǔ)知識輔導(dǎo)：尿的方法學(xué)評價尿色和透明度判斷，受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結(jié)晶的影響。臨床應(yīng)用僅作參考2012年醫(yī)學(xué)檢驗基礎(chǔ)知識輔導(dǎo)：尿的質(zhì)量控制，鹽類結(jié)晶析出、尿膽原轉(zhuǎn)變?yōu)槟蚰懰亍⒓?xì)菌增殖和腐敗、尿素分解，均可使尿顏色加深、混濁度增高。2012年醫(yī)學(xué)檢驗基礎(chǔ)知識輔導(dǎo)：尿的生理性變化（1）代謝產(chǎn)物：生理性影響尿顏色主要是尿色素、尿膽素（URB）、尿膽原（URO）等。（2）飲水及尿量：大量飲水、尿量多則尿色淡；尿色深見于尿量少、飲水少或運動、出汗、水分丟失。（3）藥物的影響：如服用核黃素、呋喃唑酮、痢特靈、黃連素、牛黃、阿的平使尿呈黃色或深黃色；番瀉葉、山道年等使尿呈橙色或橙黃色；酚紅、番瀉葉、蘆薈、氨基匹林、磺胺藥等使尿呈紅色或紅褐色。（4）鹽類結(jié)晶及酸堿度：生理性尿混濁的主要原因是含有較多的鹽類，常見有：①尿酸鹽結(jié)晶：在濃縮的酸性尿遇冷時，可有淡紅色結(jié)晶析出。②磷酸鹽或碳酸鹽結(jié)晶：尿呈堿性或中性時，可析出灰白色結(jié)晶。2012年醫(yī)學(xué)檢驗免疫檢驗考試輔導(dǎo)：腫瘤壞死因子的生物效應(yīng)腫瘤壞死因子的生物效應(yīng)：TNF對多種腫瘤細(xì)胞均有殺傷或抑制作用，敏感性因腫瘤細(xì)胞類型而異；TNF呈劑量依賴性地抑制病毒介導(dǎo)的細(xì)胞病變的發(fā)展，對RNA病毒和DNA病毒均有抑制作用；TNF能夠增強T細(xì)胞產(chǎn)生以IL2為主的淋巴因子，提高IL2R的表達(dá)水平，促進(jìn)T細(xì)胞增殖；還能促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化和產(chǎn)生抗體；TNF有中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞趨化作用，并使之活化和脫顆粒，釋放炎癥介質(zhì)；TNF可刺激成骨細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶活性，誘導(dǎo)成骨細(xì)胞吸收骨質(zhì)、使軟骨細(xì)胞進(jìn)行軟骨更新，抑制軟骨形成。2012年醫(yī)學(xué)檢驗免疫檢驗考試輔導(dǎo)：腫瘤壞死因子的應(yīng)用研究腫瘤壞死因子的應(yīng)用研究：由于TNF的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能，TNF療法的研究已被許多國家開展。動物實驗和臨床經(jīng)驗表明，TNF對某些腫瘤具有明顯的抑制作用，但副作用大，建立合理的用藥方案及治療措施，可望降低用量，減輕副作用，達(dá)到最佳治療效果。2012年醫(yī)學(xué)檢驗血液檢驗輔導(dǎo)：紅細(xì)胞鐮變試驗（1）原理：在低氧分壓條件下，HbS轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原狀態(tài)后溶解度降低，從而聚合成短棒狀凝膠使紅細(xì)胞變形，呈鐮刀狀。結(jié)果：陰性，無鐮變細(xì)胞。（2）臨床意義：陽性見于鐮狀細(xì)胞貧血（HbS病），HbBart、HbI病可見少量鐮狀細(xì)胞。2012年醫(yī)學(xué)檢驗知識輔導(dǎo)：埃希菌屬的常規(guī)檢驗項目CDC將大腸埃希氏菌O157：H7列為常規(guī)檢測項目EHEC的血清型》50種，最具代表性的是O157：，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見的病原菌，分離率占血便的40%，8三個月O157：H7感染的發(fā)生率最高。且0157是4歲以下兒童急性腎功衰的主要病原菌，所以CDC提出應(yīng)將大腸埃希氏菌0157：H7列為常規(guī)檢測項目。2012年醫(yī)學(xué)檢驗知識輔導(dǎo)：埃希菌屬的腸道感染埃希菌屬的腸道感染：致病性大腸埃希菌有下列五個病原群。（1）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水瀉）。（2）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。（3）腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）：可侵入結(jié)腸黏膜上皮，引起志賀樣腹瀉（粘液膿血便）。（4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）：又稱產(chǎn)志賀樣毒素（VT）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（HUS）。臨床特征為嚴(yán)重的腹痛、痙攣，反復(fù)出血性腹瀉，伴發(fā)熱、嘔吐等。嚴(yán)重者可發(fā)展為急性腎衰竭。（5）腸粘附（集聚）型大腸埃希菌（EAggEC）：也是新近報道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。2012年醫(yī)學(xué)檢驗臨床檢驗技師考試綜合輔導(dǎo)資料：埃希菌屬的概念埃希菌屬包括5個種，即大腸埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。臨床最常見的是大腸埃希菌。大腸埃希菌俗稱大腸桿菌，大多數(shù)菌株是人類和動物腸道正常菌群。