細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與次生代謝物質(zhì)生產(chǎn)a-資料下載頁
2025-01-25 16:38本頁面
【正文】 長和次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)的生物反應(yīng)器，建立最佳的控制和調(diào)節(jié)系統(tǒng)。 從細(xì)胞生長與培養(yǎng)技術(shù)方面講必須滿足以下 3個條件： 培養(yǎng)的細(xì)胞在遺傳上應(yīng)是穩(wěn)定的，以得到產(chǎn)量恒定的產(chǎn)物。 細(xì)胞生長及生物合成的速度快，在較短的時間內(nèi)能得到較高產(chǎn)量的終產(chǎn)物。 代謝產(chǎn)物要在細(xì)胞中積累而不被迅速分解，最好能將其釋放到培養(yǎng)基中。 技術(shù)路線 (1) 選擇適宜的外植體；誘導(dǎo)疏松愈傷組織； (2) 通過含量分析，選擇高產(chǎn)細(xì)胞系 (3) 研究培養(yǎng)條件（達(dá)到高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)）； (4) 建立懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、優(yōu)化培養(yǎng)條件 （達(dá)到高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)）； (5) 小試、中試、優(yōu)化培養(yǎng)條件； (6) 大規(guī)模培養(yǎng) ； (7) 工業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品分離，純化。 提高次生代謝產(chǎn)物產(chǎn)量的方法 （ 1）篩選高產(chǎn)細(xì)胞系 不同植物種類，不同植株及同一植株的不同部位，往往有不同的代謝能力； 通過人工誘變改良細(xì)胞系； 通過遺傳改良篩選細(xì)胞系。 云南紅豆杉東北紅豆杉中國紅豆杉南方紅豆杉雜種紅豆杉 篩選出的高效、高產(chǎn)細(xì)胞株系，有的植物細(xì)胞系其高效、高產(chǎn)性能穩(wěn)定多年，但有的植物細(xì)胞系不穩(wěn)定，因此，還需要定期檢測，更新細(xì)胞株系。?培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分一方面要滿足植物細(xì)胞的生物量增長，另一方面要使細(xì)胞能合成和積累次生產(chǎn)物。故在生長的第一階段使用 生長培養(yǎng)基； 第二階段使用 生產(chǎn)培養(yǎng)基?一般來說增加培養(yǎng)基的 N、 P和 K濃度能促進細(xì)胞生長，而適當(dāng)增加糖濃度則有利于次生產(chǎn)物的合成；而激素需根據(jù)實驗確定?適于植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基主要是 B5和 ER （ 2）優(yōu)化培養(yǎng)基 基本培養(yǎng)基 +激素 +天然復(fù)合物 （ 3）改善培養(yǎng)條件 對于任何一種細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)條件都要通過多次的試驗摸索確定。 eg: 在胡蘿卜愈傷組織培養(yǎng)中，光照條件使紫紅色愈傷組織能夠生成大量的花箐苷，并且低溫條件下，生成量高。 （ 4）培養(yǎng)基中添加前體物質(zhì)? 在細(xì)胞內(nèi)次生代謝物質(zhì)是以初生代謝物質(zhì)為原料，經(jīng)過一系列的化學(xué)轉(zhuǎn)化而合成的，因此，每種次生代謝產(chǎn)物都有一條生物合成途徑。? 前體物質(zhì)：次生代謝物質(zhì)生物合成途徑的中間體物質(zhì) 煙草愈傷組織培養(yǎng)中，將前體物質(zhì) — 煙堿酸加入，會增加煙堿的生成量。 第一步：解決生物量生產(chǎn)（促進細(xì)胞分裂）； 第二步：促進次生代謝物合成，即在細(xì)胞指數(shù)生長停止期前后才更換培養(yǎng)基，有利于次生物質(zhì)的積累。 （ 5）二步培養(yǎng)法（ 6） 使用誘導(dǎo)子 誘導(dǎo)子是能刺激細(xì)胞合成次生產(chǎn)物的物質(zhì)A 生物誘導(dǎo)子：微生物菌絲、提取物、多糖、蛋白質(zhì)類等；植物細(xì)胞碎片、寡聚糖等B 非生物誘導(dǎo)子：輻射、金屬離子演講完畢，謝謝觀看！
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