細胞工程2基本技術(shù)-資料下載頁
2025-01-25 16:38本頁面
【正文】 Suc： 30g Agar： 8gv培養(yǎng)基的選擇： 培養(yǎng)基＝基本培養(yǎng)基＋植物激素 （物質(zhì)基礎(chǔ)） （調(diào)控手段） 生存 ←→ 發(fā)展 培養(yǎng)基的選擇在實質(zhì)上講就是設(shè)計營養(yǎng)物質(zhì)與激素（種類、用量）最佳組合，實現(xiàn)離體細胞的生長、分化與植株再生。而最佳組合的結(jié)論作出，需要研制培養(yǎng)基配方并試驗其效果。 在建立一個新的實驗體系時，為了能研制出一種適合的培養(yǎng)基，最好先由一種已被廣泛使用的基本培養(yǎng)基 (如 Ms培養(yǎng)基或 B5培養(yǎng)基 )開始。當通過一系列的實驗，對這種培養(yǎng)基的物質(zhì)種類、用量、比例關(guān)系作出適當調(diào)整后，即有可能得到一種能滿足實驗需要的新培養(yǎng)基。選擇最佳培養(yǎng)基，常用試驗方法主要有單因子試驗、多因子試驗及廣譜實驗等。 科學(xué)安排研究順序：一、基本培養(yǎng)基的選擇： 通常會以一種或幾種已知的基本培養(yǎng)基為起點，通過實驗確定出合適的營養(yǎng)物質(zhì)水平。二、激素配比的選擇： 通過單因子分析、多因子實驗、正交實驗等方法確定出最佳激素配比模式。三、糖濃度的選?。? 大多數(shù)植物 2％或 3％，少數(shù) 4％；花藥培養(yǎng)時糖濃度要求較高， 7％ ~15％，主要作用在于調(diào)節(jié)基質(zhì)滲透壓。四、 pH值的選?。? 植物組織對 PH值要求不高，一般 ~，個別的喜酸或喜堿，可結(jié)合植物的生長習(xí)性適當調(diào)整，也可通過單因子分析加以確定。五、綜合因子的確定： 在各個單項因子的條件找到后，綜合進行全面實驗，并根據(jù)實驗情況作出適當調(diào)整，即可確定出最佳培養(yǎng)基配方。外植體處理及接種植物離體培養(yǎng)類型： 167。 組織培養(yǎng) 167。 器官培養(yǎng) 167。 細胞培養(yǎng) 167。 原生質(zhì)體培養(yǎng)植物材料的培養(yǎng)與外植體選取 外植體滅菌接種培養(yǎng)及培養(yǎng)條件的控制植物離體培養(yǎng)基本程序外植體來源 v 外植體（ explant） 是指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織、器官等材料，是植物離體培養(yǎng)的基礎(chǔ)材料。 v 用于外植體分離的母體植物材料一般有三種來源： 167。 一是生長在自然環(huán)境下的植物； 167。 二是有目的地培育在溫室控制環(huán)境條件下生長的植物； 167。 三是無菌環(huán)境下已經(jīng)過離體培養(yǎng)的植物。 外植體取材 a. 根據(jù)培養(yǎng)需求選擇植物部位 b. 多年生植物注意樹齡和季節(jié) c. 在不影響培養(yǎng)目的的前提下盡可能選擇自然繁殖器官作外植體外植體滅菌外植體清洗整理殺菌劑滅菌無菌水清洗不同外植體 在滅菌劑濃度、 時間、程序上 應(yīng)有所區(qū)別幾種常用消毒劑的效果比較植物細胞培養(yǎng)環(huán)境控制 光照 溫度pH氣體三 . 培養(yǎng)條件控制 光量 指的是光照強度，因植物類型不同而異。離體培養(yǎng)條件下常用的光量一般為 1000－ 4000lx。 光質(zhì) 即光的波長的影響。離體培養(yǎng)下一般用白熾熒光燈進行光照，光譜成分主要是藍光，光譜波長為 419nm。在離體培養(yǎng)中，根、芽分化的依賴光譜成分不同。光周期 指的是光照和黑暗交替的時間，影響細胞脫分化和再分化的效應(yīng)。 v光照包括：光周期、光量和光質(zhì)三方面 v在組織培養(yǎng)中， 溫度 不僅影響到細胞的增殖和分化，同時在一些特殊培養(yǎng)中常需要采用不同的溫度處理。植物組織培養(yǎng)常用溫度范圍一般在 20℃ ～ 30℃ ，低于15℃ 或高于 35℃ 均會影響培養(yǎng)物的生長。v植物培養(yǎng)通常使用的 pH值 范圍是 ～ 。 pH在 ，培養(yǎng)物就不能正常生長。 167。 外植體對營養(yǎng)成分的吸收及代謝產(chǎn)物的釋放會引起培養(yǎng)過程中 pH變化167。 高壓滅菌會引起 pH變化v培養(yǎng)物的生長需要氧氣。培養(yǎng)室的透氣程度和培養(yǎng)容器的封閉程度均會影響到培養(yǎng)過程中的 氣體交換 ，進而影響培養(yǎng)物的生長狀態(tài)。v細胞工程技術(shù)的核心是無菌操作和培養(yǎng)v實驗室建設(shè)在滿足技術(shù)要求的同時要經(jīng)濟、高效和實用v設(shè)備配置應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)而定v培養(yǎng)基是細胞生長的必須營養(yǎng)，需根據(jù)細胞類型確定適宜配方v適宜的外植體是離體培養(yǎng)的前提。光照、溫度是植物離體培養(yǎng)的基本條件小 結(jié)名詞解釋： 細胞全能性；外植體；脫分化；再分化；愈傷組織擬配制 1LN6貯備液，請計算 KNO3與 ZnSO47H 2O用量（單位： mg）。請說明配制 1L下列培養(yǎng)基的方法 (母液已配置好，請計算各母液用量 ) MS無 ＋ White有 ＋ ＋ BA2＋ ＋ GA3 ＋椰乳 10% + %＋ KNO3400mg＋ Gly200mg作業(yè)演講完畢，謝謝觀看！
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