2012年醫(yī)學(xué)檢驗臨床檢驗技師考試綜合輔導(dǎo)資料：腸桿菌科的鑒定（1）初步鑒定：原則是：①確定腸桿菌科的細(xì)菌，應(yīng)采用葡萄糖氧化發(fā)酵試驗及氧化酶試驗與弧菌科和非發(fā)酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細(xì)菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗，將腸桿菌科的細(xì)菌分為苯丙氨酸脫氨酶陽性、葡萄糖酸鹽利用試驗陽性和兩者均為陰性反應(yīng)三個類群；③選擇生化反應(yīng)進(jìn)行屬種鑒別。將選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基上的可疑菌落分別接種克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）和尿素靛基質(zhì)動力（MIU）復(fù)合培養(yǎng)基管中，并根據(jù)其六項反應(yīng)結(jié)果，將細(xì)菌初步定屬。（2）最后鑒定：腸桿菌科各屬細(xì)菌的最后鑒定是根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果定屬、種，或再用診斷血清做凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。2012年醫(yī)學(xué)檢驗免疫檢驗考試輔導(dǎo)：細(xì)胞因子的類型細(xì)胞因子分類按其作用大致可分為免疫調(diào)節(jié)因子和免疫調(diào)控因子兩大類。主要的細(xì)胞因子有：白細(xì)胞介素、干擾素、生長因子、趨化因子家族、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、轉(zhuǎn)化因子家族以及其他細(xì)胞因子等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗免疫檢驗考試輔導(dǎo)：細(xì)胞因子共同特性（1）化學(xué)性質(zhì)大都為糖蛋白。（2）細(xì)胞因子可以旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌的方式發(fā)揮作用。（3）一種細(xì)胞可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，不同類型的細(xì)胞可產(chǎn)生一種或幾種相同的細(xì)胞因子。2012年醫(yī)學(xué)檢驗血液檢驗復(fù)習(xí)指導(dǎo)：血象特點血液檢驗復(fù)習(xí)指導(dǎo)血象：血紅蛋白、紅細(xì)胞均減少，以血紅蛋白減少更為明顯。輕度貧血時紅細(xì)胞形態(tài)無明顯異常，中度以上貧血時紅細(xì)胞體積減小，中心淡染區(qū)擴大，嚴(yán)重時紅細(xì)胞可呈環(huán)狀，并有嗜多色性紅細(xì)胞及點彩紅細(xì)胞增多。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正常。白細(xì)胞計數(shù)及分類一般正常。血小板計數(shù)一般正常。2012年醫(yī)學(xué)檢驗免疫檢驗考試輔導(dǎo)：單向擴散試驗單向擴散試驗：瓊脂內(nèi)混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內(nèi)自由擴散，如抗原和相應(yīng)抗體結(jié)合，則形成沉淀環(huán)。試管法：%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散，在抗原抗體比例恰當(dāng)位置形成沉淀環(huán)。平板法：%瓊脂糖內(nèi)，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴散，24～48h后可見孔周圍出現(xiàn)沉淀環(huán)，測定環(huán)的直徑或面積計算標(biāo)本中待測抗原的濃度。有兩種計算方法：l）Mancini曲線：適用大分子抗原的和長時間擴散（》48h）的結(jié)果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系c/d2=k.（其中c為抗原濃度 d為沉淀環(huán)直徑 k為常數(shù)）單向擴散試驗檢測時的注意點：（1）抗血清必須特異性強、效價高、親和力強，在良好條件下保存。（2）每次測定都必須作標(biāo)準(zhǔn)曲線。（3）每次測定時必須用質(zhì)控血清作質(zhì)控。（4）注意雙環(huán)現(xiàn)象（出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分）。（5）應(yīng)用單克隆抗體測量多態(tài)性抗原時，測定值偏低；用多克隆抗體測量單克隆病時，測定值偏高2012年醫(yī)學(xué)檢驗免疫檢驗考試輔導(dǎo)：雙向擴散試驗雙向擴散試驗：在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U散，在最恰當(dāng)?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線，根據(jù)沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系，可對抗原或抗體作出定性分析。雙向擴散試驗也分為試管法和平板法。試管法：在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間，加一層普通瓊脂，讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴散，在抗原、抗體濃度最適時形成沉淀線。平板法：是在瓊脂板上相距3～5mm打一對孔，或者梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相應(yīng)孔中加入抗原或抗體，待其自由擴散后，抗原、抗體形成可見的沉淀線。根據(jù)沉淀線的位置可作如下分析：①抗原、抗體是否存在及其相對含量。