黨支部制度(精華版)-資料下載頁
2024-09-28 18:03本頁面
【正文】 二倍體，并使其處于無誘導(dǎo)物的條件下，測(cè)定結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)情況。若其結(jié)果無組成型合成，則說明一定是調(diào)節(jié)基因突變；若有組成型合成，則是操縱基因突變。 ⑵原理。若調(diào)節(jié)gene突變，則其中正常染色體可合成活性阻遏蛋白，與正常及突變?nèi)旧w上的操縱基因結(jié)合，阻遏結(jié)構(gòu)基因表達(dá)。 若操縱基因突變，則調(diào)節(jié)基因產(chǎn)生的阻遏蛋白雖有活性，但是不能于操縱基因結(jié)合，因而不能阻遏結(jié)構(gòu)基因表達(dá)。 簡(jiǎn)單的說，就是通過rna的二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)翻譯進(jìn)行調(diào)控： 該操縱子位于mrna的前導(dǎo)序列內(nèi)，前導(dǎo)序列有4個(gè)位點(diǎn) 4，他們1和2，2和3，3和4之間都能形成互補(bǔ)配對(duì)的2級(jí)結(jié)構(gòu)。而基因的核糖體結(jié)合位點(diǎn)位于區(qū)域4。前導(dǎo)序列1能編碼一段前導(dǎo)肽，該位點(diǎn)內(nèi)有連續(xù)的2個(gè)色氨酸密碼子， 當(dāng)高濃度色氨酸存在時(shí)，可以為該位點(diǎn)提供充足的翻譯原料，核糖體可以順利通過區(qū)域1，停留在區(qū)域2上，此結(jié)構(gòu)導(dǎo)致區(qū)域1和2不能互補(bǔ)配對(duì)，而3和4配對(duì)，導(dǎo)致4區(qū)域的核糖體結(jié)合位點(diǎn)被屏蔽，以至于無法翻譯基因信息。 而當(dāng)細(xì)胞內(nèi)色氨酸缺乏時(shí)，沒有足夠的翻譯原料，核糖體停留在1位點(diǎn)，暴露2位點(diǎn)，這樣2和3就互補(bǔ)配對(duì)形成2級(jí)結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致4位點(diǎn)暴露，從而開啟核糖體結(jié)合位點(diǎn)，使基因得以表達(dá)。 ⑴氨基酸合成型操縱子的前導(dǎo)區(qū)序列都可以形成衰減子結(jié)構(gòu)。 ⑵影響形成“莖環(huán)結(jié)構(gòu)”或“polyu”結(jié)構(gòu)的突變都會(huì)降低衰減子的作用，增加結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。⑶前導(dǎo)區(qū)特異密碼子突變成其他密碼子，則衰減子只能起到終止作用。 ⑷衰減子調(diào)控中需要翻譯，利用原核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎同時(shí)進(jìn)行的特點(diǎn)。 ⑸都屬于一種反饋抑制的模式，合成的終產(chǎn)物抑制基因表達(dá)。 真核基因啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，已知某一基因受熱激表達(dá)，試設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)克隆其啟動(dòng)子，并研究其結(jié)構(gòu)。 原核生物啟動(dòng)子序列包括：cap序列，增強(qiáng)聚合酶的結(jié)合和轉(zhuǎn)錄的起始序列（70~40）；識(shí)別區(qū)（35）；解旋區(qū)（10）；轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)（+1） 真核啟動(dòng)子包括：核心啟動(dòng)子：其中包括轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)或起始子（+1）及轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游25/30bp處富含ta的tata框。 上游啟動(dòng)子元件。包括通常70bp附近的caat框和gc框等。 ⑴可以以cdna為核心，有內(nèi)切酶消化cdna兩側(cè)序列，自身環(huán)化，設(shè)計(jì)何時(shí)的引物擴(kuò)增cdna旁側(cè)序列，尋找啟動(dòng)子區(qū)。 ⑵對(duì)啟動(dòng)子的研究，通常是將啟動(dòng)子連接到報(bào)告基因上，然后用缺失、突變、插入等手段研究改變后的啟動(dòng)子的活性變化，進(jìn)而推知啟動(dòng)子上潛在的順式元件。 轉(zhuǎn)座子序列特征 dna轉(zhuǎn)座子：終端反向重復(fù)序列，轉(zhuǎn)座酶基因；類病毒轉(zhuǎn)座子：兩端長反向重復(fù)序列，整合酶和反轉(zhuǎn)錄酶基因；非病毒轉(zhuǎn)座子：兩端在539。utr和339。utr內(nèi)，其間有兩個(gè)基因，rna結(jié)合酶，一個(gè)同時(shí)有反轉(zhuǎn)錄酶和核酸內(nèi)切酶功能的酶。 為什么原核生物的基因調(diào)控大多采用轉(zhuǎn)錄抑制調(diào)控，而真核生物采用轉(zhuǎn)錄激活。 因?yàn)樵说霓D(zhuǎn)錄較簡(jiǎn)單，步驟較少，采用抑制的方式效率較高，真核的轉(zhuǎn)錄較復(fù)雜，步驟較多，采用激活的方式效率較高。 第14頁 共14頁
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