【正文】 ? 不同的 MEK選擇性地激活不同的亞型 MEK6 — 共同的激活劑 MEK3 — 激活 p38 α, γ , δ 第一百零二頁，共一百二十三頁。 MEKKs: ? MEKK1~3參與 p38激活 MEKK1→MEK4 → p38 (3T3細(xì)胞 ) MEKK3→MEK3 → p38 (轉(zhuǎn)化細(xì)胞 ) ? MLK家族的 4個成員參與 p38激活 ? 其他激酶 Tp12 ASK TAK 第一百零三頁，共一百二十三頁。 MLK家族成員含有 3個結(jié)構(gòu)域： — SH3域 — 亮氨酸拉鏈 — 小分子 G蛋白結(jié)合域 參與 p38激活的 4個成員是： ? MUK/ZPK/DLK ? MTK1/MEKK4 ? MLK2/MST ? MLK3/PTK/SPRK 第一百零四頁，共一百二十三頁。 第一百零五頁，共一百二十三頁。 上游調(diào)節(jié)因子： Rac、 Cdc4 Rho家族 的小分子GTPase是 p38途徑的較強(qiáng)的調(diào)節(jié)因子。 Rac/Cdc42 → PAK → p38 第一百零六頁，共一百二十三頁。 來自細(xì)胞外表的活化： 異三聚體 G蛋白可激活 p38途徑，但激活機(jī)制因細(xì)胞不同而異。 M1乙酰膽堿受體 Gq/11 M2乙酰膽堿受體 Gi β腎上腺素受體 Gs (HEK293細(xì)胞 ) α1A腎上腺素受體 Gs (PC12細(xì)胞 ) β腎上腺素受體 Gi (ARVM細(xì)胞 ) 第一百零七頁，共一百二十三頁。 激活 p38途徑的物理、化學(xué)應(yīng)激： ? 氧化應(yīng)激 (巨噬細(xì)胞 ) ? 低滲壓 (HEK293細(xì)胞 ) ? 紫外線輻射 (PC12細(xì)胞 ) ? 低氧 (牛肺動脈成纖維細(xì)胞 ) ? 循環(huán)擴(kuò)張 (腎小球膜細(xì)胞 ) 第一百零八頁，共一百二十三頁。 亞細(xì)胞定位： 細(xì)胞核、胞質(zhì) (免疫熒光顯微鏡 ) 應(yīng)激反響，如心肌缺血、低氧時， 胞質(zhì) → 核 p38的抑制劑： 吡啶咪唑 — 結(jié)合于 ATP結(jié)合位點延伸袋 p38 α, β — 敏感 p38 γ, δ — 不敏感 第一百零九頁，共一百二十三頁。 2. p38蛋白激酶的作用底物和滅活 作用底物 : ? 細(xì)胞骨架 細(xì)胞應(yīng)激 — 微管相關(guān)蛋白 (tau) stathmin ( 癌蛋白 18〕 ? 細(xì)胞質(zhì)蛋白 刺激血小板 — cPLA2 血管緊張素 Ⅱ — Na+/H+交換體 第一百一十頁，共一百二十三頁。 ? 轉(zhuǎn)錄因子 ATF1/2 (activation transcription factor 1/2) CHOP10 (C/EBPhomologus protein 10 ) MEF2C (myocyte enhancer factor 2C) Max (myc associated factor X ) MAPKAPK 2/3 MNK1/2 (MAPKinteracting kinase 1/2 ) PRAK (p38regulated/activated kinase) 第一百一十一頁，共一百二十三頁。 p38蛋白激酶滅活： 蛋白激酶磷酸酶 M3/M6 3. p38 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的功能 主要參與應(yīng)激反響，此外 ? 血細(xì)胞細(xì)胞因子的生成 (單核細(xì)胞： IL1， TNFα) ? 細(xì)胞凋亡 ? 免疫反響調(diào)控 第一百一十二頁，共一百二十三頁。 