一般沉淀線靠近抗原孔，提示抗體量大，沉淀線靠近抗體孔，提示抗原量大。②抗原、抗體相對分子量的分析；抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴散，其速度受分子量影響。分子量小者，擴散快，反之較慢。由于慢者擴散圈小，局部濃度較大，形成沉淀線彎向分子量大的一方。如若兩者分子量相等，則形成直線。③抗原性質(zhì)的分析，受檢的抗原性質(zhì)可能完全相同、部分相同、完全不同，沉淀弧可分別出現(xiàn)完全融合、部分融合、不融合三種情況；④抗體效價的滴定?？贵w效價是抗原、抗體經(jīng)過自由擴散形成沉淀線，出現(xiàn)沉淀線的最高抗體稀釋度為該抗體的效價。2012年醫(yī)學(xué)檢驗血液檢驗復(fù)習(xí)指導(dǎo)：酸化甘油溶血試驗（1）原理：當(dāng)甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時，可阻止其中的水快速進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，使溶血過程緩慢。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜脂質(zhì)減少。當(dāng)紅細(xì)胞膜蛋白及膜脂質(zhì)有缺陷時，導(dǎo)致紅細(xì)胞懸液的吸光度降至50%的時間（AGLT50）明顯縮短。參考值：AGLT50大于l800s（30min）（2）臨床意義：減少見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥（25～150s）、腎功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶貧和妊娠婦女。2012年醫(yī)學(xué)檢驗血液檢驗復(fù)習(xí)指導(dǎo)：紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能：紅細(xì)胞膜含脂類40%，蛋白質(zhì)50%，碳水化合物10%.膜的主要蛋白有主體蛋白和外周蛋白。后者包括收縮蛋白、肌動蛋白、錨蛋白和區(qū)帶（～）等，即骨架系統(tǒng)，起支架作用，對維持紅細(xì)胞的形狀、穩(wěn)定性和變形性有重要作用。膜的主要脂類為磷脂和膽固醇，起屏障和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性作用。：屏障作用和可變性；半透性；免疫性；受體特性：激素類受體、遞質(zhì)類受體、丙種球蛋白受體、病毒受體、EP0受體和鐵蛋白受體等。：紅細(xì)胞能量代謝紊亂；紅細(xì)胞膜有遺傳性缺陷；酶缺陷。2012年醫(yī)學(xué)檢驗血液檢驗輔導(dǎo)：血紅蛋白病的定義與分類血紅蛋白病的定義與分類：血紅蛋白病是一組由于生成血紅蛋白的珠蛋白肽鏈（α、β、γ、δ）的結(jié)構(gòu)異?；蚝铣呻逆溗俾实母淖?，而引起血紅蛋白功能異常所致的疾病。血紅蛋白病多為遺傳性，如：因控制遺傳的珠蛋白基因發(fā)生突變所致的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白??；因指導(dǎo)珠蛋白合成速率的遺傳基因缺陷所致的珠蛋白生成障礙性貧血或稱海洋性貧血。另外，也可見獲得性血紅蛋白病。通常是由接觸或誤服化學(xué)藥物所致。常見的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白病是因合成的珠蛋白的氨基酸序列改變而引起血紅蛋白功能或理、化性質(zhì)異常的疾病，如：引起血紅蛋白異常聚合的HbS?。徊环€(wěn)定血紅蛋白癥、高鐵血紅蛋白血癥等。常見的珠蛋白生成障礙性貧血為α或β珠蛋白生成障礙性貧血。也有多種基因異常導(dǎo)致的血紅蛋白病，如HbE、Hb Constant Spring、Hb Lepore等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗臨床檢驗技師輔導(dǎo)：溶血空斑形成試驗溶血空斑形成試驗：經(jīng)典的溶血斑試驗用于檢測實驗動物抗體形成細(xì)胞的功能，其原理是將綿羊紅細(xì)胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾細(xì)胞，加入SRBC及補體，混合在溫?zé)岬沫傊芤褐校瑵苍谄矫髢?nèi)或玻片上，使成一蒲層，置37℃溫育。由于脾細(xì)胞內(nèi)的抗體生成細(xì)胞可釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補體參與下導(dǎo)致SRBC溶血，形成一個肉眼可見的圓形透明溶血區(qū)而成為溶血空斑（plaque）。每一個空斑表示一個抗體形成細(xì)胞，空斑大小表示抗體生成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少。這種直接法所測的細(xì)胞為IgM生成細(xì)胞，其他類型Ig由于溶血效應(yīng)較低，不能直接檢測，可用間接檢測法，即在小鼠脾細(xì)胞和SRBC混合時，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體生成細(xì)胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復(fù)合物，此時能活化補體導(dǎo)致溶血，稱間接空斑試驗。但是上述直接和間接空斑形成試驗都只能檢測抗紅細(xì)胞抗體的產(chǎn)生細(xì)胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產(chǎn)生情況。如果用一定方法將SRBC用其它抗原包被，則可檢查與該抗原相應(yīng)的抗體產(chǎn)生細(xì)胞，這種非紅細(xì)胞抗體溶血空斑試驗稱為空斑形成試驗，它的應(yīng)用范圍