【正文】 、對干擾素基因特異的 DNA 引物對和 TaqDNA聚合酶。 （ 4）細(xì)胞離體培養(yǎng)時通常表現(xiàn)出：貼壁生長和接觸抑制，因此將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以擴大細(xì)胞貼壁生長的附著面積，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量。 （ 2023山東） 35． 【 生物 — 現(xiàn)代生物科技專題 】 人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2023年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 1）卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可以從已處死的雌鼠 ______中獲取。 （ 2）圖中的高血壓相關(guān)基因作為 ，質(zhì)粒作為 ______二者需用 切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有 有關(guān)。 （ 3）子代大鼠如果 和 __________ ，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型。 目的基因 載體 同種限制酶 限制酶切割位點 檢測到體內(nèi)有相關(guān)蛋白 出現(xiàn)高血壓 卵巢 （ 2023浙江） ada（腺苷酸脫氨酶基因）通過質(zhì)粒 pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是（ ） A．每個大腸桿菌細(xì)胞至少含一個重組質(zhì)粒 B．每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點 C．每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個 ada D．每個插入的 ada至少表達(dá)一個腺苷酸脫氨酶分子 【 解析 】 將切下的目的基因的片段插入質(zhì)粒的切口處，首先堿基互補配對結(jié)合，兩個黏性末端吻合在一起，堿基之間形成氫鍵，再加入適量 DNA連接酶，催化兩條 DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組 DNA分子。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。這是基因工程的第四步工作。已經(jīng)表達(dá)了就說明導(dǎo)入成功。所以 A、 B和 D正確， C錯誤。 C ( 1） 從良種母牛采集的卵母細(xì)胞 ， 都需要進行體外培養(yǎng)， 其目的是 ____________________；從良種公牛采集的精子需 ________后才能進行受精作用 。 （ 2） 在體外培養(yǎng)受精卵時 ， 除了給予一定量的 O2以維持細(xì)胞呼吸外 ， 還需要提供 ____氣體以維持 ________________。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 2023山東 ） 35.【 生物 現(xiàn)代生物科技專題 】 胚胎工程是一項綜合性的動物繁育技術(shù) ， 可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用 。 下圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程 。 使卵母細(xì)胞成熟 獲能 CO2 培養(yǎng)液的 pH “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 胚胎移植 提高優(yōu)良母畜的繁殖率 顯微注射法 牛奶中含有人類白細(xì)胞介素 （ 3） 圖中過程 A稱為 _______________， 它在胚胎工程中的意義在于 _________________________。 （ 4） 研制能夠產(chǎn)生人類白細(xì)胞介素的牛乳腺生物反應(yīng)器 ， 需將目的的基因?qū)肱Ｊ芫?， 最常用的導(dǎo)入方法是 _____________；獲得轉(zhuǎn)基因母牛后 ， 如果______________________________即說明目的基因已經(jīng)表達(dá) 。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 [解析 ]采集到的卵細(xì)胞都要在人工培養(yǎng)到成熟后才能與獲能的精子受精，采集到的精子也需獲能處理才能與卵子結(jié)合；培養(yǎng)基制備時要調(diào) pH以保證細(xì)胞的正常生活環(huán)境；早期胚胎移入受體子宮的過程為胚胎移植，胚胎移植充分發(fā)揮了雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，大大提高了優(yōu)良母畜的繁殖率；基因工程技術(shù)中，導(dǎo)入動物受體細(xì)胞的常用方法是顯微注射法，導(dǎo)入成功后，如果檢測到牛乳中含有人類白細(xì)胞介素，則證明目的基因已成功表達(dá)。 [易錯點擊 ]動物細(xì)胞培養(yǎng)也需調(diào)節(jié) pH，通常加入的物質(zhì)是二氧化碳。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 2023海南） 26．（ 18分）［選 修模塊 3：現(xiàn)代生物科技專題］ 請回答胚胎工程和基因工程方面的問題： （ 1）應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出?試管牛?。試管牛的培育需經(jīng)過體外受精、 ______________、＿＿＿＿＿以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過程。 （ 2）在?試管牛?的培育過程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進行處理使其 ______。另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細(xì)胞和 __________。 （ 3）通常奶牛每次排出一枚卵母細(xì)胞，采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細(xì)胞，常使用的激素是 ____________。 