20xx人教版高中生物選修三12基因工程的基本操作程序ppt同步課件-資料下載頁(yè)
2024-11-16 22:29本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】有這種生物不同的基因，稱(chēng)為基因文庫(kù)。定DNA片段的核酸合成技術(shù)。第一步：加熱至90～95℃,_______________;鏈DNA相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合；酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。如此重復(fù)循環(huán)多次。1．PCR過(guò)程中，需要解旋酶嗎？DNA聚合酶應(yīng)具有什么特點(diǎn)？通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。____________、終止子以及標(biāo)記基因等。細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。合，在一定溫度下完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。程生產(chǎn)人的糖蛋白，可以用大腸桿菌嗎？核生物，細(xì)胞中不含有這兩種細(xì)胞器。________,方法是采用__________技術(shù)。需要做抗蟲(chóng)或抗病的接種實(shí)驗(yàn)等。形成cDNA的過(guò)程和PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖。鏈DNA)，構(gòu)成RNA—DNA中間體。負(fù)鏈DNA復(fù)制成雙鏈DNA。合成DNA的過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行催化。⑤過(guò)程在70～75℃環(huán)境下進(jìn)行，所。但需利用90～95℃高溫使DNA分子解旋。的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合
【正文】 針與轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA分子雜交 若有雜交帶，說(shuō)明插入成功 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA 分子雜交 含目的基因的 DNA探針與轉(zhuǎn)基因生物的mRNA雜交 若有雜交帶，說(shuō)明轉(zhuǎn)錄成功 類(lèi)型 步驟 目的 原理 過(guò) 程 結(jié) 果 分子水平檢測(cè) 第三步 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗原— 抗體雜交 提取蛋白 質(zhì) ,與已知的相應(yīng)抗體雜交 若有雜交帶，表明翻譯成功 個(gè)體水平鑒定 做抗蟲(chóng)、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定功能是否相同 (2020高考海南卷 )回答有關(guān)基因工程的問(wèn)題： (1)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類(lèi)型的限制酶切割 DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生 ________末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生 ________(相同、不同 )黏性末端的限制酶。 例 4 (2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是 ________。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用 ________處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入；為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA，可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與 mRNA雜交，該雜交技術(shù)稱(chēng)為 ________。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA是否翻譯成 ________，常用抗原 —抗體雜交技術(shù)。 (3)如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞 ， 先要將目的基因插入農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的 ________中 ， 然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞 ， 通過(guò) DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的 ________上 。 【 解析 】 (1)限制酶切割產(chǎn)生兩種末端：黏性末端和平末端；若用 DNA連接酶連接兩個(gè)末端，兩個(gè)末端必須是相同的。 (2)基因工程檢測(cè)的方法：檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入 ， 使用 DNA分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄 ， 使用分子雜交技術(shù)；檢測(cè)是否形成蛋白質(zhì) ， 使用抗原 — 抗體雜交技術(shù) 。 (3)基因工程的目的是獲得穩(wěn)定遺傳的新品種 ,因此要把目的基因插入到染色體的 DNA分子中。 【 答案 】 (1)平 相同 (2)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位 Ca2＋ DNA分子雜交技術(shù) 蛋白質(zhì) (3)T DNA 染色體 DNA 變式訓(xùn)練 (2020廣州六中高二檢測(cè) )利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá) ， 可生產(chǎn)人類(lèi)所需的產(chǎn)品 。 下列選項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因完成表達(dá)的是 ( ) A． 棉花細(xì)胞中檢測(cè)到載體上的標(biāo)記基因 B． 山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素的基因 C． 大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因的 mRNA D．酵母菌細(xì)胞中提取到人的干擾素 解析：選 D。基因的表達(dá)即控制蛋白質(zhì)的合成，包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，僅僅轉(zhuǎn)錄出 mRNA還不能叫表達(dá)，只有合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)才能證明目的基因完成了在受體細(xì)胞中的表達(dá)。 【 易誤警示 】 (1)目的基因檢測(cè)與鑒定的三個(gè)步驟 ， 都是在體外進(jìn)行的 。 (2)在 DNA分子、 mRNA分子上檢測(cè)目的基因是否插入、目的基因是否轉(zhuǎn)錄時(shí)，用的探針都是用放射性同位素等標(biāo)記含有目的基因的 DNA片段。
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