4-分子流行病學(xué)-資料下載頁
2024-10-05 20:36本頁面
【正文】 否特異、穩(wěn)定，標(biāo)本采集是否方便，是否有靈敏而特異的檢測(cè)方法 ? 測(cè)量方法 簡便、成熟，靈敏度和特異度高 ? 調(diào)查方法與樣本 樣本有代表性，適量 ? 結(jié)果與分析 設(shè)計(jì)中要預(yù)測(cè)研究結(jié)果，并根據(jù)選擇的測(cè)量指標(biāo)和測(cè)量方法確定資料分析方法 ? 質(zhì)量控制 注重現(xiàn)場(chǎng)質(zhì)量控制的同時(shí)，特別重視實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制 ? 本卷須知 預(yù)實(shí)驗(yàn) 第四十九頁，共六十頁。 ? 基因型 (genotype)：具有相同遺傳結(jié)構(gòu)的一類生物體。 ? 克隆 (clone)：廣義 許多生物特征〔表型或基因型〕相同的生物體，雖然別離來源、地區(qū)、時(shí)間可能不同，但它們的這些特征幾乎只能解釋為共同來源，那么這些生物體稱為一個(gè)克隆。狹義 一個(gè)生物體的無性繁殖群體，稱為一個(gè)克隆。 ? 克隆群 (clone cluster)：遺傳關(guān)系非常緊密的多個(gè)生物克隆，可以劃分為一個(gè)克隆群。 第五十頁，共六十頁。 第五十一頁，共六十頁。 實(shí)例一 ? 研究題目 人漢坦病毒病〔 SNV〕與病毒宿主關(guān)系確實(shí)定 ? 測(cè)量標(biāo)志 〔 SNV〕 /鹿鼠組織、血清、肺；死者取肺組織、 ? 存活者采集外周血單核細(xì)胞〔介質(zhì)〕 ? 測(cè)量方法 PCR、 Western blotting ? 研究設(shè)計(jì) SNV 病毒的序列患者住宅的鹿鼠、附近對(duì)照住宅的 ? 鹿鼠、遠(yuǎn)處對(duì)照住宅的鹿鼠，所攜帶 SNV 病毒的序列比對(duì)；用蛋白印跡法進(jìn)行 SNV 的 IgM和 IgG抗體檢測(cè)患者和死亡者的感染情況；用反轉(zhuǎn)錄 PCR(RT－ PCR)擴(kuò)增 SNV RNA 中的特征片段 ,比較該片段上患者體內(nèi)病毒與鼠攜帶病毒的基因序列，應(yīng)用種系發(fā)生分析法判定病毒與宿主的聯(lián)系。 ? 結(jié)果分析 從基因水平證明了該病毒是由鹿鼠傳染給人的；證明暴露地點(diǎn)為家庭居住地 ? 結(jié)論：本研究將先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)和流行病學(xué)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查有機(jī)地結(jié)合起來。采用分子流行病學(xué)方法 ,有力地證實(shí)了 SNV 病毒是經(jīng)鹿鼠傳播給人的 ,并明確了暴露地點(diǎn) ,有助于深入研究相關(guān)因素 ,以有效地控制漢坦病毒肺綜合征的發(fā)生與流行。 第五十二頁，共六十頁。 實(shí)例二 ? 研究目的 研究布魯氏菌的生物標(biāo)志 ? 測(cè)量指標(biāo) 布魯氏菌的核苷酸序列同源性 ? 測(cè)量方法 基因外重復(fù)回文 PCR(REP－ PCR)、細(xì)菌內(nèi)基 ? 因重復(fù)一致 PCR(ERIC－ PCR)和核酸測(cè)序 ? 研究設(shè)計(jì) 研究者選擇了來自近 20 個(gè)國家和地區(qū)的 34 株不同種、不同生物型的布氏桿菌，這些細(xì)菌分屬于牛種、豬種、犬種、沙林鼠種、羊種、綿羊附睪種等 6 種 7 個(gè)生物型。進(jìn)行分子水平的進(jìn)一步分型研究。 ? 結(jié)果分析 用 REP－ PCR技術(shù)可把 34 種布氏桿菌進(jìn)一步分為 9 個(gè)型，后以 ERIC－ PCR又可分出 13 個(gè)型，綜合這兩種方法可以區(qū)除牛種的 3 型和 9 型生物型以外的各種不同布氏桿菌。 ? 結(jié)論 本案例說明分子生物學(xué)技術(shù)比表型分析方法更加敏感，即使是屬于同種同型的菌株也可進(jìn)一步區(qū)分為不同的基因型，可以對(duì)傳染源和傳播途徑進(jìn)行進(jìn)一步的追溯。該方法的使用可望為布氏桿菌病的分子流行病學(xué)研究提供了簡單和實(shí)用的生物學(xué)標(biāo)志。 第五十三頁，共六十頁。 應(yīng)用前景 ?傳染病預(yù)防控制 ?慢性非傳染病預(yù)防控制 ?健康狀態(tài)研究 第五十四頁，共六十頁。 傳染病預(yù)防控制 病原體耐藥、新病原體的出現(xiàn)、病原體變異、發(fā)病譜的變化、傳染源的判定、傳播途徑復(fù)雜化、疫苗免疫效果下降等，大多需要應(yīng)用分子流行病學(xué)來解決。 ? 病原體研究 ? 人群感染和傳染源研究 ? 傳播途徑研究 ? 人群易感性研究 ? 疫苗及免疫預(yù)防制劑的研究 ? 防治對(duì)策和措施研究及其效果評(píng)價(jià) 第五十五頁，共六十頁。 慢性非傳染病預(yù)防控制 ? 暴露測(cè)量更加科學(xué)、準(zhǔn)確；如將暴露測(cè)量分為外暴露、內(nèi)暴露、生物作用劑量等； ? 細(xì)微效應(yīng)可以覺察，可以測(cè)定健康疾病連續(xù)帶不同階段的效應(yīng)指標(biāo)； ?易感性研究深入到基因和分子水平； ? 防治措施效果評(píng)價(jià)更加有效。 第五十六頁，共六十頁。 健康狀態(tài)研究 ?以生物標(biāo)志為根底的健康狀態(tài)分布及其影響因素研究正在受到人們的重視； ?由于健康相關(guān)生物標(biāo)志的精確測(cè)量 ， 使健康促進(jìn)從模糊走向科學(xué)； ? 隨著分子流行病學(xué)對(duì)不同生物標(biāo)志分布及其影響因素研究的深入 ， 人們對(duì)健康和疾病的發(fā)生 、 開展過程將有更加深入 、 細(xì)致的了解 。 第五十七頁，共六十頁。 展 望 ?分子流行病學(xué)是一門新興的邊緣學(xué)科，尚有很多不成熟的地方，但已顯示出了強(qiáng)大的生命力。隨著先進(jìn)的生物標(biāo)志檢測(cè)技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、信息技術(shù)和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法等的不斷引入，分子流行病學(xué)將把流行病學(xué)提高到一個(gè)嶄新階段。 第五十八頁，共六十頁。 第五十九頁，共六十頁。 內(nèi)容總結(jié) 動(dòng)物病毒性疾病分子流行病學(xué)研究方法。 1972年 Kilbourne 博士在美國傳染病學(xué)會(huì)第 10次年會(huì)上作了題為 “流感的分子流行病學(xué)〞的報(bào)告。傳統(tǒng)流行病學(xué)：可說明暴露與發(fā)病之間的聯(lián)系，但不能揭示疾病發(fā)生的機(jī)制〔黑匣子〕?；虮磉_(dá)異常和代謝異常。調(diào)查方法與樣本 樣本有代表性，適量。克隆群 (clone cluster)：遺傳關(guān)系非常緊密的多個(gè)生物克隆，可以劃分為一個(gè)克隆群。謝謝 第六十頁，共六十頁。
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