早期胚胎培養(yǎng) 胚胎移植 獲能 第一極體 促性腺激素 獲取目的基因 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 目的基因的檢測與鑒定 顯微注射法 人干擾素基因（或目的基因） 終止子 標(biāo)記基因 受精卵 （ 4）利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀?；蚬こ痰乃膫€基本操作步驟是 ______________、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、 ________________________和 _____________________。若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、 _____＿＿ ___________、＿＿＿ _、＿＿＿＿ ___和復(fù)制原點等。將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是＿＿＿＿ __＿（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺細(xì)胞）。 （ 2023上海）（七）分析有關(guān)基因表達(dá)的資料，回答問題。（ 9分） 取同種生物的不同類型細(xì)胞，檢測其基因表達(dá)，結(jié)果如右圖。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 49. 右上圖是表達(dá)新基因用的質(zhì)粒的示意圖，若要將新基因插入到質(zhì)粒上的 A處，則切割基因時可用的限制酶是 。 A. Hind Ⅲ B. EcoR I C. Eco B D. Pst I B C 48. 現(xiàn)欲研究基因 1和基因 7連接后形成的新基因的功能，導(dǎo)入質(zhì)粒前，用限制酶切割的正確位置是 。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 篩選 BD 50. 新基因與質(zhì)粒重組后的 DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的概率很小，因此需進行 ，才能確定受體細(xì)胞已含有目的基因。 51. 在已確定有目的基因的受體細(xì)胞中，若質(zhì)粒的抗青霉素基因缺失了兩個堿基，將這樣的受體細(xì)胞接種到含有青霉素的培養(yǎng)基中，該細(xì)胞中可能出現(xiàn)的結(jié)果是（ ） 1和 7沒有表達(dá) 1和 7不能連接 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 2023全國卷 Ⅱ ） 5. 下列敘述符合基因工程概念的是（ ） A. B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有 B淋巴細(xì)胞中的抗體基因 B. 將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株 C. 用紫外線照射青霉菌，使其 DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株 D. 自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其 DNA整合到細(xì)菌 DNA上 B 【 解析 】 基因工程是人為轉(zhuǎn)基因的過程。 A為細(xì)胞工程 C為人工誘變 D為自然基因重組 。 （ 2023天津） （ 26分）回答下列 Ⅰ 、 Ⅱ 兩小題。 Ⅰ .（ 14分）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中 tetR表示四環(huán)素抗性基因， ampR表示氨芐青霉素抗性基因， BamHI、 HindIII、 SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答： “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 ____________ 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 __________ 的培養(yǎng)基上進行。 （ 2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是 ______ （填字母代號）。 B. tetR D. ampR HindⅢ 和 BamHⅠ 氨芐青霉素 A “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 3）過程①可采用的操作方法是 _______ （填字母代號）。 B. 大腸桿菌轉(zhuǎn)化 D. 細(xì)胞融合 （ 4）過程②可采用的生物技術(shù)是 ______________ 。 （ 5）對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。這利用了細(xì)胞的 _______ 性。 C 胚胎移植技術(shù) 全能 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 （ 6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 ______ （填字母代號）技術(shù)。 B. 基因序列分析 — 抗體雜交 D. PCR C “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。 2023年 1月15日，漢水丑生標(biāo)記。 “漢水丑生的生物同行”超級群大型公益活動：歷年高考題 PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2023年 1月 15日，漢水丑生標(biāo)記。 【 解析 】 I（ 1）據(jù)圖，僅將人乳鐵蛋白基因切割出來，需要在人乳鐵蛋白基因的左側(cè)用 BanHI切割，右側(cè)用 HindIII切割。當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后， TETR基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而 anpR基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸肝菌首先需要字含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行。 （ 2）基因表達(dá)的調(diào)控序列在啟動子上 (3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動物細(xì)胞，常采用顯微鏡的方法。 （ 4）過程②的左側(cè)是早期胚胎，右側(cè)