p38亞型的作用： p38 α ：特異地參與 LPS介導(dǎo)的細(xì)胞反響 如黏附、 NFκB活化、 TNFα合成 誘導(dǎo)凋亡 p38 β ：促進(jìn)細(xì)胞存活 總之， p38在細(xì)胞增殖、分化和生存過程中起作用。 第一百一十三頁，共一百二十三頁。 〔四〕 MKK5/ERK5通路 ERK5 (BMK, big mitogen activated kinase)： ? MAPK家族中分子量最大的成員 故有 BMK之稱 ? 與 ERK2有 52%的同源性 ? 雙磷酸化三肽模體為 TEY MEK： MEK5 (α, β 兩種亞型 ) 第一百一十四頁，共一百二十三頁。 活化和上游調(diào)節(jié)因子 ? 生長因子 ? 應(yīng)激 (如氧化應(yīng)激、高滲透壓 ) ? 血清 ? Src和 Ras是 ERK5信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的調(diào)節(jié)因子 ? GPCR (Gq和 G12/13)也調(diào)節(jié) ERK5活性 ? MKKK— MEKK Tpl2 第一百一十五頁，共一百二十三頁。 ERK5的作用底物： ? MEF2家族 (A, C, D) ? Ets樣轉(zhuǎn)錄因子 Sap1a ( serum response factor acessory protein 1a) 抑制劑： ? 無特異性的抑制劑 ? MKP1/3 使 MEK5脫磷酸 ? 高濃度 PD98059和 U0126抑制 MEK5活性 第一百一十六頁，共一百二十三頁。 〔五〕孤兒 MAPK 1. ERK3亞型 ? 研究最少 ? 分為 ERK3α 和 ERK3β (74% 同源性 ) ? 單一磷酸化位點 (Ser) ? 組成性定位于核 第一百一十七頁，共一百二十三頁。 2. ERK7亞型 ? 催化區(qū)與 ERK2有 40%的同源性 ? 雙磷酸化三肽模體 — ThrGluTyr ? 具有自我調(diào)節(jié)功能 ? 氯通道相關(guān)蛋白可與非催化區(qū)結(jié)合 ( chloride intracellular channel protein 3 CLIC3) 第一百一十八頁，共一百二十三頁。 2. NLK ( Nemolike kinase) ? 催化區(qū)與 ERK2有超過 45%的同源性 ? 缺少 Tyr磷酸化位點 ? Lit1 (線蟲的同源體 ) 是 Mom4 (蠕蟲TAK1的同源體 ) 的下游 ? 下調(diào) Wnt信號 第一百一十九頁，共一百二十三頁。 2. MOK ( MAPK/MAK/MRK overllaping kinase) ? 與 ERK2有 30%的同源性 ? 雙磷酸化位點 ? 佛波酯醇和 OA增加其活性 ? 相關(guān)激酶 MAK ( male germ cell associated kinase) MRK ( MAKrelated kinase) 第一百二十頁，共一百二十三頁。 第一百二十一頁，共一百二十三頁。 第一百二十二頁，共一百二十三頁。 內(nèi)容總結(jié) 第九章。缺乏氮源時，橢圓型的雙倍酵母進(jìn)行不對稱的細(xì)胞分裂以產(chǎn)生一個細(xì)而長的子細(xì)胞，后者又不斷產(chǎn)生長的子細(xì)胞。第一個 — Sln1(His激酶域和接受域 )。1991年鑒定出的新的 MAPK。 ? 不同的亞型受不同的調(diào)節(jié)。 MKK4與 MKK7在人和鼠組織中廣泛表達(dá)，但在不同的組織起表達(dá)的豐度不同。 ? N末端、 C末端延伸短，與能看出其他激酶無同源性。應(yīng)激反響，如心肌缺血、低氧時， 第一百二十三頁，共一百二十三頁。