20xx人教版高中生物選修三12基因工程的基本操作程序ppt同步課件-閱讀頁(yè)
2024-12-06 22:29本頁(yè)面
【正文】 — 載體連接物 目的基因 — 目的基因連接物 分離純化 (2)載體 — 載體連接物 (3)啟動(dòng)子 mRNA (4)EcoRⅠ 和 BamHⅠ (只答一種酶不可 ) 【 誤區(qū)警示 】 (1)切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶一般是同一種酶 ， 以獲得互補(bǔ)的末端 ，利于重組質(zhì)粒的構(gòu)建 。 要點(diǎn)三 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 不同受體細(xì)胞的常用導(dǎo)入方法 受體細(xì)胞 植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞 微生物細(xì)胞 常用方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法 顯微注射技術(shù) Ca2＋ 處理法 受體細(xì)胞 體細(xì)胞 受精卵 原核細(xì)胞 受體細(xì)胞 植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞 微生物細(xì)胞 轉(zhuǎn)化過(guò)程 以農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法為例 將目的基因插入 Ti質(zhì)粒的 TDNA上 → 農(nóng)桿菌 → 導(dǎo)入植物細(xì)胞 → 整合到受體細(xì)胞的DNA上 → 表達(dá) 將含有目的基因的表達(dá)載體提純 →取受精卵 →顯微注射 →受精卵發(fā)育→ 獲得具有新性狀的動(dòng)物 Ca2＋ 處理細(xì)胞 → 感受態(tài)細(xì)胞 → 基因表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 → 感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子 特別提醒 (1)完成基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ， 需要限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA連接酶 。 (3)目的基因能否在植株細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存并表達(dá)的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細(xì)胞染色體 DNA上 (利用的原理是基因重組 )。其過(guò)程大致如圖所示，請(qǐng)分析回答： 例 3 (1)Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒 ， 其上有 TDNA， 把目的基因插入 Ti質(zhì)粒的 T DNA是利用 T DNA______________________________ ____________________________________________________________的特點(diǎn) 。 (3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法有很多種 ,該題中涉及的是 ________________。 【 解析 】 本題以抗蟲棉的培育過(guò)程為背景 ,考查了運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因作物的步驟、方法。 (2)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化。 (4)目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因。高考海南卷 )回答有關(guān)基因工程的問(wèn)題： (1)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類型的限制酶切割 DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生 ________末端。 例 4 (2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是 ________。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA是否翻譯成 ________，常用抗原 —抗體雜交技術(shù)。 【 解析 】 (1)限制酶切割產(chǎn)生兩種末端：黏性末端和平末端；若用 DNA連接酶連接兩個(gè)末端，兩個(gè)末端必須是相同的。 (3)基因工程的目的是獲得穩(wěn)定遺傳的新品種 ,因此要把目的基因插入到染色體的 DNA分子中。廣州六中高二檢測(cè) )利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá) ， 可生產(chǎn)人類所需的產(chǎn)品 。基因的表達(dá)即控制蛋白質(zhì)的合成，包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，僅僅轉(zhuǎn)錄出 mRNA還不能叫表達(dá)，只有合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)才能證明目的基因完成了在受體細(xì)胞中的表達(dá)。 (2)在 DNA分子、 mRNA分子上檢測(cè)目的基因是否插入、目的基因是否轉(zhuǎn)錄時(shí)，用的探針都是用放射性同位素等標(biāo)記含有目的基因的 DNA片
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